VAGINA ARTIFICIAL ELECTROEYACULADOR

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1 TECNOLOGÍA DEL SEMEN CAPRINO VAGINA ARTIFICIAL Época de actividad reproductiva. Mismo operario y condiciones. Animales en celo (Benzoato de estradiol: : 100 g horas). Estimular al macho (soltar hembra, cambiarla, animarlo): tiempo de latencia minutos. Inhibiciones: Debida al hombre. Homosexualidad. Sanitaria. ELECTROEYACULADOR

2 CONTROL DE LA CANTIDAD Y LA CALIDAD DEL SEMEN I VOLUMEN DEL EYACULADO 1-1,51,5 ml CONCENTRACIÓN DEL EYACULADO espermatozoides. Apreciación de la consistencia del eyaculado. Contaje (cuenta hematíes o cámara de Burker) Semen diluido (0,01 ml semen + 4 ml suero fisiológico formolado: : 0,9% ClNa + 0,1% formaldehído en agua destilada) 160 cuadrículas de 1/400 mm 2. Contraste de fases. Medida de densidad óptica (a 550 nm) MOTILIDAD MASAL Semen puro a 80 aumentos, placa calefactable. Escala del 0 al 5 MOTILIDAD INDIVIDUAL Semen diluido espermatozoides (200 aumentos).

3 FORMAS DE LOS ESPERMATOZOIDES NORMAL GOTA CITOPLASMÁTICA FORMAS ANORMALES: CABEZA FORMAS ANORMALES: PIEZA INTERMEDIA

4 FORMAS ANORMALES

5 ALTERACIONES DEL ACROSOMA

6 SISTEMAS DE ANÁLISIS DE IMÁGEN MOTILIDAD.

7 SISTEMAS DE ANÁLISIS DE IMÁGEN CONCENTRACIÓN.

8 CONTROL DE LA CANTIDAD Y LA CALIDAD DEL SEMEN II PORCENTAJE DE ESPERMATOZOIDES MÓVILES (VIVOS Y MUERTOS) Eosina/nigrosina nigrosina. No frecuente en caprino. Eosina (1g) + nigrosina (2g) + tricitrato de sodio (3,57g) + agua destilada (100 ml). ph 6,7-6,8. 6,8. Contar 150 espermatozoides. Coloreado en rosa o rojo: muertos TEST DE TERMORRESISTENCIA Semen diluido espermatozoides. Incubación a 37-38º. 38º.

9

10 CONSERVACIÓN DEL SEMEN LAVADO DEL SEMEN

11 Secreciones de la glándulas bulbouretrales en el plasma seminal: LIPASA (PRLP2 familia) Leche descremada del diluyente (triglicéridos residuales 0.6 g/l) Degradación de triglicéridos por la lipasa Ácidos grasos libres (ácido oléico) tóxico para los espermatozoides Solución : - actual: eliminación del plasma seminal - futura (?): inhibición de la lipasa

12 CONSERVACIÓN DEL SEMEN LAVADO DEL SEMEN Glándulas bulbouretrales del macho: enzima (fosfolidasa o lecitinasa) ) hidroliza la lecitina de la yema de huevo. Fracción proteica BU-III, interacciona con la leche e inhibe la motilidad espermática e induce la reacción acrosómica. Separación del plasma seminal. Recolección. Dilución en suero fisiológico Krebs-Ringer Ringer-Glucosa. Centrifugado: 15 minutos, g. Adición del diluyente. SEMEN REFRIGERADO Conservar a 5ºC durante 24 horas. No requiere lavado. Proteger el espermatozoide con yema de huevo o leche descremada (184 mg de glucosa anhidro, 100 ml de agua bidestilada,, 10 g de leche en polvo con menos de 1% de grasa, hervir, enfriar y añadir 50 mg de estrepto y UI de penicilina). Añadir el diluyente a temperatura ambiente hasta la concentración deseada. Colocar el tubo de recolección en agua en el refrigerador durante 30 minutos. Colocar en pajuelas (0,25 ml,, 100 millones de esp.).

13 Efecto de la duración de conservación a 4 C sobre la fertilidad de la IA (n=672) (Leboeuf et al., 2004) % partos + abortos 80 75,4 63, ,1 34,4 0 4 (n=167) 28 (n=169) 52 (n=153) 76 (n=183) Duración de conservación (h)

14 CONSERVACIÓN DEL SEMEN SEMEN CONGELADO Evitar la formación de cristales intra y extracelulares. Se pueden utilizar los mismos diluyentes que con el semen refrigerado. Se debe realizar una primera dilución con los diluyentes antes mencionados y una segunda con un crioprotector que proteja las células (leche de vaca descremada + glucosa + 7% de glicerol). La refrigeración debe ser lenta de 1º C cada minutos. Una vez alcanzada los 4-5ºC 4 se debe esperar de 1 a 5 horas (tiempo de equilibración) ) a esa temperatura. Añadir diluyente glicerado (14% de glicerol). Acondicionar el semen en las pajuelas. Congelación en vapores de N 2. % eyaculados utilizables después congelación: n: 70%. Número de dosis de IA por macho/año: o: 800 a 1500 fotoperiodo odo natural (estación) a 2500 tratamientos fotoperiódicos icos.

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16 MÉTODOS DE MEJORA DE TASA RECOLECCIÓN SELECCIONAR LOS MACHOS Animales usados en un centro de inseminación: Datos genéticos. Animales jóvenes: esquemas de selección. 1) Caracteres fenotípicos: Aplomos, tracto genital. Defectos genéticos. Fertilidad. Fertilidad intersexualidad. Animales mochos: 2) Características reproductivas Tamaño testicular: circunferencia escrotal, orquidómetro. Calidad del semen: cantidad espermatozoides anormales, motilidad, concentración, morfología. Comportamiento sexual: líbido,, capacidad de cubrición, tiempo de reacción, número de hembras cubiertas. Hay que tener en cuenta la época del año de la valoración.

17 MÉTODOS DE MEJORA DE TASA RECOLECCIÓN MODIFICAR RITMO DE RECOLECCIÓN Depende de las reservas en el epidídimo. MODIFICACIÓN DE FACTORES MEDIOAMBIENTALES La alimentación: Elevado nivel proteico de la ración que debe comenzar al menos 6 semanas antes del periodo deseado.

18 Walkden-Brown et al. 1991

19 MÉTODOS DE MEJORA DE TASA RECOLECCIÓN MODIFICAR RITMO DE RECOLECCIÓN Depende de las reservas en el epidídimo. MODIFICACIÓN DE FACTORES MEDIOAMBIENTALES La alimentación: Elevado nivel proteico de la ración que debe comenzar al menos 6 semanas antes del periodo deseado. Tratamientos fotoperiódicos: 2 meses de días largos y 3 meses de días cortos, para adelantar la pubertad. Régimen fotoperiódico acelerado: 2 estaciones sexuales en un año. Alternancia rápida de días largos y cortos: un mes de días largos y otro de días cortos, evita la disminución de la actividad reproductiva.

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