LABORATORIO. Manual de Derivaciones, sector H E M O G R A M A S HEMOSTASIA. Bioquímicos: Montané, Jorge Mora, Juan Andrés Ramirez, Jorge

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1 HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/ Manual de Derivaciones, sector H E M O G R A M A S Teléfono: int. 297 Consulta de resultados, interno 265 Bioquímicos: Montané, Jorge Mora, Juan Andrés Ramirez, Jorge Técnicos: Melo, Aníbal Parada, Omar HEMOSTASIA Determinación (*) Tipo de Anticoagulante 771 TP (Tpo de protrombina) Plasma Citrato de sodio 3.2% 887 APTT Plasma Citrato de sodio 3.2% 345 Fibrinógeno Plasma Citrato de sodio 3.2% 344 PDF (productos de Plasma Citrato de sodio 3.2% degradacion del fibrinógeno DD Dímero D Plasma Citrato de sodio 3.2% 773 TT (tiempo de trombina) Plasma Citrato de sodio 3.2% CCPN Prueba de corrección Plasma Citrato de sodio 3.2% con plasma normal HEPA Heparina bajo peso Plasma Citrato de sodio 3.2% molecular (HBPM) F5 Factor V Plasma Citrato de sodio 3.2% F7 Factor VII Plasma Citrato de sodio 3.2% F2 Factor II Plasma Citrato de sodio 3.2% F8 Factor VIII Plasma Citrato de sodio 3.2% F9 Factor IX Plasma Citrato de sodio 3.2% F10 Factor X Plasma Citrato de sodio 3.2% F11 Factor XI (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2% F12 Factor XII (discontinuado) Plasma Citrato de sodio 3.2% FVW Factor von Willebrand Plasma C Citrato de sodio 3.2% (cuantitativo) AT3 Antitrombina III Plasma Citrato de sodio 3.2% PROS Proteína S libre Plasma Citrato de sodio 3.2% PROC Proteína C Plasma Citrato de sodio 3.2% Cantidad Temperatura 0.5 ml Refrigerar 1,0 ml Refrigerar 1,0 ml Refrigerar Hemogramas - Hemostasia - 1

2 HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/ Determinación (*) Tipo de Anticoagulante APCR Resistencia a proteína C Plasma Citrato de sodio 3.2% activada LA Anticoagulante lúpico Plasma con Citrato de sodio 3.2% doble centrifugac. AB2 Anticuerpos anti 2 Glicoproteína I (IgG, IgM) ACL Ac. anticardiolipinas (IgG, IgM) Cantidad Temperatura 2.0 ml Refrigerar Suero ml Refrigerar Suero Refrigerar 156 Homocisteína plasmática Ver Anexo I Hemogramas - Hemostasia - 2

3 HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/ HEMATOLOGIA Item Determinación (*) Tipo de Anticoagulante Cantidad Temperatura 475 Hemograma Sangre entera EDTA 2.0 ml Refrigerar (+ 2 frotis) 466 Hematocrito Sangre entera EDTA 1.0 ml (o tres Refrigerar (o capilares) capilares) 470 Hemoglobina Sangre entera EDTA 746 Plaquetas Sangre entera EDTA (+ 2 frotis) 433 Grupo sanguíneo Sangre entera EDTA 0.5 ml Refrigerar 813 Factor Rh Sangre entera EDTA 0.5 ml Refrigerar 184 Prueba de Coombs Directa 185 Prueba de Coombs Indirecta Sangre entera EDTA Suero --- CITOMETRIA, PLAN NACIONAL HIV / SIDA Item Determinación (*) Tipo de Anticoagulante Cantidad Temperatura 400 Linfocitos T CD4 y CD8; rto. de. Sangre entera EDTA 2.0 ml Temperatura ambiente Hemogramas - Hemostasia - 3

