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1 ÍNDICE 0. SUMMARY xiii I. INTRODUCCIÓN 1- CARACTERISTICAS GENERALES DEL SISTEMA INMUNITARIO Componentes del sistema inmunitario Órganos del sistema inmune Células del sistema inmune Moléculas del sistema inmune 6 2- MOLÉCULAS MENSAJERAS DEL SISTEMA INMUNITARIO: CITOQUINAS Y QUIMIOQUINAS Propiedades generales de las citoquinas Quimioquinas Papel de las quimioquinas en la inflamación aguda y crónica Quimioquinas y receptores de quimioquinas en el riñón Expresión de quimioquinas por células renales Células renales y receptores de quimioquinas Papel de las quimioquinas en enfermedades renales humanas TRASTORNOS DEL SISTEMA INMUNITARIO: ENFERMEDADES AUTOINMUNES Mecanismos de lesión del tejido inmunitario Tolerancia Inmunitaria LUPUS ERITEMATOSO SISTÉMICO (LES) Definición Epidemiología Etiopatogenia Factores genéticos Factores no genéticos Factores inmunológicos Características clínicas Características morfológicas Riñón Clasificación histológica de la nefritis lúpica Inmunofluorescencia Microscopía electrónica Indicadores pronósticos Piel Articulaciones 42 viii

2 Sistema nervioso central Pericarditis y afectación de otras cavidades serosas Bazo Pulmones Otros órganos y tejidos Tratamiento Terapia utilizada en el lupus poco agresivo Terapia utilizada en el lupus agresivo Nuevas terapias: ensayos clínicos 46 5-MANIPULACIÓN DEL SISTEMA INMUNITARIO: RATONES TRANSGÉNICOS Obtención de ratones knockout por disrupción génica Modelos de lupus eritematoso sistémico 49 II. HIPÓTESIS DE TRABAJO Y OBJETIVO 1- HIPÓTESIS DE TRABAJO OBJETIVO 53 III. MATERIAL Y MÉTODO 1- ANIMALES Generación del ratón MRL/lpr deficiente en CCR Análisis Genotípico Grupos experimentales de ratones OBTENCIÓN Y PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS Parámetros Bioquímicos e Inmunológicos, Histológicos e Inmunohistológicos Parámetros bioquímicos e inmunológicos Recogida de Sangre y Orina y determinación de urea nitrogenada en sangre (BUN), creatinina y albúmina urinaria Análisis de sangre periférica Expresión de marn de quimioquinas, citoquinas y receptores de quimioquinas Parámetros histológicos e inmunohistoquímicos Obtención de tejidos: Autopsia 64 A- Riñones 64 B- Otros tejidos Estudio histológico 66 A- Fijación del tejido, inclusión en parafina y cortes 66 B- Técnicas histológicas e histoquímicas 66 B.1- Tinción Hematoxilina-Eosina (H&E) 66 B.2- Tinción Ácido Periódico de Schiffs (PAS) 67 ix

3 B.3- Tinción Plata Metenamina 67 C- Estudio Inmunohistoquímico 67 D- Inmunofluorescencia directa (IFD) 66 E- Cuantificación de los parámetros histológicos 69 E.1 - RIÑÓN: Valoración de la nefropatía lúpica 69 E.1.1- Lesiones glomerulares 69 E.1.2- Lesiones túbulo-intersticiales 71 E.2- GANGLIO LINFÁTICO 73 E.3- BAZO 74 E.4- PULMÓN 74 E.5- GLÁNDULA SALIVAL 75 F- Cuantificación de parámetros inmunohistoquímicos 75 G- Cuantificación de depósitos de IFD ANÁLISIS ESTADÍSTICO 76 IV. RESULTADOS 1- PARÁMETROS BIOQUÍMICOS, INMUNOLÓGICOS, HISTOLÓGICOS E INMUNOHISTOQUÍMICOS Parámetros bioquímicos e inmunológicos Urea Nitrogenada en Sangre (BUN) y albuminuria Inmunoglobulinas circulantes Análisis de sangre periférica Expresión de marn de Citoquinas Proinflamatorias, Quimioquinas, y Receptores de Quimioquinas Parámetros histológicos e inmunohistoquímicos Peso corporal, Esplénico, y Ganglionar Riñón Estudio histológico Depósitos de complejos inmunes Infiltración renal de macrófagos y células T Proliferación celular Intraglomerular Otros: Ganglio linfático, Bazo, Pulmón y Glándula Salival Estudio histológico 102 A- Ganglio linfático 102 B- Bazo 103 C- Pulmón 104 D- Glándula salival TABLAS DE RESULTADOS 106 x

4 V. DISCUSIÓN 1- SITUACIÓN ACTUAL. HIPÓTESIS INFLAMACIÓN LOCAL Expresión renal de quimioquinas y receptores Receptores Toll-like (TLR) NUESTROS RESULTADOS EN COMPARACIÓN CON OTROS ESTUDIOS PAPEL DE T H1 y T H INTERFERÓN-GAMMA ÓRGANOS LINFOIDES PARÁMETROS BIOQUÍMICOS E INMUNOLÓGICOS Niveles séricos Niveles urinarios PARÁMETROS HISTOLÓGICOS E INMUNOHISTOQUÍMICOS Histología renal Histología de otros tejidos Ganglio linfático Bazo Pulmones y Glándula Salival TERAPÉUTICA Y FUTURAS DIRECTRICES COMPARATIVA CON LA NEFRITIS LÚPICA EN SERES HUMANOS 146 VI. CONCLUSIONES 149 VII. BIBLIOGRAFÍA 151 xi

5 12

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