CONTRIBUCIÓN A LA CITOGENÉTICA DE Sonchus oleraceus L.
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- Rodrigo Sevilla Pinto
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1 CONTRIBUCIÓN A LA CITOGENÉTICA DE Sonchus oleraceus L. Nasif, Alicia M.; Martínez Pulido, Laura; Andrada, Alberto B.; Pastoriza, Adriana. Catedra de Genética. Fac. de Agronomía y Zootecnia. UNT. alicia@manant.unt.edu.ar RESUMEN El género Sonchus L., familia Asteraceas, ampliamente difundido, es originario del Viejo Mundo. Entre las especies más frecuentes naturalizadas en Argentina está Sonchus oleraceus L., maleza anual o bianual, que infesta huertas, jardines, potreros y bordes de caminos. El objetivo de este trabajo es estudiar las características citogenéticas de esta especie para contribuir al conocimiento de su biología. El material provino de Finca El Manantial (Tucumán, Argentina). Para estudiar los cromosomas mitóticos se emplearon meristemas radicales pretratados en solución saturada de Paclosol; se fijaron en 3:1 y colorearon con hematoxilina al 2%. Las preparaciones microscópicas de meiosis se realizaron coloreando las anteras con hematoxilina al 2%. Para el análisis de viabilidad de granos de polen se coloreó con azul de algodón en lactofenol. Se determinó un número cromosómico de 2n=32, lo cual indicaría que es una especie tetraploide de acuerdo al número básico del género x=8. El tamaño de los cromosomas oscila entre 1,2 y 2,2. La meiosis resultó normal en todos los estadíos. El análisis de viabilidad de polen presentó un 88% de normales. Sonchus oleraceus L. posee variabilidad genética y gran fertilidad lo que explica la amplia difusión en la región. Palabras Clave: Maleza, Cromosomas, Mitosis, Meiosis, Difusión. SUMMARY Sonchus L. genus of Asteraceas family amply spread, is originated from the Old World. Among the most frequent. species naturalized in Argentina is Sonchus oleraceus L., annual or biannual weed which infests orchards, gardens, pasture grounds and road borders. The objective of this work is to study the cytogenetic characteristics of this species for contributing to the knowledge of its biology. The material came from Finca El Manantial (Tucumán, Argentina). To study the mitotic chromosomes, tip roots were pretreated in Paclosol, fixed in 3:1and colored with 2% hematoxylin. To study meiotic chromosomes, antheras were colored with 2% hematoxylin. For the analysis of pollen grain viability it was colored with cotton blue in lactophenol. It was determined a chromosomal number of 2n =32, which indicate it is a tetraploid species according to the genus basic number x =8. The size of the chromosomes oscillates between 1,2 and 2,2. The meiosis was normal in all stages. The analysis of pollen viability presented a 88% of normal ones. Sonchus oleraceus L. has genetic variability and great fertility which explains the ample diffusion in the region. Key words: Weed. Chromosome. Mitosis. Meiosis. Diffusion.
2 INTRODUCCIÓN El genero Sonchus L. perteneciente a la familia de las Asteraceas (Compuestas) es de amplia difusión mundial y si bien se menciona que su origen es del sur de Europa y norte de África, actualmente está presente en casi todo el mundo. De las varias especies naturalizadas en la Argentina, Sonchus oleraceus L. es una de las más frecuentes (Parodi, 1964). Considerada maleza, se conoce con el nombre común de Cerraja o de Achicoria Brava. Comúnmente se encuentra distribuida tanto en grandes áreas de nuestro país como en las de países limítrofes, de donde se tiene información de su asidua presencia. Su importancia económica se asocia a las pérdidas que ocasiona, por ser altamente invasora en huertas, jardines, alfalfares, potreros, bordes de caminos, parques y tierras laboreadas. Suele menospreciarse e ignorar sus cualidades, sin embargo la bibliografía la nombra desde la época del historiador Plinio, quien menciona que los romanos la recomendaban por sus propiedades nutricionales y curativas, consumiéndolas al estado fresco como ensalada. Actualmente, numerosos países de África utilizan sus hojas y raíces para la alimentación humana. Se conoce que sus hojas son ricas en vitamina C y sales minerales (Kissmann, 1992). Se trata de una planta herbácea, erecta, anual o bianual, dependiendo de las condiciones ambientales. Presenta tallos algo carnosos, con savia lechosa, inflorescencia en capítulos, con flores hermafroditas, de un característico color amarillo intenso. Se multiplica por medio de semillas (aquenios) de alto poder germinativo. Desde el punto de vista citogenético, la bibliografía cita para Sonchus L. un número básico de x = 7, x = 8 y x = 9 (Darlington and Wylie, 1955). Mientras que otros autores (Kissmann et al. 1992) mencionan que existen especies con números cromosómicos 2n =16, 2n = 18, 2n = 32 y 2n =48. Siendo escasa la información acerca de la genética de esta especie, el objetivo de este trabajo es realizar estudios citogenéticos para contribuir al conocimiento de su biología. El reconocimiento de las características citogenéticas permitirá explicar su comportamiento como maleza en el futuro. El estudio realizado comprendió el análisis de sus cromosomas mitóticos y la valoración de la fertilidad a través del comportamiento de sus cromosomas durante la meiosis y de la viabilidad del grano de polen. MATERIALES Y MÉTODOS El material objeto de estudio fue recolectado de Finca El Manantial de la Facultad de Agronomía y Zootecnia (UNT). Las plantas se colocaron en macetas en invernáculo. El análisis de los cromosomas se realizó a partir de células en división. La metodología empleada para la obtención de las preparaciones microscópicas de mitosis consistió en cortar los meristemas radicales de las plantas, los que se pretrataron en una solución saturada de p-diclorobenceno (Paclosol) durante 2 horas 20 minutos y se fijaron en una mezcla de 3:1 (alcohol etílico absoluto- ácido acético glacial). Previa hidrólisis en HCl 1 N a ºC, se aplastaron entre porta y cubreobjetos sobre una gota de hematoxilina al 2% como colorante y citrato férrico al 1% como mordiente (Andrada et al., 1975 y Boggiatto et al., 1979).
