Ca p í t u l o 9 Muestreo, preservación e identificación de moscas de la fruta
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- Juan José Serrano Miranda
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1 Ca p í t u l o 9 Muestreo, preservación e identificación de moscas de la fruta Neliton Marques da Silva INTRODUCCIÓN Entre las plagas de la fruta de América tropical, las moscas de la fruta son consideradas una de las más preocupantes, debido al gran impacto económico que causan, ya que representan plagas primarias para la mayoría de los cultivos frutales. Se trata de insectos multivoltinos con un potencial biótico relativamente alto y una gran capacidad para infestar diferentes especies de frutos nativos y exóticos; éstas pertenecen al orden Díptera, y a la familia Tephritidae. Se distinguen cinco géneros importantes de esta plaga: Anastrepha, Bactrocera, Ceratitis, Rhagoletis y Dacus, que se extienden globalmente, excepto en la Antártida (White y Elson- Harris, 1992). Algunos estudios han acentuado aspectos ecológicos y etológicos de las moscas de la fruta, en su mayor parte, enfocados a las fases de pupa y larva (Silva et al., 1996; Zucchi et al., 1996). Las moscas de la fruta muestran un comportamiento y una taxonomía complejos (Bateman, 1972; Steck y Wharton, 1988). Su clasificación se basa exclusivamente en los caracteres morfológicos del adulto, y su sexo es fácilmente distinguible debido a que las hembras tienen un prominente ovopositor, con una punta larga y delgada, al final del abdomen. Las características taxonómicas que permitan distinguir sexos entre pupas y larvas aún no se han determinado (Salles, 2000). Los daños que producen las moscas de la fruta se dan durante la fase inmadura, el periodo durante el cual la larva destruye la pulpa de la fruta, volviéndola 281
2 inservible para cosecha o consumo. Antes de llegar al estado adulto, las larvas migran de la fruta para pupar en el suelo (Ilustración 8a); por lo tanto, la mosca de la fruta es un habitante temporal del suelo, pues sólo permanece ahí durante una etapa de su vida. Después de que la fruta infestada cae, las larvas se mueven sobre la superficie del suelo buscando condiciones adecuadas para su desarrollo y penetran hasta una profundidad aproximada de 10 cm para entrar en la fase de pupa. Esta profundidad varía dependiendo de las condiciones físicas del suelo, sobre todo, en función de la temperatura, la humedad y la textura. El desarrollo de la pupa ocurre en el suelo; por ello, durante una parte de su ciclo de vida, la mosca de la fruta se puede considerar un organismo del suelo. La fase pupal dura de 8 a 10 días, dependiendo de la temperatura y de la humedad, y constituye una de las fases más vulnerables al estrés abiótico y a muchos enemigos naturales, en su mayor parte depredadores y entomopatógenos como bacterias, hongos y nematodos, que también forman parte de la biota del suelo (véase Capítulo 10). Estos antagonistas juegan un papel importante en el control biológico de las moscas de la fruta. Aun cuando las larvas son parasitadas dentro de los frutos, el parasitoide adulto puede emerger en el suelo, de ahí que, resulta de suma importancia que en el diseño de la estrategia del manejo integrado de plagas se tome en cuenta la biodiversidad del suelo como un factor fundamental que influye en la mortalidad de larvas y pupas. Debido a que el ciclo de vida involucra las partes aéreas de la planta hospedera, junto con el suelo, los procedimientos para muestrear varían de acuerdo con la fase y el propósito. En el caso de la mosca adulta, que es diurna y responde a estímulos visuales y olfativos, el uso de trampas con cebos alimenticios es lo más recomendable; sin embargo, esta técnica representa una relación ambigua entre la mosca y su hospedero, puesto que ésta sólo se puede establecer usando frutos infectados, ramas o semillas en donde las larvas de la mosca residían previamente. MUESTREO DE LA MOSCA DE LA FRUTA El muestreo de adultos de moscas de la fruta se lleva a cabo utilizando trampas McPhail (Ilustración 8b) con atrayente alimenticio, normalmente, 200 ml de proteína hidrolizada de maíz (5% en agua preservada con tetraborato de sodio con un ph entre 8.5 y 9). De manera alternativa, se puede utilizar jugo de fruta al 10%, azúcar al 10% o jarabe de caña de azúcar al 10%. Los cebos deberán reemplazarse cada semana y los especímenes capturados, removidos. 282 Manual de biología de suelos tropicales
