Francisco Requena Domenech. Septiembre de Ganadería Ecológica e Integrada

Transcripción

1 TASAS DE GESTACIÓN EN OVINO MERINO FLEISCHAF TRATADO CON ESPONJAS INTRAVAGINALES IMPREGNADAS CON MAP O FGA MÁS ecg EN LAS DISTINTAS FASES DEL CICLO ESTRAL. Francisco Requena Domenech Trabajo Fin de Máster Septiembre de 2010 Máster en Zootecnia y Gestión Sostenible: Ganadería Ecológica e Integrada.

2 ÍNDICE 1. INTRODUCCIÓN MATERIAL Y MÉTODOS Animales: Hembras Machos Ecografía: Sincronización de celos: Cubrición: Diagnóstico de gestación: Análisis de los resultados: RESULTADOS DISCUSIÓN CONCLUSIONES BIBLIOGRAFÍA FIGURAS, TABLAS E IMÁGENES ABSTRACT

3 RESUMEN Los programas comerciales de sincronización de celo se realizan con esponjas intravaginales impregnadas con progestágenos sintéticos como son el acetato de medroxiprogesterona (MAP) o el acetato de flugestona (FGA). Normalmente las esponjas se dejan en el fondo de la vagina de las hembras en diferentes momentos del ciclo estral. El objetivo del presente estudio fue comparar los niveles de fertilidad en ovejas con estro sincronizado usando esponjas comerciales impregnadas con 60 mg de MAP o 30 mg de FGA puesta durante la fase luteal o folicular del ciclo estral, más ecg. Un total de 373 ovejas merinas fleischaf sexualmente maduras, con edades comprendidas entre los 3-5,5 años y clínicamente sanas fueron examinadas por ecografía transrectal con un transductor de 8 Mhz (Aquila, Esaote-Pie medical, Maastricht, Holanda) para visualizar el estatus ovárico en época reproductiva. De este modo, ovarios sin cuerpo lúteo (CL) y folículos 4 mm fueron considerados en fase folicular mientra que aquellos con CL y folículos 4 mm fueron considerados en fase luteal. Así, la sincronización del estro se realizó en 183 ovejas tratadas con MAP (Sincrogest, Laboratorios Ovejero, León, España) de las que 54 se encontraban en fase folicular y 129 en fase luteal. Por otro lado fueron tratadas 190 ovejas con FGA ((Sincropart, Lab CEVA, Barcelona, España) de las que 57 estaban en fase folicular y 133 en luteal. Las esponjas fueron dejadas en las ovejas durante 12 días, tras los cuales se procedió a la retirada de las esponjas y administración vía intramuscular de ecg. Tras esto, las ovejas fueron puestas junto con machos en una relación de 5 a 1 durante 5 días. Veintiocho días después de separarlas de los machos, la tasa de gestación fue determinada por ecografía transrectal con un transductor de 8 Mhz. Los niveles de fertilidad del estro sincronizado con esponjas con MAP o FGA durante la fase folicular o luteal están expresados en porcentajes y fueron analizados por un test Chi-cuadrado de Pearson. La significancia fue al nivel P <0,05. Después del examen ecográfico de las 373 ovejas inciales, 30,03% fueron consideradas en fase folicular y 69,97% fueron consideradas en fase luteal del ciclo estral. El porcentaje de gestación total fue de 68,66% y 73,38% para MAP y FGA respectivamente. La tasa de gestación para las ovejas tratadas con MAP durante la fase folicular fue de 67,50% y 69,14% para las tratadas durante la fase luteal. Para las ovejas tratadas con FGA la tasa de gestación fue 73,81% durante la fase folicular y 73,20% durante la fase luteal. No se encontraron diferencias significativas en las tasas de gestación para ovejas tratadas con MAP o FGA durante la fase folicular o luteal. En conclusión, estos resultados sugieren que al final de la estación reproductiva los niveles de fertilidad en la oveja merina fleischaf no están afectados tras un tratamiento de sincronización con esponjas intravaginales impregnadas con MAP o FGA. Además las tasas de gestación no se afectan si los tratamientos de sincronización comienzan en la fase folicular o luteal del ciclo estral. 2

