MICOTOXINAS - 2ª Parte

Transcripción

1 CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN Jornadas de Referencia sobre Micotoxinas e Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos (12 de Junio de 2014) MICOTOXINAS - 2ª Parte Pedro A. Burdaspal Área Química - Unidad de Toxinas y HAP Centro Nacional de Alimentación Agencia Española de Consumo, Seguridad Alimentaria y Nutrición Majadahonda, Madrid

2 Ejercicios de aptitud organizados por el IRMM - JRC en 2013 Multitoxinas (AFB1, DON, FB1) en cereales Patulina en zumo de manzana

3 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre AFB1, DON, FB1 en cereales Participantes: 71 laboratorios 28 Laboratorios Nacionales de Referencia para micotoxinas en alimentos y 11 Laboratorios Nacionales de Referencia para micotoxinas en piensos, de 28 Estados miembros. 4 Laboratorios Nacionales de Referencia para micotoxinas de 3 os países 28 Laboratorios de Control Oficial de 9 Estados miembros

4 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre AFB1, DON, FB1 en cereales Resultados: Participantes Z > 2 Valor asignado n n % AFB1 (A) ,90 µg/kg AFB1 (B) ,4 µg/kg DON (A) ,10 mg/kg DON (B) ,29 mg/kg FB1 (A) ,6 mg/kg FB1 (B) ,2 mg/kg

5 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre AFB1, DON, FB1 en cereales Conclusiones : La mayoría de los participantes obtuvieron resultados satisfactorios. Casi todos los laboratorios tenían problemas con la determinación de FB1 en niveles más altos importantes desafíos analíticos para la determinación fiable de FB1 en estos niveles. Se observó que los valores de consenso y los valores asignados coinciden muy bien para AfB1 y DON, y también para FB1 para la muestra A, pero en caso de los resultados para FB1 en la muestra B no hay consenso valor significativo puede ser calculado usando los resultados de los participantes, lo que subraya la importancia de generar valores de referencia externos para tales muestras críticas. El EU-RL investigará las posibles razones para la amplia dispersión en los resultados de FB1 registrados para la muestra B y propondrá soluciones para mejorar la capacidad de medición para la determinación de FB1.

6 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre Patulina en zumo de manzana Participantes: 51 laboratorios de 27 Estados miembros. 30 Laboratorios Nacionales de Referencia para micotoxinas en alimentos. 21 Laboratorios de Control Oficial.

7 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre Patulina en zumo de manzana Resultados: Participan tes Z 2 Valor asignado n n % µg/kg Sample A Sample A

8 Resultados ejercicio de aptitud de 2013 sobre Patulina en zumo de manzana Conclusiones: La mayoría de los laboratorios obtuvieron buenos resultados. La mayoría estimó la incertidumbre. Las principales técnicas utilizadas para determinar Patulina fueron HPLC-UV (74%) y LC-MS (20%).

9 INFORME DE LA REUNIÓN DE LABORATORIOS DE REFERENCIA DE LA EU

10 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Asistentes : 35 Laboratorios de Referencia Nacionales de la UE 1 Delegado de EFSA 1 Delegado de IFA-Tulln (Austria) 1 Delegado del GIZ (ex JRC) 1 Delegado del NEN 1 Delegado de FAPAS 1 Delegado de la DG SANCO Lugar: Roma (Italia) Fecha: 10 y 11 de Junio de 2013

11 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Contenido: Monitoring recommendation for Ergot Alkaloids (José Ángel Gómez Ruíz, EFSA) Prevalent fungal metabolites escaping routine analysis (M. Sulyok, IFA Tulln) Update on current plans and development for new legislation (F. Verstraete) Mandate of the commission to CEN for the prepartion of standarized methods of analysis for mycotoxins (M. de Vreeze) Method trends in FAPAS PTs (M. Sykes, FAPAS) Method validation study OTA in paprika (Z. Kunsagi) Comments raised by assessors/auditor in NRLs during ISO assessments (J. Keegan) Sample preparation (A. Solyakov) Identification criteria in LC-MS/MS determination of mycotoxins (H. Mol) Update on the guidance document for screening methods (J.Stroka) Future PT rounds for NRLs and workprogram of the EURL (J. Stroka) Result of the PT 2012 Circa Platform