3 Las trampas se instalan en el centro del dosel de los árboles y su localización será tomada con GPS. El número de trampas por unidad de superficie puede variar de acuerdo con los objetivos del proyecto. Si el objetivo es monitorear plagas, una trampa cada cuatro hectáreas resulta suficiente. Cuando el objetivo es el manejo integrado, la densidad deberá ser de tres a cinco trampas por hectárea o estar de acuerdo con el tipo de uso de suelo existente en el predio; es decir, cada tipo de uso de suelo existente debe ser monitoreado con la misma densidad de trampas. Hasta cinco trampas por hectárea pueden ser instaladas en áreas con arbustos o árboles (jardines caseros); mientras que, hasta tres por hectárea son las recomendadas para plantaciones herbáceas. En el caso de plantas herbáceas, la trampa puede utilizar como soporte tres palitos, dispuestos en forma de trípode, o bien, colocarse sobre un árbol adyacente, si lo hay. Las trampas deberán ser colocadas de manera equidistante. COLECCIONANDO LOS ADULTOS CAPTURADOS Debido a la probabilidad de que distintos grupos taxonómicos de insectos sean capturados, primero será necesario separar las moscas de la fruta de otros especimenes; esto se puede llevar a cabo en el campo o en el laboratorio. Cuando los cebos son reemplazados, el contenido de la trampa deberá pasarse por una malla de nylon de 1.5 mm para remover las moscas y separarlas de otros grupos taxonómicos utilizando unas pinzas curvas. Se anota el sexo y se colocan en frascos de vidrio (de alrededor de 50 ml) etiquetados, con alcohol al 70% para su identificación posterior. La etiqueta deberá incluir la información básica de muestreo y el número de la trampa. Por ejemplo: Manaus-AM Brasil 04 05`S; W 23/Marzo/2006 Silva, N. M. Trampa No 5 También deberá ser registrada la identidad de individuos de otros grupos taxonómicos capturados en las trampas. Muestreo, preservación e identificación de moscas de la fruta 283
4 MUESTREO DE LA FRUTA Para poder establecer la relación entre las especies Anastrepha con sus plantas hospederas, se recogen frutos al azar en diferentes agroecosistemas y en diferente estado de de maduración. Los frutos deberán ser colectados directamente de los árboles o inmediatamente después de caer al suelo. Los frutos muestreados se separan por especie, se protegen con bolsas de tela y se transportan en cajas térmicas hasta el laboratorio. Posteriormente, se pesan, se cuentan y se separan para cada sitio de muestreo; se depositan en charolas de plástico con una capa de vermiculita o arena fina como substrato de pupación. Finalmente, las charolas se cubren con una tela de gasa y se aseguran con ligas de plástico para prevenir que se escapen las moscas adultas al emerger. OBTENCIÓN DE LAS PUPAS La vermiculita o arena fina deberá pasarse por una malla galvanizada, de 1.5 mm, para separar las pupas que posteriormente serán colocadas en jaulas, con sus respectivas etiquetas de identificación, para permitir la salida de las moscas adultas y/o parasitoides. Estas jaulas deberán ser examinadas diariamente. Los adultos emergidos serán retenidos, durante 48 horas para permitir el endurecimiento cuticular y la pigmentación completa de los patrones alares (Ilustración 8c): características de gran importancia para la identificación taxonómica. Después de emergidas, las moscas adultas son alimentadas con una solución de miel disuelta en agua al 10% que será cambiada cada día. Las fechas de emergencia, el número y el sexo deberán quedar registrados con relación a las moscas o parasitoides. Finalmente, los especimenes recuperados son fijados en una solución de alcohol al 70%. La determinación de la relación de sexos hembra-macho (SR) para moscas adultas y parasitoides se hace de acuerdo con Silveira-Neto (1976) en función de la siguiente ecuación: Número de hembras SR= Número de hembras + Número de machos IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES La identificación taxonómica de especies de Tephritidae se basa en un examen ventral de la región apical, el aculeo de la hembra bajo un microscopio estereoscó- 284 Manual de biología de suelos tropicales