4 1. INTRODUCCIÓN La necesidad de obtener corderos fuera de la estación reproductiva de la oveja y en momentos de mayor rentabilidad económica, llevo a cabo el desarrollo de métodos para controlar el estro de la especie ovina. Así pues, la sincronización del estro en ovino se puede realizar con esponjas intravaginales impregnadas con progesterona natural (Robinson, 1967), o análogos sintéticos de la progesterona, como son el acetato de medroxiprogesterona (MAP) o el acetato de flugestona (FGA). Numerosos estudios han comprobado la efectividad de las esponjas para la inducción y sincronización del estro en la oveja impregnadas con MAP o FGA (Deweese W. P. y cols., 1970; Crosby y cols., 1991; Noël B. y cols., 1994; Leyva V. y cols., 1998), así como su efecto en la fertilidad posterior a la sincronización (Ainsworth L. and Shrestha J.N.B., 1983; Evans A.C.O. y cols., 2004). En la actualidad las esponjas intravaginales impregnadas con MAP o FGA que encontramos en el mercado contienen una dosis de 60 mg de MAP y 20 o 30 mg de FGA. En cada ciclo estral de la oveja existe una fase folicular relativamente corta y una fase luteal relativamente larga. Durante la fase folicular, el aumento de estrógenos desde el folículo preovulatorio induce un corto período de tiempo de receptividad sexual (celo), así como el pico de hormona luteinizante (LH) que desencadena la ovulación. Tras esta fase comienza la fase luteal caracterizada por la formación de un cuerpo lúteo que secreta progesterona (Mc Cracken, John A. y cols., 1999). Uno de los métodos más usados para llevar a cabo un programa reproductivo de sincronización en ovino es el empleo de esponjas intravaginales con MAP o FGA durante días, y administrar gonadotropina coriónica equina (ecg) a una dosis de UI (según el fabricante) en el momento de la retirada de las esponjas. Fuera de la estación reproductiva es muy recomendable el empleo de ecg puesto que produce una sincronización del estro y una ovulación más precisa y predecible (Ainsworth. L. y cols., 1982/1983). Además Boland M.P. y cols. (1981) probaron que la ecg aumenta el porcentaje de partos en ovejas de una manera dependiente de la dosis por un incremento de la tasa de ovulación y del estro sincronizado. Numerosos estudios han investigado sobre la repercusión de distintas dosis de ecg en la fertilidad (Hüseyin Timurkan and Hamit Yildiz, 2005; Zeleke M. y col., 2005). El empleo de esponjas intravaginales permiten la regresión del cuerpo lúteo, pero el estro ni la ovulación se suprimen hasta que la esponja intravaginal es retirada (McCracken, John A. y cols., 1999). Durante la sincronización de celo en un grupo de ovejas, cada hembra se encuentra en diferentes momentos del ciclo estral en el momento que se aplica la esponja intravaginal (fuente exógena de progesterona). Esto conduce a una variación entre las ovejas en la duración de la secreción endógena de progesterona. Estas combinaciones de progesterona endógena y exógena dan lugar a una alteración de la dinámica folicular, evidenciando así una variación entre ovejas en el tiempo de aparición del estro tras la retirada de la esponja, y una alteración de los pulsos de secreción de LH. Esto significa que cualquier falta de sincronía entre estro y ovulación limitaría severamente la fertilidad (Leyva, V. y cols., 1998b). Además hay evidencia que al administrar progesterona exógena en los primeros días del ciclo estral se acorta la fase luteal (Woody 3

