Pontificia Universidad Católica del Ecuador

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1 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: DATOS INFORMATIVOS: MATERIA O MÓDULO: CÓDIGO: 160 INMUNODIAGNOSTICO DE MICROORGANISMOS T-L CARRERA: Microbiología NIVEL: 5 No. CRÉDITOS: 5 CRÉDITOS TEORÍA: CRÉDITOS PRÁCTICA: SEMESTRE / AÑO ACADÉMICO: PROFESOR: Nombre: Grado académico o título profesional: Breve indicación de la línea de actividad académica: Indicación de horario de atención a estudiantes: Correo electrónico: Teléfono: Primer/011-1 Rosita Chiriboga Ponce Tecnólogo Médico, Licenciada en Laboratorio Clínico e Histotecnológico-Maestría en Salud Pública- Director de Proyectos e Investigador Principal Investigación de Servicios de Salud, Desarrollo de proyectos. Previa cita rfchiriboga@puce.edu.ec DESCRIPCIÓN DE LA MATERIA: Inmunodiagnóstico de microorganismo tienen la finalidad de introducir al alumno en las técnicas de diagnóstico de enfermedades infecciosas producidas por varios gérmenes. Además de conocer el fundamento, utilidad y aplicabilidad de dichas metodologías, el alumno será capaz de identificar el uso de estas pruebas de manera práctica. Los alumnos se familiarizaran con las principales técnicas y equipos utilizados en el diagnóstico inmunológico y serológico. Adicionalmente conocerá la diferencia teórico y práctica entre pruebas rápidas, ELISA manual y automática. 1

2 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: OBJETIVO GENERAL: Conocer la aplicación y utilización de las diferentes pruebas diagnósticas en la determinación de gérmenes patógenos. 4. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Inmunodiagnóstico de enfermedades infecciosas. manera práctica. en el empleo de las diferentes técnicas ELISA para fines diagnósticos de técnicas Inmunodiagnóstico. nuevos adelantos en las 5. CONTENIDOS La Metodología es desarrollada por el docente y esta detallada en el cronograma adjunto: 1. Inmunología Básica 1.1 El sistema Inmune en el proceso salud y enfermedad. 1. Inmunidad innata y adaptativa. 1. Activación de Linfocitos T y B. 1.4 Inmunidad celular y humoral 1.5 Comunicación intercelular 1.6 Amplificación y regulación de la respuesta inmune.. Técnicas Básicas de Inmunodiagnóstico.1 Aglutinación. Precipitación. Hemaglutinación.4 ELISA.5 Western blot.6 Inmunofluorescencia.7 Quimioluminiscencia.. Pruebas Rápidas.1 Definición. Fundamento. Ventajas y Desventajas.4 Interpretación 4. Pruebas ELISA 4.1 Definición 4. Fundamento 4. Tipos

3 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: Interpretación 5. La biología molecular aplicada al diagnóstico de las enfermedades inmunológicas 5.1 Inmunología Molecular 5. Técnicas de Biología Molecular y su aplicación en el diagnóstico inmunológico: PCR, DNA, Real Time. 6. Citometría de Flujo en el Inmudiagnóstico. 6.1 Fundamento 6. Anticuerpos monoclonales para detección de moléculas 6. Cytometric Bead Array. 6.4 Interpretación de resultados. 7. Inmunodiagnóstico de las enfermedades infectocontagiosas: bacterias, hongos, virus y parásitos. 7.1 Respuesta inmune frente a infecciones y evasión de la respuesta inmune. 7. Inmunodiagnóstico de las infecciones bacterianas, micóticas, parasitarias y virales, fundamento y metodologías. 7. Vacunas. 8. Estandarización y validación de pruebas inmunodiagnósticas 8.1 Uso de control de calidad interno 8. Sensibilidad 8. Especificidad 8.4 Valores Predictivos 8.5 Concordancia entre pruebas-reacciones cruzadas ejemplos. Laboratorio: Práctica 1: Reacción antígeno-anticuerpo a) Realización e interpretación de las técnicas b) Fundamento de la técnica c) Breve explicación de la enfermedad a detectarse d) Técnicas rápidas de aglutinación para detección de antígenos en muestras biológicas. Reacciones febriles. e) Detección de rotavirus en heces. Práctica : Reacción antígeno-anticuerpo a) Realización e interpretación de la técnica b) Fundamento de la técnica c) Breve explicación de la enfermedad a ser detectada d) Búsqueda de anticuerpos incompletos en suero. e) Pruebas de floculación-rpr- detección de sífilis Práctica : Realización de pruebas de hemaglutinación a) Realización e interpretación de la técnica b) Fundamento de la técnica