3 Para el estudio de los cromosomas meióticos se fijaron flores jóvenes en solución de Newcomer. Los preparados microscópicos se hicieron aplastando las anteras mediante la misma técnica de coloración descripta para mitosis. Se observaron las distintas fases de la meiosis en las células madre del grano de polen (CMP). Para los análisis correspondientes a los distintos estadios observados de mitosis y meiosis se obtuvieron microfotografías de los mismos. En la determinación de viabilidad del grano de polen se empleó la técnica de coloración con azul de algodón en lactofenol como colorante (D' Ambrogio de Argüeso, 1986). Se analizaron las preparaciones al microscopio y se contaron en cada campo de observación los granos turgentes y coloreados de azul (granos normales) y los granos sin colorear y/o deformes (granos anormales). RESULTADOS Y DISCUSION Cromosomas en Sonchus oleraceus L.
4 Fig. 1: Metafase mitótica, 2n = 32 (Aprox x) Fig. 2: Cromosomas meióticos. a) Metafase I (Aprox x); b) Telofase I (Aprox x); c)telofase II (Aprox x). Microfotografías obtenidas por los autores. A partir de los análisis cromosómicos de la mitosis, se determinó que Sonchus oleraceus L. posee un número cromosómico de 2n =32 (Figura 1), concordando con uno de los mencionados por Kissmann (1992). Los cromosomas son pequeños, oscilando su tamaño aproximadamente entre 1,2 y 2,2. Dado el número citado para el género de x= 8, se trata de una especie tetraploide. La meiosis (Figura 2) se mostró normal en todos los estadios como se puede observar en Metafase I (Fig. 2a), Telofase I (Fig.2b) y Telofase II (Fig. 2c). En las restantes etapas de la meiosis también se observó regularidad lo que estaría indicando la formación de gametas fértiles. Los resultados del análisis de viabilidad de granos de polen presentaron un 88 % de granos normales lo que corrobora la regularidad observada de la meiosis. CONCLUSIONES Las especies superiores recurren a la reproducción, una forma de multiplicación, en la que participan gametas masculinas que se unen a las femeninas. Para que esto ocurra, la meiosis de los individuos debe ser normal, que de no suceder la consecuencia es la tendencia a la infertilidad. En Sonchus oleraceus el comportamiento de sus cromosomas en la meiosis es regular, lo que permite establecer que su meiosis es normal. Esto explica su gran fertilidad corroborada con el alto porcentaje de viabilidad de su polen. Estudios posteriores de asociaciones de cromosomas en la meiosis indicarán si posee variabilidad genética (autógama o alógama) y sus posibilidades de difusión en la región. BIBLIOGRAFÍA Andrada, A. B.; Boggiatto, A. J.; Auad, L. G. Y Collado, M. L Estudios citogenéticos en el híbrido intergenérico Euchlaena perennis Hitch por Zea mays L. I. Análisis meióticos en plantas de dos generaciones. Rvta. Agron. N.O. Argent., XII (3-4): Boggiatto, A. J.; Andrada, A. B. Y P. de Zamudio, A. M Euchlaena perennis Hitch por Zea mays L. Interpretación citogenética de su fertilidad. Rvta. Agron. N.O. Argent., XVI (1-4): D' Ambrogio de Argüeso, Ana Manual de Técnicas en Histología Vegetal. Cátedra de Botánica Agrícola. Facultad de Agronomía. U.B.A. 1º Edición. Hemisferio Sur. Pág Darlington, C. D. and Wylie, A. P Chromosome Atlas of flowering plants. George Allen & Unwin Ltd., London. Pág
5 Kissmann, K. G Plantas Infestantes e Nocivas. Tomo II. Ed. BASF Brasileira S.A. Brasil. Pág Parodi, L.R Enciclopedia Argentina de Agricultura y Jardinería. Vol II. Ed. ACME SACI. Buenos Aires. Argentina. Pág. 312.
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