4 HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/ ANEXO I Consideraciones preanalíticas importantes y del envío de muestras, por determinación En términos generales para las determinaciones hematológicas y de hemostasia, es suficiente un ayuno de 8 horas, sin estrés ni esfuerzo físico previo a la extracción, ni consumo de alcohol o cigarrillos. El momento ideal de toma de muestra es por la mañana entre las horas 8:00 y 10:00 hs. Las muestras para estudios de coagulación deben obtenerse con el menor éstasis venoso posible (torniquete por menos de 1 minuto), evitando el ingreso de aire a la jeringa, la formación de espuma y contaminación con líquido tisular. Posterior agitación suave e inmediata. Se aconseja NO emplear el sistema Vacutainer por no respetar las condiciones anteriores. s obtenidas de catéter resultan frecuentemente contaminadas por heparina. La presencia de hemólisis visible también es motivo de resultados erróneos en estudios de hemostasia. Si existiera un coágulo en la muestra o la sola presencia de una malla de fibrina, hará a la misma no apta para el análisis, aunque se obtuvieran resultados normales. Una muestra en dichas condiciones puede presentar tiempos falsamente acortados por liberación se sustancias tromboplásticas, tiempos prolongados por consumo de factores, o una combinación de ambos efectos. El anticoagulante indicado para estudios de coagulación es citrato de sodio en concentración de 3,2%, en la relación de 1 volúmen de anticoagulante, y 9 volúmenes de sangre. En casos donde el hematocrito del paciente sea conocido que se encuentre por debajo de 25% o por encima de 55%, en las muestras para coagulación, se deberá ajustar previamente la relación anticoagulante/sangre empleando la siguiente fórmula: sgre entera (ml) = 9 x citrato de sodio (ml) x 55 / (100 Hto) La muestra de sangre para estudios de coagulación de rutina debe centrifugarse por 10 minutos a g (aprox rpm). Para la evaluación de estados trombofílicos se recomienda no estudiar al paciente durante el episodio agudo del evento trombótico, sino luego de 3 meses como mínimo (esta condición no aplica para estudios por biología molecular; no realizados en este centro). La muestra indicada en estos casos es el plasma pobre en plaquetas (PPP). Ver a continuación como obtener el PPP. Obtención de plasma pobre en plaquetas (PPP): Se obtiene por doble centrifugación a alta velocidad. Entre g (aproximadamente 4500 rpm) por el lapso de 10 minutos cada vez. Primero se centrifuga la muestra de sangre en el tubo primario en dichas condiciones, luego se separa el plasma sobrenadante, sin remover ni arrastrar elementos de la interfase plasma/paquete celular, con pipeta de plástico nueva, a un contenedor limpio (idealmente un tubo seco, nuevo) y se centrifuga otra vez de la misma manera. El sobrenadante es PPP (< /ul). Debe separarse con pipeta plástica nueva, sin remover el pellet de plaquetas y fraccionarse en tubos tipo Eppendorf nuevos, los cuales son aptos para la pronta derivación, en un medio refrigerado. Si el paciente estuviera recibiendo anticoagulación oral, los niveles de Proteína C y S estarán iatrogénicamente disminuídos, como así también el de los factores II, VII, IX y X. Los mísmos se considera que recuperan los valores habituales en el paciente luego de 7 días de suspendida la medicación. Hemogramas - Hemostasia - 4

5 HOSPITAL PROVINCIAL NEUQUÉN 24/07/ En los casos en que se requiera estudiar a pacientes bajo tratamiento con heparina no fraccionada, o heparina de bajo peso molecular, considerar un período post suspensión, de al menos 12 hs. Siempre detallar en la orden de derivación el tipo de medicación que estuviera recibiendo el paciente. Adjuntar a la orden de derivación un resumen de historia clínica y antecedentes tanto personales como familiares por los cuales se solicita el estudio. Anticoagulante lúpico: Se requiere plasma citratado pobre en plaquetas (ver obtención de PPP). Enviar refrigerado con geles tipo ICEPACK, de manera tal que asegure la conservación de la muestra hasta su llegada a destino. Estas condiciones son indispensables para la obtención de resultados confiables. Coordinar el envío para acortar el máximo posible el tiempo de transporte de la muestra. Evitar los viernes, feriados y fines de semana. Homocisteína plasmática: (recordar consultar previamente por disponibilidad de reactivo) Se requieren 500 ul de plasma con EDTA, refrigerado. Es importante la pronta preparación de la muestra debido a inestabilidad del analito. Inmediatamente a la extracción colocar la muestra anticoagulada con EDTA en baño de agua/hielo hasta el momento de centrifugar. La muestra debe conservarse en frío en todo momento. Centrifugar antes de los 30 minutos a rpm, durante 10 minutos. Alternativamente se podrá usar suero, separado en las mismas condiciones de celeridad y conservación que mencionadas previamente. Separar el plasma/suero asépticamente en tubos tipo Eppendorf. Refrigerar inmediatamente y proceder a la derivación lo antes posible. Enviar refrigerado con geles congelados de manera tal que asegure la conservación de la muestra hasta su llegada a destino. Esta condición es indispensable para satisfacer los requerimientos de la metodología. Coordinar el envío para acortar el máximo posible el tiempo de transporte de la muestra. Evitar los viernes, feriados y fines de semana. CD4 y CD8, por citometría de flujo: Se requiere un tubo conteniendo un mínimo de 2ml de sangre entera anticoagulada con EDTA (si no fuera posible tal volumen, consultar previamente). Mantener todo el tiempo a temperatura ambiente. Se sugiere no refrigerar la muestra. La muestra debe llegar al laboratorio del HPN los días miércoles teniendo menos de 24 hs de extraída. Adjuntar, si se dispone, el dato de recuento de leucocitos totales y porcentaje de linfocitos. En cuánto al código que identifica al paciente y muestra se recuerda que se construye con los datos del sexo (M/F); las dos primeras letras del primer nombre de pila; las dos primeras letras del primer apellido, y la fecha de nacimiento. En caso de tratarse de una paciente embarazada, debe indicarse con la letra E al final. Por ejemplo, si una paciente se llamara María Laura Figueroa, se encontrara embarazada, y hubiera nacido el día primero de enero del año 1980; el código de identificación sería: F MAFI E. s: Jorge Montané: Jorge Ramirez: Juan Mora: jmontane@hospitalneuquen.org.ar corr2006@hotmail.com juandrex@yahoo.com.ar Hemogramas - Hemostasia - 5