Mutaciones asociadas a resistencia a estreptomicina y etambutol en Mycobacterium tuberculosis - secuenciación y desarrollo de cebadores.

Tamaño: px

Comenzar la demostración a partir de la página:

Download "Mutaciones asociadas a resistencia a estreptomicina y etambutol en Mycobacterium tuberculosis - secuenciación y desarrollo de cebadores."

Alfredo Calderón Ríos
hace 8 años
Vistas:

1 Mutaciones asociadas a resistencia a estreptomicina y etambutol en Mycobacterium tuberculosis - secuenciación y desarrollo de cebadores. Dr. Jaeson S. Calla Choque Universidad Peruana Cayetano Heredia

2 Incidencia Infección Diagnóstico Tratamiento Genes blanco Introducción Genes Blanco Código Descripción del gen rpsl gi Gen que codifica para la proteína ribosomal S12 de Mycobacterium tuberculosis. rrs gi Gene rrna 16S (MTU16SRN) de Mycobacterium tuberculosis. emba, embb gi Se empleó la secuencia que cubre toda la región del operón embcab que contiene a los genes embc, emba y embb Mycobacterium tuberculosis

3 Genes asociados a resistencia de SM y EMB en M. tuberculosis Figura 2. Representación esquemática del polimorfismo en los genes embc, emba y embb relacionados a resistencia a EMB (1693 y 1170 pb). Figura 1. Representaciones esquemáticas de las regiones rrs (1230 pb) y rpsl (314 pb)asociadas a resistencia a SM.

4 Objetivos 1. Analizar y optimizar los principales parámetros involucrados en la amplificación y secuenciación de los genes de interés utilizando los cebadores diseñados 2. Determinar la presencia de mutaciones en las regiones analizadas y establecer su posible asociación con resistencia a drogas

5 Métodos Cultivo de aislado de M. tuberculosis Extracción de DNA genómico Diseño de primers PCR Secuenciación Análisis de resultados

6 Resultados Figura 4. Evaluación de concentraciones de MgCl 2 Figura 3. Evaluación de temperaturas (gradiente de temperaturas).

7 Resultados Figura 6. Cromatogramas del secuenciamiento de ADN Figura 5. Sensibilidad de los cebadores para la amplificación de una región del gen emba.

8 Resultados Figura 7. Especificidad de los cebadores EMBBAF/EMBBAR para la amplificación del gen embb

9 Resultados Mutaciones identificadas mediante los cebadores diseñados

10 1. Los iniciadores diseñados permiten la amplificación eficiente de las regiones de interés. 2. Se lograron optimizar los principales parámetros involucrados en la amplificación y secuenciamiento de los genes de interés. 3. Se logró determinar la presencia de mutaciones en las regiones analizadas y se indicó la posible asociación con la resistencia a los antibióticos estreptomicina y etambutol. Conclusiones 4. Dos de las mutaciones encontradas son reportadas aquí por primera vez. Figura 8. Mutaciones localizadas en el gen embb asociadas a la resistencia a etambutol en M. tuberculosis

11 Tabla 1. Principales mutaciones halladas en los genes rpsl y rrs asociadas a resistencia a estreptomicina.

12 Tabla 2. Principales mutaciones halladas en los genes emba y embb asociadas a resistencia a etambutol.

Documentos relacionados

PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO PARA LA PRUEBA DE GENOTIPIFICACIÓN DEL VIH

PROCEDIMIENTO DE LABORATORIO PARA LA PRUEBA DE GENOTIPIFICACIÓN DEL VIH Blga. Gisely Hijar Guerra Coordinación del Laboratorio de Biotecnología y Biología Molecular. Responsable de los Procesos de la Prueba