12 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Sample preparation (A. Solyakov) - Medida de la incertidumbre en el muestreo - Falta de homogeneidad en la preparación de muestras (higos) Slurry Se decide crear Grupo de trabajo Preparación de muestras a cargo de A. Solyakov

13 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Comments raised by assessors/auditor in NRLs during ISO assessments (J. Keegan) - Calibración pipetas automáticas, pusieron en duda demostración que las pipetas funcionan correctamente entre calibración y calibración. Sugerencia: calibrar cada 3 meses. - Trazabilidad de los patrones de calibración. - Uso de métodos estandarizados cuando sea posible - Ninguna prueba independiente de la veracidad del método - Solicitud para utilizar CRM en lugar de muestras enriquecidas como QC - Rango de validación. - Uso alternativo de patrones para el spiking y la calibración. - Como demostrar concentración de un patrón adquirido comercialmente, si no se dispone de medios. Realización de un documento técnico al respecto disponible para todos los Laboratorios de Referencia independientemente de su entidad nacional de acreditación

14 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Identification criteria in LC-MS/MS determination of mycotoxins (H. Mol) Se forma un grupo de trabajo para criterios en LC-MS/MS liderado por Hans Mol. Resultados encuesta laboratorios: LC-MS/MS: 14 labs no utilizan técnicas LC-MS/MS 6 labs sólo para confirmar 24 labs como método de cuantificación Para aflatoxinas apenas se usa, las toxinas que más se determinan por LC- MS/MS HT2, T2, DON y ZON. Purificación muestras (LC-MS/MS): 9 labs no usan cleanup 9 labs mycosep 5 labs QuEChERs 9 labs otras

15 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Identification criteria in LC-MS/MS determination of mycotoxins (H. Mol) No hay legislación específica, únicamente un documento CEN: CEN/TR 16059:2010 (E). Criterios RT, ion ratio SANCO/12571/2013 Evitar uso de iones que sean producto de la pérdida de H2O y NH3 (FDA ORA-LAB 10 y FBA guidance for industry 118: utilizados en USA)

16 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Identification criteria in LC-MS/MS determination of mycotoxins (H. Mol) Criterios propuestos: Cromatografía: RT 2 x t 0 (RT 0,05-0,10 min) MS/MS: - Dos transiciones como mínimo - Evitar iones que sean producto de pérdida de H2O y NH3 - S/N de todos los iones, incluyendo el cualificador 3. - Cuantificador y cualificador deben coincidir en tiempo de retención y forma de pico. - Ion ratio siempre 20% / 25% / 30% y tomar como referencia la media de todos los patrones de la secuencia.

17 Reunión de Laboratorios de Referencia de la UE Method validation study OTA in paprika (Z. Kunsagi) Primera validación interlaboratorios Ocratoxina A en pimentón/chili Criterios: Reglamento (CE) nº 401/2006 RSDr % 20 RSDR % 30 % de Recuperación Rango de concentraciones: 2 µg/kg - 85 µg/kg Recuperaciones obtenidas: 83,7 % - 87,5 % El método será considerado para método CEN.

18 FORO sobre MICOTOXINAS Fecha: 5 y 6 de septiembre de 2013 Lugar: Bruselas (sede de la Comisión) Presidente: Frans Verstraete Representación española: Patricia Pertejo (MAGRAMA) y Pedro Burdaspal (AESAN-CNA)

19 Temas desarrollados: FORO sobre MICOTOXINAS 1.- Aflatoxin contamination of maize in (Frans Verstrate, Europena Commission) 2.- Mycotoxins management Traders way of doing (Paul Rooke, COCERAL) 3.- Mycotoxyn mastering as part of feed safety - Belgian approach (Karen Kerckhofs, BEMEFA) 4.- OQUALIM monitoring plan, a collective tool for feed business operators to manage mycotoxin risk (Nicolas Destombes, OQUALIM) 5.- Improving mycotoxins measurements by combining rapid analysis with dust sampling (Scarlett Biselli, EUROFINS) 6.- Mycotoxin contamination in Italy and management experiences (Prof. Roberto Causin, Grupo de Trabajo sobre Micotoxinas de Italia)

