ABX Pentra Urea CP. Versión de la aplicación. Interés clínico (1, 2) Método (3) Uso previsto. Reactivos. Química clínica
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- Silvia Martin Rubio
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1 2015/12/04 A93A00292NES A11A ml 15 ml 400 Reactivo de diagnóstico para la determinación cuantitativa in vitro de urea / nitrógeno ureico en sangre en suero, plasma y orina mediante colorimetría. Versión de la aplicación Suero, plasma: En todo el mundo excepto en los EE.UU.: Urea: Urea4.xx NUS: BUN3.xx Sólo para los EE.UU.: Urea: Urea2.xx NUS: BUN2.xx Orina: En todo el mundo excepto en los EE.UU.: Urea: Urea-U5.xx NUS: BUN-U2.xx Sólo para los EE.UU.: Urea: Urea-U2.xx NUS: BUN-U2.xx Interés clínico (1, 2) La urea es el producto final del catabolismo de las proteínas que contiene nitrógeno. Los estados asociados a niveles altos de urea en la sangre se conocen como hiperuremia o azoemia. Se realizan determinaciones cuantitativas paralelas de la urea y la creatinina para diferenciar la azoemia prerrenal de la azoemia posrenal. La azoemia prerrenal, causada por ejemplo por la deshidratación, el aumento del catabolismo de las proteínas, el tratamiento con cortisol o la disminución de la perfusión renal, conduce a niveles de urea altos, mientras que los valores de creatinina permanecen dentro del rango de referencia. En los casos de azoemias posrenales, provocados por la obstrucción del tracto urinario, los niveles de ambas sustancias aumentan, pero el de creatinina en menor grado. En las enfermedades renales, la concentración de urea es elevada cuando la tasa de filtración glomerular se reduce de forma significativa y cuando la toma de proteínas es superior a 200 g/día. Método (3) QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Uso previsto es un reactivo de diagnóstico para la determinación cuantitativa in vitro de la urea/nitrógeno ureico (un producto final del metabolismo del nitrógeno) en suero, plasma y orina de origen humano que se basa en un test ultravioleta enzimático que utiliza ureasa y glutamato dehidrogenasa. Las mediciones obtenidas por este dispositivo se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de determinadas enfermedades renales y metabólicas. «Ureasa - GLDH»: test UV enzimático. Ureasa Urea + 2H 2 O > 2NH HCO - 3 GLDH 2-oxoglutarato + NH NADH > L-glutamato + NAD + + H 2 O (GLDH = Glutamato deshidrogenasa) Reactivos se presenta listo para su uso. 1 / 7
2 Reactivo 1: TRIS ph 7,8 2-oxoglutarato ADP Ureasa GLDH (Glutamato deshidrogenasa) Azida sódica 150 mmol/l 9 mmol/l 0,75 mmol/l 7 ku/l 1 ku/l < 1 g/l los límites de confianza definidos. Cada laboratorio establecerá el procedimiento que deberá seguirse cuando los resultados se encuentren fuera de dichos límites de confianza. Materiales necesarios, pero no suministrados Reactivo 2: NADH Azida sódica 1,3 mmol/l < 1 g/l debe utilizarse siguiendo esta información. El fabricante no puede garantizar su funcionamiento si se utiliza de otro modo. Analizador automático de química clínica: 400 Calibrador: Multical, ref. A11A01652 Controles: N Control, ref. A11A01653, y P Control, ref. A11A01654 Urine Control L/H, ref. A11A01674 Equipamiento estándar de laboratorio. Manipulación 1. Retire los dos tapones del casete. 2. En caso de que haya espuma, retírela con una pipeta de plástico. 