4 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: c) Breve explicación del microorganismo a detectarse d) Hemaglutinación y la enfermedad de Chagas Práctica 4: Técnicas de ELISA a) Realización e Interpretación de la prueba b) Tipo de ELISA a utilizarse: Indirecto c) Utilización de controles internos d) Fundamento e) Validación de Pruebas f) Cálculos del punto de corte g) Resultados. Práctica 5: Técnica de ELISA a) Realización e Interpretación de prueba b) Tipo de ELISA a utilizarse: De un solo paso c) Utilización de controles internos d) Fundamento e) Validación de pruebas f) Cálculo del punto de corte g) Resultados. Práctica 6: Técnica de ELISA a) Realización e Interpretación de prueba b) Tipo de ELISA a utilizarse: Directo-Sanduche c) Utilización de controles internos d) Fundamento e) Validación de pruebas f) Cálculo de punto de corte g) Resultados. Práctica 7: Pruebas rápidas a) Realización e interpretación de pruebas b) Fundamento c) Inmunocromatográficas cassette d) Sueros reactivos y no reactivos e) Resultados. Práctica 8. Pruebas rápidas a) Realización e interpretación de pruebas b) Fundamento c) Inmunocormatográfico en columnas d) Sueros reactivos y no reactivos e) Resultados. Práctica 9. Determinación de sensibilidad y especificidad a) Realización e interpretación de prueba b) ELISA vs Rápidas 4

5 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: c) Uso de sueros controles internos d) Uso de 8 sueros negativos e) Uso de 8 sueros reactivos f) Uso de 8 sueros con enfermedades diferentes g) Comparación de resultados h) Análisis. Práctica 10. Observación de pruebas en quimioluminicencia a) Fundamento de la técnica b) Observación de la realización de Pruebas c) Interpretación de resultados Práctica 11. Observación de pruebas de PCR REAL TIME a) Fundamento b) Observación de la realización de Pruebas c) Interpretación de resultados. Práctica 1. Observación de pruebas de citometría de flujo a) Fundamento b) Observación de la realización de pruebas c) Interpretación de resultados. 6. METODOLOGÍA, RECURSOS: permitiendo la participación activa de los estudiantes. alumno. l docente solicitará a los alumnos la preparación de temas relacionados a cada tema. -mail (rfchiriboga@puce.edu.ec). nviará los trabajos recibidos y corregidos a las direcciones de de la PUCE que posee cada estudiante. PUBMED, CHROCAINE, ect vía internet a través de HINARI o OPS/OMS. Recursos utilizados serán presentaciones en Power-Point, recursos on-line y asesoramiento continuo. 5