20 Temas desarrollados: FORO sobre MICOTOXINAS 7.- MycoRed integrated strategies for aflatoxin minimazation in food and feed chain (Antonio F. Logrieco, CNR Bari) 8.- Aflatoxin B1 in rice bran as feed ingredient and following contamination of consumer milk in Sweden: case study (Alexey Solyakov, National Veterinary Institute Sweden) 9.- Occurrence of T-2 and HT-2 toxin in feed (Arnaud Bouxin FEFAC) 10.- Reduction of T-2 and HT-2 toxin in UK cereal production (Simon Edwards, Harper Adams University) 11.- T-2 and HT-2 toxins in barley and malt 12.- Zearalenone in breakfast cereals: challenges for compliance with current masimum levels (John Woodward, CEEREAL)

21 Temas desarrollados: FORO sobre MICOTOXINAS 13.- T-2 and HT-2 toxin in oats and oat milling products (Jens Meyer, Derek Croucher, CEEREAL) 14.- T-2 and HT-2 toxins in food in Belgium (Adriaan Vanheule (University College Ghent), Emmanuelle Moons (AFSCA), Christine Vinkx (Public Health Authority)) 15.- T-2 and HT-2 and other mycotoxins in food: results of surveys performed by consumer organisations (Katrien Renders, Test-Achats) 16.- Up to now experiences from the control of mycotoxin risk during crop and feed production in the Czech Republic (Markéta Pospíchalová, Competent Authority Czech Republic) 17.- Guidance on the application of Commission Recommendation 2013/165/EU on the presence of T-2 and HT-2 toxin in cereals and cereal products (Derek Croucher (Britsh Oat and Barley Millers Association BOBMA) and Susan MacDonald (FERA))

22 FORO sobre MICOTOXINAS Temas desarrollados: 18.-Challenges for farmers to cope with the mycotoxin risk (Mike Hambly, COPA - COGECA) 19.- Mycotoxins in the French cereals: progress on knowledge and management of the risk (Benoït Meleard, INTERCEREALES/ARVALIS) 20.- Alternaria toxins in feed and food (Theresa Zwickel, BFR Germany) 21.- Conclusions Regulatory outlook on mycotoxins in feed and food Challenges - General Discussion Final statement (Frans Verstraete, European Commission)

23 FORO sobre MICOTOXINAS Micotoxinas: - Seguimiento de las estimaciones del riesgo elaboradas por la EFSA para la Esterigmatocistina y para el Nivalenol. - Eniantinas: Opinión de la EFSA para fin de Beauvericina: Opinión de la EFSA combinada con la de Eniantinas. - Diacetoxiscirpenol: Opinión de la EFSA en curso. - Moniliformina: Idem, aunque puede retrasarse un poco más.

24 FORO sobre MICOTOXINAS Nuevas solicitudes a la EFSA: - Opinión sobre las denominadas toxinas enmascaradas. - Actualización con unos términos de referencia muy concretos acerca del DON y sus ésteres acetilados. - Dictamen específico para el DON acerca del posible aumento de nivel máximo de 750 a 1000 ppb ahora harinas, semolina y copos a base de trigo, maíz y cebada. - Solicitudes priorizadas desde el punto de vista de la gestión del riesgo, entre las siguientes micotoxinas: Penitrem A, Ácido Ciclopiazónico, Ácido Micofenólico, Roquefortina (A,B y C), Emodin A, Ácido Penicílico, Fusarenon X y Fusarin C.

