Muestras válidas para el diagnóstico de una infección nosocomial. Laboratorio de Bacteriología Hospital Infantil de México Federico Gómez.

Transcripción

1 Muestras válidas para el diagnóstico de una infección nosocomial Laboratorio de Bacteriología Hospital Infantil de México Federico Gómez.

2 EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA EN EL CONTROL DE INFECCIONES IDENTIFICACION DE MICRORGANISMOS INFORME DE PATRONES DE SUSCEPTIBILIDAD A DISTINTOS ANTIMICROBIANOS. DESARROLLO Y APLICACIÓN DE METODOS PARA EL ESTABLECIMIENTO DE MICROORGANISMOS COMO RESPONSABLES DE BROTES EPIDEMICOS; CULTIVO DE PERSONAL, PACIENTES, INSTRUMENTAL O SUPERFICIES AMBIENTALES PARA ESTABLECER PATRONES DE COLONIZACION EN CASOS DE EPIDEMIAS; EDUCACION DEL PERSONAL DE SALUD.

3 PROCEDIMIENTO PREANALITICO INDICACION DEL EXAMEN PREPARACION DEL PACIENTE OBTENCION DE LA MUESTRA MANIPULACION DE LA MUESTRA CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA. Una muestra mal tomada da resultados inútiles que confunden al profesional que la solicita y pueden llegar a constituir un riesgo para el paciente.

4 Obtención de la muestra La muestra debe ser de material del sitio real de infección y tiene que ser tomada con el mínimo de contaminación de los tejidos adyacentes. Deben establecerse los momentos óptimos para la toma de la muestra. Cantidad suficiente. Envases y Medios de cultivo. Cultivos previos a la toma de antibióticos. Rotular el recipiente en forma adecuada.

5 Criterios para rechazo de muestras Muestras mal rotuladas Tiempo de transporte más prolongado Uso de recipientes no estériles Cantidad de muestra insuficiente.

6 Solicitud de exámen bacteriológico: Nombre del paciente. No. De Registro Sala o Servicio Edad Diagnóstico o indicación para el estudio Tipo de muestra Técnica de recolección Hora de la toma y Fecha.

7 TIPOS DE MUESTRAS SANGRE ORINA LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO LIQUIDO DE CAVIDADES SEROSAS: Líquido pleural, peritoneal, pericárdico y sinovial. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR: Secreción Faríngea, Nasal, Ocular, Otica, Senos paranasales. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR: Esputo, Aspirado endotraqueal. PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO: Heridas y úlceras, Abscesos. TRACTO GENITAL. Vaginal, Uretral. MATERIA FECAL.

8 Transporte de muestras Objetivo: Mantener la muestra tan próxima a su estado original como sea posible. o o o STUART AMIES CARY BLAIR

9 Condiciones de preservación para diferentes sistemas de transporte. Conservar a 4C A 25ºC Transporte anaeróbico Autopsias, lavado bronquial, catéter,lcr, biopsia pulmón, líquido pericardico, esputo, orina L.C.R. (bacterias), líquido sinovial. Líquido amniótico, abdominal, cultivo anaeróbico, aspirados, placenta, aspirado transtraqueal, orina (punción suprapúbica) Directa inoculación Transporte aeróbico Biopsias, Campylobacter, Shigella, Vibrio, Yersinia Manual of CLINICAL MICROBIOLOGY. 7th edition. American Society for Microbiology Cultivos de sangre, Neisseria gonorrhoeae Médula ósea, respiratorio superior, nasofaringe, conjuntiva. Bordetella, Neisseria, Salmonella.

10 Guía de recolección de muestras Tipo de muestra Recolección Tiempo de transporte Temperatura No. de muestras Comentarios Abscesos Solución salina estéril ó alcohol 70 % Absceso abierto <= 2 horas T. Ambiente < 24 horas 1 1 absceso 1 lesión Absceso cerrado Aspiración con jeringa Transporte anaeróbico. > 1 ml <= 2 horas. T. ambiente 1 Cultivos de sangre Alcohol isopropilico 70% Adultos: 10 a 20 ml. Niños: 1 a 10 ml < 2 horas a T. ambiente 3 en 24 horas Sepsis aguda: 2 a 3 (dentro de 10 min.) Endocarditis aguda: 3 de diferentes sitios ( 1 a 2 horas) Endocarditis subaguda: 3 de 3 sitios diferentes (> 15 min.) Catéter Alcohol 70 % 5 cm. Colocar en recipiente estéril < 15 min. < 24 h, 4ºC Cultivo semicuantitativo (método de Maki)

