Ras. BRaf. Pak PTEN. H-Ras NF1. K-Ras GAP. H-Ras. Breast - <5% - Lung Small cell Non-small - 30%(adeno) <5% Head & kneck Squamous 35% - -
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- Eugenia Valverde Olivera
- hace 8 años
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1 Breast - <5% - -Mutaciones 35% -Amplificaciones -LOH Lung Small cell Non-small - 30%(adeno) <5% Head & kneck Squamous 35% - - -Mutaciones -Amplificaciones -Mutaciones -Deleciones -Mutaciones 2% -Amplificaciones Skin Melanoma - - <20% Non-Melanoma 30-50% <5% - Digestive track Esophagus Stomach - <50% <5% Pancreas - 90% - Cholangio & gall bladder - 90% - C olorectal - 40% 10% Urogenital Kidney <10% - - Urothelial <10% <10% - Prostate <5% - - Ovarian - rare - Endometrial - 40% - cervical 20-30% - - Endocrine Thyroid 90% 90% 90% Pheocromo Medullary Lymphomas Hodgkins Non-Hodgkins Myeloma % Leukemias Acute myeloid % Acute lymphoid % Chronic myeloid - - rare Chronic lymphoid % C MML - 65% MDS % Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K -Mutaciones -Amplificaciones 7% Rac -Mutaciones -Deleciones Mst 1 Ral MEK PKC -Mutaciones Rab5 -Amplificaciones Akt -Mutaciones 10% PDK-Deleciones -Mutaciones -Mutaciones -Deslocalización RalBP C hildhood T. Neuroblastoma NEUROIBROMATOSIS - 1: Enfermedad de Von Recklinghausen: - 1/4000 nacimientos. - Manchas cutaneas color café. - Tumores benignos, neurofibromas, gliomas ópticos, en nervios periféricos. - Alta incidencia de tumores. - Deleción o mutaciones inactivadoras de la actividad. H- SÍNDROME DE COSTELLO - < 100 casos. - Retraso mental, macrocefalia. - Tumores benignos. - Alta incidencia de tumores: rhabdomyosarcomas, cáncer de vegiga - Mutaciones de H- (G12, 13 D,S,A,V) en línea germinal. K- SÍNDROME DE NOONAN - 1/2500 casos. - Malformaciones, enfermedad cardiaca, retraso mental. - Tumores benignos. - Alta incidencia de tumores; páncreas. - Mutaciones de K- (G12, 13 D,S,V,Q) en línea germinal. Port Wine Stain : Síndrome de Sturge-Weber-Klippel?: - 1/300 nacimientos. - Malformaciones capilates - Manchas cutaneas color pardo. - Tumores benignos, angiomas. - Alta incidencia de tumores. - Deleción o mutaciones inactivadoras de la actividad. H- SÍNDROME CUTANEO-CRANEOACIAL - < 100 casos. - Retraso mental, cardiopatías, baja estatura. - Tumores benignos. - Alta incidencia de tumores: -Mutaciones de H- (G12, 13 D,S,A,V) en línea germinal. -Mutaciones en B-Raf 50%, MEK 30% 1
2 Son las señales trasformantes de iguales en todos los tipos de tumores? Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K Rac Mst 1 Ral MEK PKC Rab5 Akt PDK Es suficiente el bloqueo de una determinada ruta para parar la progresión tumoral? Puede el bloqueo de una determinada ruta ser tan extremadamente tóxico t que nos impida utilizarla como diana terapeútica? RalBP Son las señales trasformantes de iguales en todos los tipos de tumores? Raf RalGDS PI3K H- Piel (ind) Effector mutations: K35 G37 C40 Melanoma Mamario Raf RalGDS PI3K HUMAN MAM. EPITHELIAL CELL HUMAN IBROBLASTS Páncreas Ovario Glioma Pulmón AML HUMAN MESENCHIMAL 2
3 Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K Rac Mst 1 Ral MEK PKC Rab5 Akt PDK Mutations in codons 12, 13 or 61 E E C T O R S RalBP Mutations in codons 12, 13 or 61 E E C T O R S
4 Processing and trafficking of proteins Endoplásmic reticulum INHIBIDORES DE ARNESIL TRANSERASAS CaaX C-COO - C-COO-CH 3 C C-COO-CH 3 CaaX Proteolysis arnesylation Methylation K-4B Palmitoylation (H-, N-) Golgi apparatus Cytoplasm CH 3 -OOC-C KKKK CH 3 -OOC-C C Plasma membrane TIs - Evitan la ubicación en la membrana de H-, no así de K- o N-, K- y N- pueden sufrir prenilaciones alternativas (geranil-geranilación). - En ratones t -/-, se localizan en membranas. - Efectos secundarios severos. Evitan farnesilación de otras proteínas. - Efectos antiproliferativos en muchas líneas tumorales de diversos orígenes y en xenotransplantes en ratones. - Efectos independientes del status de (expresión, mutaciones). - Rho G???. Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K Rac Mst 1 Ral MEK PKC Rab5 Akt PDK - Resultados pobres como monoterapia en estudios preclínicos. - Potencian los efectos proapoptóticos de algunos antitumorales; STI571 (CML), taxanos (tumores mamarios). RalBP 4