5 pico (40X) o mediante el montaje sobre laminillas para examinar estas estructuras, utilizando un microscopio de transmisión (100X). En primer lugar, es necesario extraer completamente el aculeo de la funda del ovipositor con ayuda de agujas o pinzas (Ilustración 8d), como lo describe Zucchi (1988). La identificación de especies del género Anastrepha se logra para las hembras adultas, comparando el patrón alar, coloración de cuerpo, mesonoto, tergito medio, abdomen y, especialmente, las características morfológicas del aculeo (Ilustración 8e) con especímenes de museo o usando claves taxonómicas, como las de Lima (1934), Stone (1942), Foote (1967), Steyskal (1977), Silva (1993), Ronchi-Teles (2002), Zucchi (1978 y 2000) y Norrbom (1985). Es recomendable que se depositen ejemplares de referencia en colecciones de museo, o que éstas sean incorporadas a la colección institucional del laboratorio. REFERENCIAS Bateman, M. A. (1972) The ecology of fruit flies, Annual Review Entomology, vol. 17, pp Foote, R. H. (1967) Family Tephritidae, in M. Vanzolini (ed) A Catalogue of the Diptera of the Americas South of the United States, Secretaria da Agricultura, Departamento de Zoologia, São Paulo. Lima, A. C. (1934) Moscas-de-frutas do gênero Anastrepha Schiner, 1868 (Diptera: Trypetidae), Memórias do Instituto Oswaldo Cruz (Rio de Janeiro), vol. 28, no. 4, pp Norrbom, A. L. (1985) Phylogenetic analysis and taxonomy of the cryptostrepha, daciformis, robusta and schausi species groups of Anastrepha Schiner (Diptera: Tephritidae), PhD thesis, The Pennsylvania State University, Pennsylvania. Ronchi-Teles, B. (2002) Ocorrência e flutuação populacional de espécies de moscasdas-frutas eparasitóides com ênfase para o Gênero Anastrepha (Diptera: Tephritidae) na Amazônia Brasileira, PhD Thesis, Federal University of the Amazon (UFAM) and National Institute for Agricultural Research (INPA), Manaus, Brazil. Salles, L. A. (2000) Biologia e ciclo de vida de Anastrepha fraterculus (Wied.), in A. Malavasi and R. A. Zucchi (eds) Moscas-das-frutas de importância econômica no Brasil: Conhecimento básico e aplicado, Ribeirão Preto, Holos, Brazil. Silva, N. M. (1993) Levantamento e análise faunística de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) em quatro locais do Estado do Amazonas, PhD Thesis, Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, University of São Paulo, São Paulo. Muestreo, preservación e identificación de moscas de la fruta 285
6 Silva, N. M., Zucchi, R. A. y Silveira Neto, S. (1996) The natural hosts plants of Anastrepha (Diptera: Tephritidae) in the State of Amazonas, Brazil, in G. J. Steck and B. A. MacPherson (eds) Fruit Fly Pests: A World Assessment of their Biology and Management, CRC Press, Boca Raton. Silveira Neto, S., Nakano, O., Barbin, D. y Nova, N. A. V. (eds) (1976) Manual de Ecologia dos Insetos, Ceres, São Paulo. Steck, J. y Wharton, R. A. (1988) Description of immature stages of Anastrepha interrupta, A. limae, and A. grandis (Diptera: Tephritidae), Annals of the Entomological Society of America, vol. 81, no. 6, pp Steyskal, G. C. (1977) Pictorial Key to Species of the Genus Anastrepha (Diptera: Tephritidae), Entomological Society of Washington, Washington DC. Stone, A. (1942) The fruit flies of the genus Anastrepha, United States Department of Agriculture Miscellaneous Publications, vol. 439, pp White, I. M. y Elson-Harris, M. M. (1992) Fruit Flies of Economic Significance: Their Identifications and Bionomics, CAB International, Wallingford. Zucchi, R. A. (1978) Taxonomia das espécies de Anastrepha Schiner 1868 (Diptera: Tephritidae) assinaladas no Brasil, PhD Thesis, Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, University of São Paulo, São Paulo. Zucchi, R. A. (1988) Moscas-das-frutas (Dip., Tephritidae) no Brasil: taxonomia, distribuição geográfica e hospedeiros, in H. L. M. de Souza (ed) Moscas-das-frutas no Brasil, Campinas, Fundação Cargill. Zucchi, R. A. (2000) Taxonomia, in A. Malavasi and R. A. Zucchi (eds) Moscas-dasfrutas de importância econômica no Brasil: Conhecimento básico e aplicado, Ribeirão Preto, Holos Zucchi, R. A., Silva, N. M. and Silveira Neto, S. (1996) Anastrepha species (Diptera: Tephritidae) from the Brazilian Amazon: Distribution, hosts and lectotype designations, in G. J. Steck and B. A. MacPherson (eds) Fruit Fly Pests: A World Assessment of their Biology and Management, CRC Press, Boca Raton. 286 Manual de biología de suelos tropicales
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