25 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Aflatoxinas Fecha de inicio Serie /Ronda Matriz 20/06/ Pienso para Animales (Base cereal) 03/07/ Cacahuete 05/08/ Almendras (susp.acuosa/slurry del fruto seco) 30/09/ Avellanas (susp.acuosa/slurry del fruto seco) 23/10/ Maiz 07/11/ Chili en polvo 27/11/ Pienso para Animales (Base cereal) 05/01/ Pistachos (susp.acuosa/slurry del fruto seco) 21/01/ Arroz 05/02/ Cacahuete 18/02/ Pimentón 03/03/ Higos secos (susp.acuosa/slurry del fruto seco)

26 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Aflatoxina M1 Fecha de inicio Serie /Ronda Matriz 05/09/ Leche en polvo 20/03/ Leche en polvo

27 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Ocratoxina A Fecha de inicio Serie /Ronda Matriz 09/07/ Harina de cebada 29/07/ Cerveza 13/08/ Café verde 13/08/ Pimienta negra 17/09/ Pimentón 30/10/ Café soluble 07/11/ Cacao 10/12/ Vino 09/01/ Harina de maíz 06/02/ Café tostado 06/02/ Pienso para Animales 31/03/ Vísceras (productos casquería)

28 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Patulina y Fumonisinas Serie /Ronda Matriz 30/06/ Zumo de manzana (limpio) 22/09/ Puré de manzana 09/02/ Zumo de manzana (turbio) 28/08/ Harina de maíz

29 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Toxinas del Fusarium Fecha de envío Serie /Ronda Matriz Analitos 17/07/ Harina de Avena Toxinas T-2 y HT-2 08/10/ Harina de maíz Tricotecenos 08/10/ Aceite de maíz Zearalenona (ZON) 05/11/ Pienso animal Zearalenona (ZON) 05/11/ Pienso animal Deoxinivalenol (DON) 08/01/ Galletas Deoxinivalenol (DON) y Zearalenona (ZON) 16/01/ Harina de trigo Deoxinivalenol (DON) 13/02/ Pienso animal Toxinas T-2 y HT-2

30 Ejercicios de aptitud: de FAPAS abiertos en Junio Varias toxinas Fecha de envío Serie / Ronda 24/07/ * Matriz Alimento infantil 22/08/ Maíz 10/10/ * Maíz 10/12/ Maíz Analitos Aflatoxina B1, B2, G1, G2 y Totales, Deoxinivalenol (DON), Zearalenona (ZON), Ocratoxina A (OTA), Fumonisinas B1 y B2 y total Fumonisinas, Toxinas T2 y HT2 y total T2+HT2 Aflatoxina B1, Deoxinivalenol (DON), Zearalenona (ZON), Ocratoxina A (OTA), Fumonisinas B1 y B2 y total Fumonisinas, Toxinas T2 y HT2 y total T2+HT2 Aflatoxina B1, Ocratoxina A (OTA), Deoxinivalenol (DON), Zearalenona (ZON), Fumonisinas B1 y B2 y total Fumonisinas. Aflatoxina B1, Ocratoxina A (OTA), Deoxinivalenol (DON), Zearalenona (ZON). 12/03/ Harina Citrinina y Ocratoxina A (OTA) 11/03/ Harina de trigo * Destinado a laboratorios que utilizan kits ELISA Alcaloides del Ergot

31 Ejercicios de aptitud: de ROMER LABs 2014 Fecha inicio Matriz Analitos 10/10/14 Harina de trigo Zearalenona

32 Ejercicios de aptitud: de TESTVERITAS 2014 Serie / Ronda Matriz Analitos MI1460 Leche bovina liofilizada Aflatoxina M1 CE1461 Queso Aflatoxina M1 SP1462 Pimentón Aflatoxinas B/G WH1463 Harina de trigo Deoxinivalenol (DON) y otros tricotecenos De todos los proficiency test existen dos opciones: - Código A: para laboratorios con métodos de confirmación (resultado cuantitativo obligatorio) - Código B: para laboratorios con métodos de screening (la cuantificación es opcional) Fecha límite: 10 de septiembre de 2014 Próximos Profiency Test: info@testveritas.com Serie / Ronda Matriz Analitos SI1474 Pienso (ensilado) Aflatoxina B/G L1475 Hígado de cerdo liofilizado Ocratoxina A (OTA)

33 Muchas gracias por su atención Se agradece a Sara Martín su colaboración en la preparación de esta presentación.