3. Coloque el casete en el compartimento refrigerado para reactivos del 400. Calibrador Para la calibración utilice: Multical, ref. A11A01652 (no incluido) 10 x 3 ml (liofilizado) Control Para el control de calidad interno utilice: N Control, ref. A11A01653 (no incluido) 10 x 5 ml (liofilizado) P Control, ref. A11A01654 (no incluido) 10 x 5 ml (liofilizado) Urine Control L/H, ref. A11A01674 (no incluido) 1 x 10 ml + 1 x 10 ml Cada control debe realizarse diariamente y/o tras una calibración. La frecuencia de los controles y los intervalos de confianza deben adaptarse a las exigencias del laboratorio y a las normativas específicas de cada país. Debería seguir las normativas federales, estatales y locales para someter a prueba materiales de control de calidad. Los resultados deberán encontrarse dentro de Muestra Suero. Plasma en heparina de litio. Orina fresca Los anticoagulantes que no estén incluidos en la lista no han sido probados por HORIBA Medical y por tanto no se recomienda su uso para este ensayo. Estabilidad en suero/plasma (1): 2 días a temperatura ambiente 1 semana a 4-8 C Estabilidad en orina (4): 4 semanas a - 20 C si ph < 7,0 4 días a 4-8 C si ph < 7,0 2 días a C si ph < 7,0 Valores de referencia Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de referencia. Los valores que aparecen en este documento deben tomarse sólo como pauta. Suero, plasma (1): Urea BUN Adultos: [mg/dl] [mmol/l] [mg/dl] Global ,8-7,2 7,9-20,2 Mujeres < 50 años ,6-6,7 7,3-18,8 Mujeres > 50 años ,5-7,2 9,8-20,2 2 / 7
3 Urea BUN Adultos: [mg/dl] [mmol/l] [mg/dl] Hombres < 50 años ,2-7,3 9,0-20,5 Hombres > 50 años ,0-9,2 8,4-25,8 Urea BUN Niños: [mg/dl] [mmol/l] [mg/dl] 1-3 años ,8-6,0 5,1-16, años ,5-6,0 7,0-16, años ,9-7,5 8,1-21,1 Orina (5): Urea [mmol/24h] BUN [mg/24h] ,207-1,993 Conservación y estabilidad Los reactivos en casetes sin abrir se mantienen estables hasta la fecha de caducidad que figura en la etiqueta si se almacenan a una temperatura de entre 2-8 C. Estabilidad después de la apertura: véase la sección Rendimiento en el 400. No congele los reactivos. Tratamiento de los residuos Consulte las normas legales locales. Este reactivo contiene menos de un 0,1% de azida sódica como conservante. La azida sódica puede reaccionar con el plomo y el cobre y formar azidas metálicas explosivas. Los casetes de reactivos son desechables y deben desecharse siguiendo las normas locales legales. Consulte la ficha de seguridad (MSDS) del reactivo. No utilice el producto si presenta pruebas visibles de deterioro biológico, químico o físico. Es responsabilidad del usuario comprobar que este documento sea aplicable al reactivo utilizado. Rendimiento en el 400 Los datos de rendimiento que se presentan a continuación han sido obtenidos en el analizador 400. Suero, plasma Número de ensayos: 220 ensayos b Si el número de ensayos solicitados es bajo y el usuario del 400 desea obtener la máxima estabilidad del casete en el equipo, HORIBA Medical recomienda utilizar el consumible XEC232 (kit membrana) para alcanzar el número de ensayos citados en esta información. Estabilidad del reactivo en el equipo: Una vez abierto, el casete de reactivo colocado en el compartimento refrigerado del 400 permanece estable durante 70 días. Volumen de la muestra: 3,0 µl/ensayo Límite de detección: El límite de detección se ha determinado siguiendo las recomendaciones del protocolo Valtec (6) y es de: Urea: 0,31 mmol/l (1,86 mg/dl) BUN: 0,9 mg/dl Precauciones generales a Este reactivo está indicado exclusivamente para el diagnóstico in vitro profesional. Venta exclusiva con receta médica. Este reactivo está clasificado como no peligroso de conformidad con el Reglamento (CE) N.1272/2008. No ingerir. Evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas. Siga las precauciones estándar de laboratorio para su uso. a Modificación: modificación de las precauciones generales. b Modificación: referencia de membrana del kit modificada. 3 / 7
