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1 Dosaje de Testosterona: Controversias en la correlación clínico- bioquímica. Residencia de Bioquímica y Microbiología Hospital General de Agudos Dr. Teodoro Alvarez Bioq. Marina Terzano Bioq. Verónica Goris Bioq. Luciana Ruiz

2 TESTOSTERONA Hormona esteroide (andrógeno) C19 con un PM de daltons. 17 β-hidroxi-4- androsteno-3-ona.

3 FUNCIONES BIOLOGICAS DE LA TESTOSTERONA: Mantener la espermatogenésis en los túbulos seminíferos. Mantener la función de las glándulas accesorias del aparato reproductor masculino: las vesículas seminales, la próstata y las glándulas bulbouretrales.

4 FUNCIONES BIOLOGICAS DE LA TESTOSTERONA: Desarrollo y mantenimiento de los rasgos sexuales secundarios masculinos: distribución del vello púbico, el crecimiento de la barba, la voz de tono grave y la arquitectura del cuerpo. Como otros andrógenos posee efectos anabólicos.

5 ORIGEN DE LA TESTOSTERONA En el hombre: * secreción testicular ( 95%) a partir de colesterol, por acción de LH sobre células de Leydig. * conversión periférica a partir del 4 androsteno-3,17- diona (ASD). En la mujer: * metabolismo del ASD (>50%). * secreción por parte de ovarios y glándulas suprarrenales.

6 METABOLISMO Colesterol desmolasa 17 α-hidroxilasa 17,20-liasa 3β-hidroxiesteroide dehidrogenasa 3β-hidroxiesteroide dehidrogenasa 17β-hidroxiesteroide dehidrogenasa Aromatasa 5α-reductasa Tejidos Blanco Androsterona Epiandrosterona Etiocolanolona Tejido hepático

7 TESTOSTERONA EN CIRCULACION Libre 2% SHBG 44% Albúmina 50% CBG 4% T LIBRE + T UNIDA A ALBUMINA= T BIODISPONIBLE

8 NIVELES DE To DISMINUIDOS EN HOMBRES *HIPOGONADISMO: -Hipogonadismo primario: disgenesia testicular, Síndrome de Klinefelter. -Por deficiencias de Gonadotrofinas: hipogonadismo hipogonadotrófico idiopático, Síndrome de Kallman, hipopituitarismo. *Por hiperprolactinemia, algunas enf. hepáticas y renales etc.

9 NIVELES DE To AUMENTADOS EN HOMBRES * dependientes de gonadotrofinas: tumores de SNC, pubertad precóz idiopática o verdadera. * independientes de gonadotrofinas: testotoxicosis, hiperplasia adrenal o tumor adrenal. Los niveles de To también estan elevados cuando hay defectos en receptores androgénicos.

10 HIPERANDROGENISMO EN MUJERES Síndrome de ovario poliquístico, hiperplasia adrenal, tumores adrenales, disgenesia genital mixta, ovario secretante de andrógenos. Las manifestaciones clínicas de exceso de testosterona son: Infertilidad, hirsutismo, amenorrea, obesidad.

11 UTILIDAD CLINICA DEL DOSAJE DE TESTOSTERONA En hombres: Confirmación del Dx de hipogonadismo (junto con LH) Diagnóstico diferencial en caso de genitales ambiguos Detección de tejido testicular funcionante Evaluación de retraso puberal Monitoreo terapéutico Detección de hiperandrogenismo -Cáncer de próstata tratado con análogos de hna liberadora de gonadotrofinas -Terapia antiandrogénica - Ajuste de dosis androgénica

12 UTILIDAD CLINICA DEL DOSAJE DE TESTOSTERONA En Mujeres : Evaluación de hiperandrogenismo Monitoreo terapéutico - para definir la dosis mínima requerida para disminuir la secreción de andrógenos en mujeres con hiperandrogenismo.

13 UTILIDAD CLINICA DEL DOSAJE DE TESTOSTERONA También contribuye al seguimiento de pacientes con hiperplasia adrenal congénita por déficit de 21 hidroxilasa.

14 TIPO DE MUESTRA: La extracción debe realizarse por la mañana. (en los hombres la To tiene ritmo circadiano) En mujeres la extracción se realiza en FFT del ciclo. La muestra de elección es suero.

15 DETERMINACIONES: Testosterona total Testosterona libre Testosterona biodisponible

16 INTERACCIONES Estrógenos Hnas. tiroideas Niveles de SHBG Andrógenos Insulina Hna. de crecimiento Glucocorticoides Niveles de SHBG

17 Tanto la To libre como la biodisponible reflejan mejor la situación clínica del paciente. Gruschke. Validity of free testosterone determination. Fertil Steril 2001

18 METODOLOGIA DOSAJE DE To BIODISPONIBLE: -Precipitación con sulfato de amonio al 50% de saturación. -Métodos matemáticos basados en la ley de acción de masas.

19 PRECIPITACION CON SULFATO DE AMONIO AL 50% To SO 4 (NH 4 ) 2 To libre To-Alb Suero del paciente 37 C %To bio: To sn x 100 To T 4 C, 30 min To-SHBG

20 Por cálculo: Se aplica la siguiente fórmula: ToBio ( nmol/l) = ToL + ( ToL.Ka.[Alb.]) Donde Ka.[Alb.] = 22

21 DOSAJE DE To LIBRE: METODOLOGIA -Diálisis de equilibrio (método de referencia). - Ultrafiltración. - Filtración por gel. - Medición directa por radioinmunoensayo del trazador análogo. - Por cálculo matemático.

22 DIALISIS DE EQUILIBRIO Se dializa el suero con el agregado de testosterona tritiada frente a un buffer de sales de fosfato mediante una membrana celular hs. a 37 C. En el equilibrio: %T libre= [H 3 T] del dializado x 100 [H 3 T] del suero

23 Marca Comercial Principio del Radioinmun oensayo Fase sólida Detección de la testoterona marcada Limite de detec ción (pg/ml) CV Intra ensayo (%) CV Entre Ensayo (%) Active Free To Coated-Tube (DSL

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