6 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: EVALUACIÓN: En la evaluación se consideran: lunes hasta el medio día, vía para ser revisados y calificados. Los trabajos enviados fuera de este horario serán revisados pero no tendrán calificación y se considerará como incumplimiento de tarea. final. menes parciales y trabajos realizados serán promediados para obtener una calificación 8. Cronograma de evaluaciones Está indicado en el cronograma general. 9. Sistema de Calificaciones. La materia será evaluada sobre 50 puntos: Tareas enviadas luego de cada clase serán calificadas sobre 10 puntos así: envío puntos, revisión del contenido del documento 8 puntos. Las pruebas parciales tendrán una calificación de 0 puntos. Se sumaran y promediaran la calificaciones obtenidas por tareas hasta la fecha de los parciales, seguidamente la calificación obtenida en la prueba parcial será promediada con la de las tareas, obteniéndose la nota final de cada aporte, en total son durante el semestre. El examen final será sobre 0 puntos. Para aprobar la materia el estudiante deberá completar un mínimo de Fecha de entrega de calificaciones a Secretaría: 11. 1º aporte (tareas + Prueba Parcial) 10 puntos 1 al 16 septiembre º aporte (tareas + Prueba parcial) 10 puntos 17 al 1 de octubre º aporte (tareas + Prueba Parcial) 10 puntos 1 al 16 noviembre 011 Examen final 0 puntos 1-16 de diciembre 011 TOTAL 50 puntos 1. BIBLIOGRAFÍA: HINARI-OMS/OPS. Artículos científicos de acuerdo a cada tema elegido por los estudiantes para la presentación de temas solicitados. 6

7 Av. 1 de Octubre 1076 y Roca Apartado postal Fax: Telf: Kurt Beuselinck,* Marc van Ranst, and J. van Eldere, Automated Extraction of Viral-Pathogen RNA and DNA for High-Throughput Quantitative Real-Time PCR Aprobado: Por el Consejo de Escuela f) Director de Escuela fecha: 9-junio-01 7

8 EVAL UACI ONES Asignatura: INMUNODIAGNÓSTICO DE MICROORGANISMOS T-L ORGANIZACIÓN DOCENTE SEMANAL ACTIVIDADES DE INTERACCIÓN DOCENTE - ESTUDIANTES TRABAJO AUTÓNOMO DEL ESTUDIANTE SEMANA (HORAS PRESENCIALES) (HORAS NO PRESENCIALES) (1-16) N de horas N de horas de de clases ACTIVIDADES (Descripción) laboratorio teóricas TEMAS A TRATAR (N del tema, unidad, o capítulo descritos en Contenidos) 1 semana Revisión de conceptos UNIDAD 1: Inmunología Básica semana Revisión de conceptos UNIDAD 1: Inmunología Básica semana Definiciones, Revisión Bibliográfica /Practicas en laboratorio UNIDAD : Técnicas Básicas de Inmunodiagnóstico Definiciones, Revisión Bibliográfica UNIDAD : Técnicas Básicas de 4 semana Practicas en Laboratorio Inmunodiagnóstico 5 semana 1ra. Definiciones, Revisión Bibliográfica UNIDAD : Técnicas Básicas de 6 semana Prácticas de Laboratorio Laboratorio Definiciones, Revisión Bibliográfica UNIDAD : Pruebas Rápidas 7 semana Prácticas de Laboratorio Definiciones, revisión Bibliográfica UNIDAD : Pruebas ELISA 8 semana Prácticas de Laboratorio 9 semana Fundamentos, revisión Bibliográfica UNIDAD 4: Pruebas de ELISA 10 semana da. Tipos, Revisión Bibliográfica UNIDAD 4: Pruebas de ELISA 11 semana Prácticas de Laboratorio 1 semana Definiciones, revisión Bibliográfica UNIDAD 5: Biología Molecular Diagnóstico 1 semana Definiciones, revisión Bibliográfica UNIDAD 6: Citometria de Flujo 14 semana Definiciones, revisión Bibliográfica UNIDAD 7: Enfermedades 8

9 15 semana ra. 16 semana Ejercicios Prácticos, revisión Bibliográfica 17 semana Ejercicios Prácticos, Definiciones, revisión Bibliográfica 18 semana Semana de Exámenes : Teórico-Práctico Infectocontagiosas UNIDAD 8: Estandarización y validación de pruebas UNIDAD 8: Estandarización y validación de pruebas 9