4 Exactitud y precisión: Repetibilidad (precisión intraensayo) Se han sometido a prueba 20 veces 3 muestras de concentración baja, media y alta, así como 2 controles, siguiendo las recomendaciones del protocolo Valtec (6). mmol/l Media de urea CV % mg/dl 6,68 40,1 2,27 25,93 155,6 1,66 Muestra 1 2,15 12,9 2,76 Muestra 2 7,43 44,6 1,58 Muestra 3 30,45 182,7 1,80 Valor medio BUN (mg/dl) CV % 18,73 2,27 72,78 1,66 Muestra 1 6,02 2,76 Muestra 2 20,86 1,58 Muestra 3 85,46 1,80 Reproducibilidad (precisión total) Se han determinado cuantitativamente por duplicado durante 20 días 2 muestras (de nivel bajo y alto) así como 2 controles (2 series por día), siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP5-A (7). mmol/l Media de urea CV % mg/dl 6,57 39,4 2,14 25,54 153,2 1,93 Muestra 1 6,86 41,1 2,14 Muestra 2 24,98 149,9 1,97 Valor medio BUN (mg/dl) CV % 18,45 2,14 71,69 1,93 Muestra 1 19,24 2,14 Muestra 2 70,12 1,97 Intervalo de medida c : Urea: El ensayo ha confirmado un intervalo de medida de entre 0,31 y 50,00 mmol/l (2,20 y 300,00 mg/dl), con una posdilución automática de hasta 250,00 mmol/l (1500,0 mg/dl). BUN: El ensayo ha confirmado un intervalo de medida de 0,9 y 140,3 mg/dl, con una posdilución automática de hasta 701,5 mg/dl. Correlación: Se han correlacionado 136 muestras de pacientes (suero y plasma) con un reactivo comercial tomado como referencia siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP9-A2 (8). Los valores obtenidos para la urea oscilan entre entre 0,37 y 49,49 mmol/l (entre 2,20 y 297,22 mg/dl). Los valores obtenidos para BUN oscilan entre entre 1,03 y 138,89 mg/dl. La ecuación de la recta alométrica obtenida con el procedimiento de regresión Passing-Bablock (9) es: Urea: Y = 0,99 X - 0,02 (mmol/l) Y = 0,99 X - 0,12 (mg/dl) con un coeficiente de correlación r 2 = 0,996 BUN: Y = 0,99 X - 0,06 (mg/dl) con un coeficiente de correlación r 2 = 0,996 Interferencias: Hemoglobina: Triglicéridos: una concentración de 267 µmol/l (460 mg/dl). No se han observado interferencias significativas hasta una concentración de Intralipid (representativa de la lipemia) de 7 mmol/l (612,5 mg/dl). c Modificación: modificación del intervalo de medida. 4 / 7
5 Bilirrubina total: Bilirrubina directa: una concentración de 380 µmol/l (22,23 mg/dl). una concentración de 400 µmol/l (23,40 mg/dl). Young ha indicado otras limitaciones recogidas en una lista de medicamentos y variables preanalíticas de los cuales se sabe que afectan a esta metodología (10, 11). Estabilidad de la calibración: El reactivo se calibra a Día 0. La estabilidad de la calibración se verifica sometiendo a prueba 2 controles. La estabilidad de la calibración es de 8 días. Nota: Se recomienda ejecutar una nueva calibración si se cambia de lote de reactivo o si los resultados del control de calidad exceden el intervalo establecido. Versión de la aplicación: En todo el mundo excepto en los EE.UU.: Urea: Urea4.xx NUS: BUN3.xx Sólo para los EE.UU.: Urea: Urea2.xx NUS: BUN2.xx Orina Número de ensayos: 220 ensayos b Si el número de ensayos solicitados es bajo y el usuario del 400 desea obtener la máxima estabilidad del casete en el equipo, HORIBA Medical recomienda utilizar el consumible XEC232 (kit membrana) para alcanzar el número de ensayos citados en esta información. Estabilidad del reactivo en el equipo: Una vez abierto, el casete de reactivo colocado en el compartimento refrigerado del 400 permanece estable durante 70 días. Volumen de la muestra: 3,0 µl/ensayo Exactitud y precisión: Repetibilidad (precisión intraensayo) Se han sometido a prueba 20 veces 3 muestras de concentración baja, media y alta, así como 2 controles, siguiendo las recomendaciones del protocolo Valtec (6). mmol/l Media de urea CV % mg/dl 129,13 774,8 1,24 223, ,4 0,74 Muestra 1 91,55 549,3 1,76 Muestra 2 173, ,9 1,44 Muestra 3 521, ,7 0,72 Media BUN (mg/dl) CV % 363 1, ,74 Muestra ,76 Muestra ,44 Muestra ,72 Reproducibilidad (precisión total) Se han determinado cuantitativamente por duplicado durante 20 días 2 muestras (de nivel medio y alto), así como 2 controles (2 series por día), siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP5-A (7). mmol/l Media de urea CV % mg/dl 128,58 771,5 3,80 216, ,6 4,13 Muestra 1 198, ,8 3,42 Muestra 2 547, ,9 3,08 Límite de detección: El límite de detección se ha determinado siguiendo las recomendaciones del protocolo Valtec (6) y es de: Urea: 12,6 mmol/l (75,6 mg/dl) BUN: 35 mg/dl Media BUN (mg/dl) CV % 361 3, ,13 b Modificación: referencia de membrana del kit modificada. 5 / 7
