TEMA 11 METODOLOGÍA PARA LA TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS

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1 TEMA 11 METODOLOGÍA PARA LA TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS

2 TOMA DE MUESTRA DE ANAEROBIOS Y TRANSPORTE AL LABORATORIO GENERALIDADES IMPORTANCIA DE LA MICROBIOTA ANEROBIA RECOLECCIÓN DE MUESTRAS PARA ANAEROBIOS TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS A LABORATORIO TRANSPORTE INMEDIATO SISTEMAS DE TRANSPORTE SISTEMA SCOTT DE DOBLE TUBO CULTURETTE SISTEMA PORT-A CULT INOCULACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA ANAEROBIOS CONDICIONES DE TRABAJO MEDIOS DE CULTIVO TUBOS ROTATORIOS INCUBACIÓN DE MUESTRAS ANAEROBIAS EN EL LABORATORIO ESTUFA ANAEROBIA JARRA PARA ANAEROBIOS SISTEMA GAS-PACK

3 MUESTRAS DE ANEROBIOS GENERALIDADES IMPORTANCIA DE LA MICROBIOTA ANAEROBIA EN LOS DIFERENTES ÓRGANOS RELACIÓN ANAEROBIOS:AEROBIOS BOCA 3-10:1 SURCOS GINGIVALES :1 ESTÓMAGO 1:1 INTESTINO DELGADO 1:1 INTESTINO GRUESO :1 VAGINA 5-10:1

4 ENFERMEDADES PRODUCIDAS POR ANAEROBIOS Abcesos en cualquier órgano Infección periodontal Otitis media Sinusitis Endocarditis, bacteriemia y septicemia Empiema torácico Apendicitis, peritonitis Endometritis y salpingitis, absceso ovárico Osteomielitis Artritis séptica Gangrena gaseosa Mionecrosis clostrídica Tétanos

5 TIPOS DE MUESTRAS QUE PUEDEN CONTENER BACTERIAS ANAEROBIAS ORINA PUNCIÓN SUPRAPÚBICA HECES SANGRE, LCR, otros líquidos orgánicos TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR ASPIRACIÓN TRASLARÍNGEA TORACOCENTESIS BRONCOSCOPIA OIDO TIMPANOCENTESIS CAVIDAD ORAL Y DIENTES APARATO GENITAL MASCULINO FEMENINO HISOPADO DE ENDOCÉRVIX BARTOLINITIS PUS, EXUDADOS Y QUEMADURAS MUESTRAS DE CIRUGÍA

6 Muestras no adecuadas para el cultivo de anaerobios Orina de chorro medio Esputo expectorado Heces (sólo para investigar Clostridium difficile), ni hisopados rectales Hisopado faríngeo y nasofaríngeo Hisopado de encías Hisopado vaginal Superficie de úlceras

7 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS PARA ANAEROBIOS CON AGUJA Y JERINGA MUESTRA DE ORINA POR PUNCIÓN SUPRAPÚBICA MUESTRA DE ORINA DE CATÉTER

8 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS CON AGUJA Y JERINGA Sangre LCR Otros líquidos orgánicos (sinovial, ascítico, etc.) Abcesos, flemones, focos piogénicos

9 TRANSPORTE AL LABORATORIO DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS RECOGIDAS CON AGUJA Y JERINGA

10 MUESTRAS DEL TRI ASPIRACIÓN TRANSLARÍNGEA CULTIVO DEL CATÉTER TORACOCENTESIS BROCOSCOPIA

11 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS CON HISOPO Y TRANSPORTE AL LABORATORIO Hisopado de endocérvix Hisopado de heridas, abscesos Transporte de hisopos al laboratorio Sistema Culturette Sistema Scott de doble tubo Sistema Port-a-Cult

12 RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS

13 EXAMEN MACROSCÓPICO DE LAS MUESTRAS Olor fétido Aspecto purulento Tejido necrótico Presencia de gas Gránulos de azufre

14 EXAMEN MICROSCÓPICO DE LAS MUESTRAS Tinción de gram: muchas infecciones anaerobias pueden ser polimicrobianas Tinción y observación de esporas (puede indicar Clostridium) Observación de ramificaciones en los extremos de las células o filamentos (puede indicar Actynomices) Observación células fusiformes (puede indicar Fusobacterium)

15 PRUEBAS PREVIAS AL CULTIVO Cromatografía de gases

16 MEDIOS DE CULTIVO PARA ANAEROBIOS Agar sangre para anaerobios con L-cistina, hemina y vitamina K Agar chocolate Agar sangre con alcohol fenil etílico (PEA)/Agar Columbia con colistina y ácido nalidíxico (CNA) Agar KVLB (kanamicina, vancomicina, sangre lacada) Caldo tioglicolato (enriquecido con L-cistina, hemina y vitamina K) Caldo de carne picada Medio no selectivo de uso general Utilizado principalmente para aislar especies de Neisseria y Haemophilus; sin embargo, se puede requerir también para el aislamiento de anaerobios exigentes Aislamiento de anaerobios obligados gram positivos Aislamiento selectivo de bacilos gram negativos anaerobios Caldos de enriquecimiento que se pueden usar como suplemento de medios sólidos particularmente si la muestra escasa (se pueden añadir unas gotas de parafina líquida para mantener mejor la atmósfera anaerobia). Subcultivar en medio para anaerobios

17 MEDIOS ANAEROBIOS PREINCUBADOS EN ANAEROBIOSIS

18 INCUBACIÓN DE BACTERIAS ANAEROBIAS ESTUFA PARA ANAEROBIOS

19 INCUBACIÓN DE BACTERIAS ANAEROBIAS JARRAS PARA ANAEROBIOS

20 INCUBACIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS SISTEMA GAS-PACK BO 3 H 3 / Al/ Pd H 2 H 2 + O 2 H 2 O H 2 O + NaHCO 3 CO 2 Catalizador en la tapa Debe aumentar la temperatura de la tapa Indicador de azul de metileno

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