11 Neumonía asociada a ventilación Criterios diagnósticos I. Clínicos generales. II. Radiológicos III. Microbiológicos mecánica. Con broncoscopio 1. Lavado broncoalveolar 2. Con cepillo protegido No broncoscópicas 1. Aspirado traqueobronquial 1.Tinción de Gram 2.Cultivos cuantitativos Aspirado traqueobronquial. Cuenta bacteriana >10 5 UFC/mL Lavado broncoalveolar: cuenta bacteriana > 10 4 UFC/mL Cepillo protegido: Cuenta bacteriana > 10 3 UFC/mL

12 Neumonía NOM.045-SSA Esputo purulento ó drenaje purulento a través de cánula endotraqueal que al exámen seco débil muestra < 10 células epiteliales y más de 20 leucocitos por campo. Identificación de microorgnismo patógeno en hemocultivo, en secreción endotraqueal (cepillado transtraqueal ó biopsia ó en esputo

13 Neumonia asociada a ventilación mecánica Tratamiento antibiótico Β-lactamasas de espectro extendido. 1. E.coli 2. Klebsiella pneumoniae Microorganismos multidrogoresistentes 1. Pseudomonas aeruginosa 2. Acinetobacter baumannii

14 Sepsis abdominal e infección del sitio quirúrgico Sepsis abdominal Primaria Secundaria Terciaria Infección del sitio quirúrgico. Se inicia poterior a las 48 horas del procedimiento quirúrgico Infección superficial Infección profunda De órganos y espacios

15 Sepsis abdominal e infección del sitio quirúrgico: Diagnóstico: Infecciones superficiales y profundas. Infecciones de órgano o espacio y sepsis abdominal Exploración física Dolor Eritema Aumento de volúmen Secreción purulenta Evaluación clínica Estudios de imagen Ultrasonido Tomografía

16 BacT/ALERT

17 Sepsis abdominal e infección del sitio quirúrgico DIAGNOSTICO: Estudios microbiológicos 1. Tinción de Gram 2. Cultivos Hisopado de herida Aspiración de secreción Biopsia de tejidos

18 Sepsis abdominal e infección del sitio quirúrgico Colonización vs Infección Colonización: Presencia de microorganismos en un cultivo de secreción ó biopsia de tejido sin la presencia de datos clínicos de inflamación local ó sistémica. Aislamiento de un microrganismo obtenido de un drenaje ó sonda. Infección. Aislamiento microbiológico asociado con síntomas clínicos locales

19 Infecciones complicadas de vías urinarias Bacteriuria asintomática Infección de vías urinarias complicada. Infección de vias urinarias asociada a sonda permanente. Persistencia bacteriana. Infección de vías urinarias nosocomial en pacientes con catéter vesical durante la hospitalización. Reinfección. Recurrencia. Infección de vías urinarias no complicada Infección de vías urinarias aislada.

20 Infección de vías urinarias NOM.045-SSA Orina a) Chorro medio b) Cateterismo c) Punción suprapúbica - Mayor 50,000 UFC/mL - Más de 50,000 UFC/mL - Cualquier crecimiento Sonda de Foley 1. Urocultivos al momento de la colocación 2. Cada cinco días durante su permanencia 3. Al momento del retiro

21 EPIDEMIOLOGIA La IVU ocupa el 3er. Lugar entre las infecciones más frecuentes bacterianas en el niño. En su mayoría son causadas por bacterias. El grado de infección está determinado por el tamaño del inóculo, los factores de defensa del huésped y los factores de virulencia de la cepa infectante. A nivel nosocomial pueden llegar a ser graves (uso de sondas, microorganismos resistentes, métodos exploratorios invasivos, pacientes inmunocomprometidos).

22 Infección asociada a línea vascular, derivación ventriculoperitoneal y dialisis peritoneal Diferencia entre los tiempos de positividad de los hemocultivos: 2 horas. Más de un hemocultivo positivo obtenido de una vena periférica Manifestaciones clínicas (sistémicas). Se han descartado otras fuentes aparentes de infección. Presenta al menos un resultado positivo de cultivo de catéter semicuantitativo (mayor de 15 UFC en un segmento de catéter). Debe ser aislado el mismo organismo del segmento de catéter y del hemocultivo positivo.