5 Estructura tridimensional de p38 Src tyrosine kinase 5
6 - MEK: activado en un 3% de los tumores humanos. - Sobreexpresión frecuente. Raf MEK - B-Raf: activado en un 7% de los tumores humanos. - 70% melanomas. - Mutaciones no coincidentes con mutaciones en. -Sobreexpresión frecuente - : deslocalizada (nucleo). tumores renales. INHIBITING Rafs In vitro effects of BAY Mutational status Average % grow th Inhib. in soft agar Conc required to Inhib. perk (µm ) BXPC3 pancreatic ca. wt BAY (Sorafenib( Sorafenib) - Inhibe C-Raf (IC 50 = 6nm/L); B-Raf wt (IC 50 = 22nm/L); V599E (IC 50 = 38nm/L).. - Se une al centro activo de la kinasa, próximo al sitio de unión de ATP. Inhibidor no competitivo, afecta a la conformación de Phe594 dentro del motivo DG. - A altas concentraciones (>IC 50 = 50nm/L) inhibe también VEGr-2, VEGr-3, PDGr-β, c-kit, Gr. Mia Paca2 pancreatic ca. HCT 116 colon ca. A 598 lung ca. NCI H460 lung ca. K-12C K-13D K-12S 45 >15 K-61H 27 >15 6
7 BAY in clinical trials PD98059 O O NH2 OCH3 c - Raf MEK 1/2 ERK 1/2 control + PD PD98059 K- trasformed BALB-3T3 / NRK cells colon 26 colon ca. HT 26 BX-PC3 A431 ZR 75 colon ca. pancreatic ca. cervical ca. breast ca. SKOV-3 ovarian ca. p388 lymph leuk. PD HO P-ERK levels H N O H N Cl in vitro P D grow th inhib. I tumors in mice oral PD grow th inhib CI Primer inhibidor de MEK que entró en evaluación clínica. - Inhibe MEK1 (IC 50 = 15 nm/l); MEK2 (IC 50 = 22nm/L) - Se une al surco hidrofóbico de MEK, próximo al sitio de unión de ATP. - Inhibidor no competitivo, bloquea el bucle de activación de manera que no puede unirse a. - En ensayos fase I, mostró: -Reducciones >50% en fosforilación de en la masa tumoral. -Estabilización de la enfermedad en el 30% de los casos. -En ensayos fase II: -No se encontraron respuestas objetivas en distintos tipos de tumores. -Apenas un 12% mostró estabilización duradera. - armacocinética pobre. Baja exposición sistémica. 7
8 PD ARRY Mejor farmacocinética. - Inhibe MEK 1 y 2 (IC 50 = 1 nm/l). - Reducción prolongada de la fosforilación de en ensayos in vitro - Inhibe el crecimiento tumoral en 6/7 modelos de xenotransplantes. - Actualmente en ensayos Tipo I. - Mejor farmacocinética. - Inhibe MEK 1 y 2 (IC 50 = 0.7 nm/l). - Induce bloqueo en G1-S y apoptosis generalizada. - Alta eficiencia sobre líneas celulares con mutaciones en K- y B-Raf. - Inhibe el crecimiento tumoral en 8 modelos de xenotransplantes (HT 29, HCT116, MDA MV, Lovo, CaLu6, LOX, Colon 26 y BXPC3) a concentraciones por debajo de 1 mg/kg. - Actualmente en ensayos Tipo I. -TIs -Gapettes -Sorafenib Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K Rac Mst 1 Ral MEK PKC Rab5 Akt - PD PDK -ARRY PI3K, p110α: activada por mutación, amplificación o sobreexpresión. - p85: activada por mutación. - : pérdida de función por deleción, mutación o atenuación transcripcional. - Akt: activada por amplificación, sobreexpresión o hiperfosforilación. PI3K Akt PDK RalBP 8
9 Primary tumor Clinically evident metastasis Onix Schering-Plough MPI Onix Pfizer Merck Astra-Zeneca Bayer PharmaMar PD SKB Lilly Pfizer Merck Astra-Zeneca Kobe Tiam1 sf RalGDS Raf PLCε Rin PI3K Primary tumor Angiogenesis Survival in growth Invasion circulation Intravasation Arrest in new organ Extravasation Local migration Initiation of growth Sustained growth Rac Mst 1 Ral MEK PKC Rab5 Akt PD Bayer PDK Astra-Zeneca Astra-Zeneca SKB PD RalBP 9
10 La proliferación celular puede ser muy rápida pero controlada Cervus elaphus ebrero Abril Julio Noviembre 10
Ras family G proteins
Ras family G proteins RAS RHO Rap2A Rap2B Rap1A Rap2B TC 21 R-Ras N-Ras K-Ras RhoA H-Ras RhoC RalA RalB Ras-Apl DRas3 DRas2 DRas1 RhoB Rho-Ap Rac3 Rsr1 Ras2 Ras1 Rac2 Rnd2 C dc42 Rac1 Rnd1 RhoG TC 10 RHO1
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