6 Media BUN (mg/dl) CV % Muestra ,42 Muestra ,08 Intervalo de medida: Urea: El ensayo ha confirmado un intervalo de medida de entre entre 12,6 y 750,0 mmol/l (entre 75,6 y 4500 mg/dl), con una posdilución automática de hasta 3750 mmol/l (22500 mg/dl). Se ha evaluado la linealidad del reactivo hasta 750,0 mmol/l (4500 mg/dl) siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (12). BUN: El ensayo ha confirmado un intervalo de medida de entre 35 y 2106 mg/dl, con una posdilución automática de hasta mg/dl. Se ha evaluado la linealidad del reactivo hasta 2106 mg/dl siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (12). Correlación: Se han correlacionado 108 muestras de pacientes (orina) con un reactivo comercial tomado como referencia siguiendo las recomendaciones del protocolo CLSI (NCCLS), EP9-A2 (8). Los valores obtenidos para la urea oscilan entre entre 16,0 y 722,5 mmol/l (entre 96 y 4340 mg/l). Los valores obtenidos para BUN oscilan entre entre 45 y 2029 mg/dl. La ecuación de la recta alométrica obtenida con el procedimiento de regresión Passing-Bablock (9) es: Urea: Y = 1,14 X - 1,77 (mmol/l) Y = 1,14 X - 10,63 (mg/dl) con un coeficiente de correlación r 2 = 0,9946 BUN: Y = 1,14 X - 4,90 (mg/dl) con un coeficiente de correlación r 2 = 0,9946 Interferencias: Hemoglobina: Bilirrubina directa: una concentración de 290 µmol/l (500 mg/dl). una concentración de 650 µmol/l (38 mg/dl). Young ha indicado otras limitaciones recogidas en una lista de medicamentos y variables preanalíticas de los cuales se sabe que afectan a esta metodología (10, 11). Estabilidad de la calibración: El reactivo se calibra a Día 0. La estabilidad de la calibración se verifica sometiendo a prueba 2 controles. La estabilidad de la calibración es de 8 días. Nota: Se recomienda ejecutar una nueva calibración si se cambia de lote de reactivo o si los resultados del control de calidad exceden el intervalo establecido. Versión de la aplicación: En todo el mundo excepto en los EE.UU.: Urea: Urea-U5.xx NUS: BUN-U2.xx Sólo para los EE.UU.: Urea: Urea-U2.xx NUS: BUN-U2.xx Factor de conversión (1) Urea (mmol/l) = urea (mg/dl) x 0,1665 BUN (mg/dl) = Urea (mg/dl) / 2,14 BUN (mg/dl) = Urea (mmol/l) / 0,3561 Referencia 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 st ed. Frankfurt: THBooks Verlagsgesellschaft (1998): Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company (1999): Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung in Blut und Serum im optischen Test nach Warburg (Enzymatic determination of urea in blood and serum with the optical test according to Warburg). Klin. Wochenschr (1965) 43: Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics Samples. Samples: From the Patient to the Laboratory. 1 st Ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany) (2001): Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 th Ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA) (2006): Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: / 7
7 7. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A (1999) 19 (2). 8. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 9. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 7 / 7
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