23 Peritonitis asociada a catéter peritoneal Datos clínicos consistentes de peritonitis. Conteo de leucocitos en líquido de diálisis mayor a 100 leucocitos/ml, con más de 50% de polimorfonucleares en un líquido con estancia mínima de dos horas en cavidad. Cultivo positivo con un microorganismo del líquido de diálisis. En el caso de dos ó más microorganismos considerar peritonitis secundaria.

24 Infecciones asociadas a ventriculostomías Meningitis Ventriculitis Abscesos cerebrales Procedimientos invasivos Craneotomías Colocación de dispositivos intracraneales Medir la presión intracraneal Drenar el L.C.R.

25 Infecciones asociadas a ventriculostomía Meningitis ó ventriculitis 1. El paciente debe tener microorganismos cultivados a partir de LCR. 2. Al menos uno de los siguientes signos ó sintomas: 1. Fiebre > 38ºC, dolor de cabeza. 2. Rigidez de nuca 3. Signos meníngeos 4. Signos de nervios craneales 5. Irritabilidad.. 3. Y al menos uno de los siguientes: o o o Aumento de la cuenta de leucocitos, proteínas elevadas y/o disminución de la glucosa en LCR. Microorganismos identificados en la tinción de Gram Hemocultivos positivos National Healthcare Safety Network Centers for Disease Control and Prevention o Prueba de antígeno positiva de LCR, sangre u orina.

26 Tratamiento antimicrobiano Factores que influyen Desconocimiento de la prevalencia de resistencia de los microorganismos causales de ventriculitis Es necesario conocer el mapa microbiológico de las infecciones nosocomiales de cada hospital: Prevlencia de SAMR BGN productores de BLEE Carbapenemasas Microorganismos panresistentes. Administración de antimicrobianos antes de la toma adecuada de muestras de LCR para cultivo

27 Susceptibilidad a antimicrobianos en Líquido Cefalorraquídeo 2013 Antibiótico Staphylococcus aureus n=6 % S Bencilpenicilina 17 Ciprofloxacina 17 Clindamicina 17 Detección de cefoxitina 17 Eritromicina 17 Gentamicina 100 Levofloxacina 17 Linezolid 100 Moxifloxacina 67 Nitrofurantoína 100 Oxacilina 17 Quinupristina/Dalfopristina 100 Resistencia inducible a clindamicina 100 Rifampicina 100 Tetraciclina 100 Tigeciclina 100 Trimetoprim/sulfametoxazol 100 Vancomicina 100

28 Piperacilina/tazobactam Tobramicina TMP/SXT Susceptibilidad a antimicrobianos en Líquido Cefalorraquídeo 2013 Klebsiella Serratia Stenotrophomonas maltophilia Antibiótico pneumoniae marcescenss n=9 n=4 n=4 %S %S %S Amikacina Ampicilina 0 Ampicilina/Sulbactam 38 BLEE 38 Cefepima Cefoxitina Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacina Ertapenem Gentamicina Imipenem Levofloxacina Nitrofurantoína 0 0

29 PROCESO DE PREPARACIÓN

30 EVALUACION DE LOS METODOS DE SUSCEPTIBILIDAD UTILIZACION DE CEPAS ATCC AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION Escherichia coli ATCC Pseudomonas aeruginosa ATCC Escherichia coli ATCC Staphylococcus aureus ATCC Enterococcus faecalis ATCC Haemophilus influenzae ATCC 49247

31 RESISTENCIA BACTERIANA: ALGUNOS EJEMPLOS DEL IMPACTO CLINICO EN EL TRATAMIENTO DE INFECCIONES NOSOCOMIALES Staphylococcus resistente a meticilina Staphylococcus spp Enterococcus spp multirresistentes, incluyendo resistencia a vancomicina El terror de Staphylococcus aureus con disminución de la susceptibilidad a vancomicina Gram-negativos con resistencia a cefalosporinas de tercera generación y monobactámicos por producción de b-lactamasas de espectro extendido (BLEEs): Klebsiella spp, Enterobacter spp Serratia spp entre otros Resistencia de otros Gram negativos a b-lactámicos por la producción de b- lactamasas inducibles tipo AmpC Resistencia de Pseudomonas spp, Acinetobacter spp a Carbapenemes