- Mencionar las Normas de Bioseguridad y precauciones necesarias para trabajar en el laboratorio microbiológico.

Transcripción

1 Microbiología General e Inmunología Año 2012 Trabajo Práctico Nº1 Objetivos: Que el alumno sea capaz de: - Mencionar las Normas de Bioseguridad y precauciones necesarias para trabajar en el laboratorio microbiológico. - Colocar y retirar los elementos de protección personal respetando la cadena de asepsia. - Efectuar el lavado de manos en forma oportuna durante el trabajo de laboratorio microbiológico - Realizar las maniobras que permiten efectuar el trabajo de laboratorio microbiológico en forma aséptica - Reconocer y describir las características y utilidades de los materiales, instrumentos y equipos disponibles en el laboratorio microbiológico. - Definir medio de cultivo. - Reconocer los distintos medios de cultivo y comparar sus características fisicoquímicas. - Definir esterilidad de un medio de cultivo. - Efectuar la toma de muestras de la cavidad bucal por raspaje (dorso de lengua) y realizar preparados microbiológicos. - Realizar un preparado microbiológico en fresco a partir de una muestra de cavidad bucal. - Describir lo observado en un preparado en fresco enfocado en un microscopio óptico compuesto. - Realizar una impronta con material biológico obtenido de cavidad bucal. - Definir fijación de un preparado microbiológico. - Describir los métodos de fijación químico y físico (Método de Köch). 1

2 - Efectuar la fijación de preparados microbiológicos por método químico y físico. - Definir siembra de una muestra y su finalidad. - Efectuar la toma de muestras de la cavidad bucal (dorso de lengua) por raspaje y sembrarlas en caldo y en agar. - Mencionar las condiciones que debe reunir la incubación de un medio de cultivo sembrado para obtener el desarrollo microbiano. - Segregar y descartar en forma adecuada los residuos generados durante el trabajo en el laboratorio microbiológico Tareas a realizar: - Observación de los materiales, instrumentos y equipos utilizados en el laboratorio microbiológico. - Observación de tubos y placas de Petri conteniendo medios de cultivo estériles. - Realizar la toma de material del dorso de lengua mediante raspaje con bajalenguas. Con la muestra obtenida realizar un preparado en fresco y una impronta. Al realizar el preparado en fresco, colocar una gota de revelador doble tono sobre el portaobjetos previo a colocar el material tomado. Colocar un cubreobjetos y observar en el microscopio óptico compuesto con objetivo de inmersión. Esquematizar. Observación en fresco

3 - Luego de la impronta, fijar uno de los portaobjetos con muestra por método químico (Alcohol metílico) y el otro por método físico (Método de Köch). Rotular ambos preparados y guardarlos. - Descartar el bajalenguas usado en bolsa roja y los envoltorios, en bolsa negra. - Tomar una muestra del dorso de lengua con un hisopo estéril y sembrarla en una placa de agar estéril. Colocar el hisopo en un tubo conteniendo caldo estéril. - Como controles se utilizarán una placa de agar sin sembrar y un tubo con caldo sin sembrar conteniendo un hisopo estéril. - Incubar el conjunto de placas y tubos en microaerofilia en la estufa de cultivo a 37º C durante 24 hs (ver figura). 3

4 Cuestionario: 1. Ordenar la secuencia correcta de colocación de los elementos de protección personal antes de comenzar a trabajar con materiales biológicos en el laboratorio microbiológico:... Colocación de cofia... Colocación de guantes... 1er Lavado de manos... Colocación de barbijo... 2do Lavado de manos 2. Qué características macroscópicas presenta un medio de cultivo estéril? 3. Al colocar el hisopo dentro del tubo con caldo qué maniobras de bioseguridad realizó? 4. Qué parámetros de tiempo, temperatura y atmosféricos tuvo en cuenta para incubar los medios de cultivo sembrados con la muestra proveniente del dorso de lengua? 5. Por qué se incuban una placa de agar estéril sin sembrar y un tubo con caldo sin sembrar conteniendo un hisopo estéril con el conjunto sembrado? 6. Qué permite observar un preparado en fresco? 7. Qué ventaja presenta realizar una impronta? 8. Por qué efectuó la fijación de los preparados obtenidos por impronta previo a guardarlos en la caja? 9. Dónde descartó los elementos de protección personal usados? Por qué? 10. Por qué descartó en bolsa roja el bajalenguas usado y en bolsa negra los envoltorios? 4

5 Para el próximo T. P.: - Traer una lupa (uso personal). - Estudiar: Normas de trabajo del laboratorio microbiológico práctica. Guía de Trabajos Prácticos: Primera Parte pág Ed. Médica Panamericana. Edición Medios de cultivo, siembra, aislamiento y trasplante. práctica. Guía de Trabajos Prácticos: Cuarta Parte. pág Ed. Médica Panamericana. Edición Métodos de observación de los microorganismos. práctica. Guía de Trabajos Prácticos: Tercera Parte. pág Ed. Médica Panamericana. Edición