DEGRADACIÓN DE LA LACTOSA POR LACTOBACILUS HASTA ÁCIDO LÁCTICO

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1 DEGRADACIÓN DE LA LACTOSA POR LACTOBACILUS HASTA ÁCIDO LÁCTICO I. INTRODUCCIÓN Los organismos aerobios así como los anaerobios rompen la molécula de glucosa para su catalización, este camino es usado, este camino es usado casi universalmente en las etapas iniciales de este proceso. La glucólisis es la vía metabólica formada por las reacciones secuenciales que convierten a glucosa en piruvato, simultáneamente ocurre la fosforilación de ADP para producir ATP. En los organismos anaerobios el piruvato se reduce a lactato, esto también sucede en los mamíferos cuando hay suministro insuficiente de oxígeno al músculo. En las levaduras, el piruvato se transforma en etanol, A todos estos procesos se les denomina genéricamente por razones históricas fermentaciones. Los organismos que viven en anaerobiosis y que utilizan a la fermentación como fuente de energía se pueden dividir en dos clases: los anerobios estrictos y los anerobios facultativos. Los primeros comprenden pocas especies de bacterias y de invertebrados inferiores. En cambio los anerobios facultativos, obtienen la energía fermentando la glucosa por la misma vía degradativa que los anaerobios estrictos, pero cuando están en condiciones de aerobiosis continúan degradando los productos finales de dicha vía por medio del oxígeno. Es por esta razón que en los organismos facultativos, la vía anaeróbica de la degradación de glucosa es una primera etapa obligatoria de la fase aeróbica de la respiración. Esto ocurre en muchos hongos, bacterias, levaduras y también en las células aeróbicas de animales y plantas superiores. Las bacterias del ácido láctico obtienen energía exclusivamente por la fermentación. Todas las fermentaciones siguen el eje central de la vía glucolítica, es decir, la transformación de la glucosa hasta piruvato. La secuencia de la reacciones de la fermentación láctica realizada por las bacterias Bacillum lactis acidi es semejante a la del músculo de mamífero. En el caso de la bacteria, la lactosa de la leche es hidrolizada y luego por la glucólisis anaeróbica se transforma en ácido láctico y al mismo tiempo la leche se hace yogur. II. OBJETIVOS - Demostrar que los microorganismos (bacterias) del genero bacillus transforma a la lactosa de la leche en ácido láctico. - Verificar la diferencia entre la leche fresca y la leche que ha sido fermentada en cuanto a su textura y acidez. - Cuantificar la cantidad de ácido láctico producido. - Formular la secuencia de reacciones bioquímicas de la transformación de la lactosa hasta su conversión en glucosa -6-fosfato. Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 1

2 III. MATERIALES Y REACTIVOS - Leche fresca o hervida 200 ml. - Hidróxido de sodio 0,1 N - Yogurt (Bacillus lactis). - Fenolftaleína 1% - Vaso de precipitación 200 ml - Estufa 38 C - Bagueta - Refrigeradora - Bureta 25 ml - ph-metro - Pipeta 5 ml - Pipeta de 1 ml - Matraz de 100 ml - Piseta con agua destilada. IV. DIAGRAMA EXPERIMENTAL 1. Preparación de las muestras: - Colocar 200 ml de leche en 2 vasos (I y II) con 100 ml cada uno. - Observar la textura y medir el ph en cada uno de los vasos. - Agregar al vaso II 5 ml de yogurt y colocar a incubar en baño María a 45 C o en una estufa a 38 C por 24 horas. - El vaso I colocarlo en nevera por 24 horas. - Después de 24 horas verificar nuevamente la textura y el ph de cada uno de los vasos. 2. Prueba cualitativa: - Armar el siguiente sistema: Componentes Tubo (ml) I II Contenido del vaso I 5,0 - Contenido del vaso II - 5,0 Cloruro férrrico 0,5 M 1,0 1,0 - Observar y anotar la coloración en cada uno de los tubos. 3. Prueba cuantitativa: - En un matraz de 100 ml, colocar 20 ml de leche del vaso I, agregar IV gotas de fenolftaleína 1% y valorar con NaOH 0,1 N hasta obtener una coloración ligeramente rosada, anotar el número de ml de NaOH gastados. - Repetir lo mismo para el vaso II. - Cálculos: 1mL de NaOH 0,1 N 0,009 g de ác. Láctico. Relacionar con 100 ml de muestra tomada. Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 2

3 V. RESULTADOS Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 3

4 VI. DISCISIÓN Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 4

5 VII. CONCLUSIONES VIII. BIBLIOGRAFÍA IX. ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 5

6 Q.F. FREDY MARTOS RODRÍGUEZ 6