XVII JORNADA DE FORMACIÓN INTERHOSPITALARIA DEL LABORATORIO CLÍNICO MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE LOS CÁLCULOS.
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1 XVII JORNADA DE FORMACIÓN INTERHOSPITALARIA DEL LABORATORIO CLÍNICO MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE LOS CÁLCULOS. C 20 de mayo de 2009 PABLO ARGÜELLES MENÉNDEZ NDEZ SERVICIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA HOSPITAL RAMÓN N Y CAJAL
2 Los diferentes métodos m de análisis se han aplicado como técnicas t rutinarias o bien se han usado para investigación n en el estudio del cálculo c como objeto único desde el punto de vista estructural, cristalográfico o químico. Sin embargo, este conocimiento no siempre se ha trasladado a los laboratorios generales de análisis, donde la metodología a analítica sigue siendo pobre.
3 Análisis químico cualitativo: Es una técnica t analítica clásica similar a una marcha analítica típica. t Está basada en la detección n mediante reactivos específicos de ciertos aniones, cationes o moléculas enteras, que normalmente son parte de la composición química de un cálculo c urinario. Suelen ser métodos colorimétricos y visuales.
4 Ventajas: Bajo coste del análisis. Rapidez. Desventajas: Exige la destrucción n del cálculo. c Falsos positivos y negativos. No detecta constituyentes metabólicos raros: xantina, hipoxantina,, leucina, medicamentos o sus metabolitos
5 No informa de fases cristalinas ni de la estructura del cálculo c (simple o mixto). No diferencia los oxalatos en mono y dihidratado. Es poco sensible para el ácido úrico, urato amónico o urato sódico. s Es poco útil para cuantificar los componentes. Necesita una muestra relativamente grande.
6 Microscopía óptica con luz polarizada: Es la indicada para el estudio del material cristalino, no siendo aplicable a cálculos c constituidos por compuestos amorfos. La disposición n estructural, los distintos componentes y su localización n en el núcleo n o la corteza del cálculo, c se determinan mediante cortes finos petrográficos.
7 Se visualiza un corte del cálculo c en un microscopio petrográfico y mediante luz polarizada, se distinguen las sustancias isótropas de las anisótropas. Gracias al uso de patrones, el conocimiento de los sistemas de cristalización, la isotropía a y la anisotropía a y el ángulo de extinción n de la sustancia, se puede identificar la muestra en el corte fino.
8 Difracción n de rayos X: La difracción n de un haz monocromático de rayos X al atravesar una estructura cristalina depende de la distribución n atómica (aniones y cationes), siendo el difractograma,, característico de cada especie cristalina y ello permite la diferenciación entre las distintas variedades de cálculos. c
9 Desventajas: Tecnología a cara. Precisa personal cualificado. Lentitud. No detecta el material amorfo. No distingue componentes minoritarios (<10%).
10 Termografía: a: Los cálculos, c al ser calentados, sufren modificaciones energéticas y pérdidas p de peso específicas para cada uno de sus posibles componentes, lo que permite su caracterización cualitativa y cuantitativa. Las diferentes fases de la descomposición térmica se producen a temperaturas determinadas, características de la estructura molecular y cristalina.
11 Los picos del diagrama termogravimétrico trico muestran las pérdidas p de peso específicas para cada uno de los componentes. Desventajas: Técnica lenta, laboriosa y costosa. Dificultad en el análisis de cálculos c mixtos.
12 Cromatografía: a: Técnica útil para la identificación n de determinados componentes orgánicos o drogas, que se encuentran como componentes minoritarios o no, en el seno de los cálculos c urinarios.
13 Lámina delgada: Técnica altamente fiable que aporta gran información n sobre la composición n y estructura del cálculo. c Sin embargo, la complejidad en la elaboración n de las láminas l hace que su uso sea muy restringido.
14 Espectroscopía de absorción n atómica: Técnica útil en la identificación n de elementos minoritarios. Se utiliza la cámara c de grafito y la emisión n de plasma. Un único ensayo permite determinar multitud de elementos: hierro, cobre, zinc, selenio, aluminio, cobalto,
15 Microscopía electrónica de barrido: Permite estudiar los distintos patrones de cristalización n para cada composición n en el ámbito de la investigación, n, pero no es una técnica de elección n en la rutina. Desventajas: Compleja y de elevado coste. Identifica el cristal exclusivamente sobre la base de la morfología.
16 Espectroscopía de infrarrojos: Es una técnica t analítica de determinación molecular basada en la absorción n de energía a por parte de determinadas enlaces produciendo una vibración. La espectroscopía IR por interferometría con transformación n de Fourier (FTIR) mejora la definición n de los espectros respecto a la técnica t clásica. Otra opción n es la espectroscopía RAMAN.
17 Ventajas: Sencillez operativa. Relativo bajo coste. Técnica de elección. Rapidez: 20 s. Sensibilidad: identifica hasta 7 compuestos diferentes mezclados en un mismo cálculo. c
18 Discrimina composiciones que se encuentran en forma minoritaria frente a otras que predominan en el cálculo. c No precisa una estructura cristalina bien definida, sino que analiza compuestos amorfos. Requiere poca muestra (<1mg). Permite tomar muestras de varias zonas (núcleo, capas, corteza).
19 Espectros infrarrojos Oxalato cálcico monohidratado
20 Oxalato cálcico dihidratado
21 Ácido úrico
22 Ácido úrico dihidratado
23 Urato sódico
24 Fosfocarbonato cálcico
25 Fosfato amónico magnésico
26 Brushita
27 Fosfato octocálcico
28 Urato amónico
29 Cistina
30 Materia orgánica
31 Sílice
12.9. Aplicaciones Bibliografía
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