5 C.O. y cols., 1967; Ginther O.J., 1968; Thwaites C.J., 1971) lo que también podría tener consecuencias sobre la dinámica folicular, y por tanto sobre la fertilidad. Por tanto el objetivo del presente estudio fue comparar los niveles de fertilidad obtenidos en ovejas sincronizadas mediante esponjas intravaginales impregnadas con 60 mg de MAP o 30 mg de FGA, colocadas durante la fase folicular o luteal del ciclo estral más 500 U.I. de ecg. 2. MATERIAL Y MÉTODOS 2.1. Animales: Hembras El estudio se llevo a cabo durante los meses de abril y mayo de 2009, en la fase de transición hacia el periodo de anestro reproductivo. Se utilizaron un total de 373 ovejas de raza merino fleischaf, maduras sexualmente, clínicamente sanas, de edades comprendidas entre 3 y 5,5 años de edad y kg. de peso. Los animales pertenecían a una explotación ganadera de Fuente Palmera (37º42 N), población de Córdoba que mantenía un sistema intensivo. Se les proporcionaba pienso y forrajes de buena calidad Machos Se utilizaron 38 carneros, también de raza merino fleischaf, maduros sexualmente y de fertilidad probada, clínicamente sanos, de edades comprendidas entre 2,5 y 4,5 años y de kg. de peso Ecografía: Previo a la puesta de esponjas las ovejas fueron sometidas a una ecografía transrectal con un ecógrafo marca Aquila, Esaote-Pie medical, (Maastricht, Holanda) y un transductor de 8Mhz, para determinar a partir de las estructuras ováricas, la fase del ciclo estral en la que se encontraban (fase luteal o folicular). Por cada animal se almacenaron en la tarjeta de memoria del equipo ecográfico 3 imágenes, para su posterior análisis mediante un lector de tarjetas en ordenador con software Eview-Echo Image Viewer (Pie Medical Equipment B.V.). Se midieron los folículos y se anotó la presencia o no de cuerpos lúteos, clasificando de este modo las ovejas que presentaban CL y folículos de 4 mm. de diámetro en fase luteal y las que no presentaban CL y folículos 4 mm. de diámetro en fase folicular (Neal Schrick F. y cols., 1993). 4

6 2.3. Sincronización de celos: De las 373 ovejas iniciales se trataron 183 con esponjas intravaginales impregnadas con 60mg de MAP (Sincrogest, Laboratorios Ovejero, España) y 10 días después se trataron 190 con esponjas impregnadas con 30 mg de FGA (Sincropart, Ceva Salud Animal, España). Antes de insertar las esponjas, se trataron con antibióticos (Framicetina sulfato 40 mg; Sulfatiazol 960 mg, Laboratorios Ovejero, España) y posteriormente se procedió a limpiar cuidadosamente la zona perivulvar de las hembras. En ambos tratamientos las esponjas se dejaron en el fondo de la vagina de las ovejas durante 12 días, mediante un aplicador, que previamente se desinfectaba con una solución de povidona iodada (Betadine, Meda Pharma SAU, España) al 5%. Tras estos 12 días, se procedió a la retirada de las esponjas y a la administración vía intramuscular de 500 U.I de ecg Cubrición: Tras el retiro de las esponjas las ovejas fueron puestas con los machos durante 5 días, en una proporción de 5 a 1. Dos veces por día a intervalos regulares de tiempo se realizó observación visual del comportamiento de monta de los machos Diagnóstico de gestación: Transcurridos 28 días después de la separación de los machos, las ovejas fueron sometidas a un examen ecográfico transrectal con un ecógrafo marca Aquila, Esaote-Pie medical, y un transductor de 8Mhz Análisis de los resultados: Los niveles de fertilidad de las ovejas tratadas con esponjas impregnadas con MAP o FGA durante la fase folicular o luteal del ciclo estral fueron expresados en porcentajes, y analizados mediante un test Chi-cuadrado de Pearson. 3. RESULTADOS Después del examen ecográfico transrectal de los 373 animales y el posterior análisis de las imágenes, 112 (30,03%) animales se encontraban en fase folicular y 261 (69,97%) animales en fase luteal (Gráfico 1). La tasa de gestación para las ovejas tratadas con MAP durante la fase folicular fue de 67,50% y 69,15% para las tratadas durante la fase luteal. Para las ovejas tratadas con FGA la tasa de gestación fue 73,81% durante la fase folicular y 73,20% durante la fase luteal. No hubo diferencias significativas ni entre ni dentro de grupos. Tabla 1. 5

7 4. DISCUSIÓN En el presente estudio las proporciones de animales que se encontraban en fase luteal y folicular del ciclo estral (Imagen 1), están en relación a la distinta duración de las mismas (McCracken, John A. y cols., 1999). De este modo, el 69,96% de los animales se encontraban en fase luteal. Valores similares fueron informados con anterioridad (Bartlewski P.M. y cols., 2004) donde un 67% de las ovejas estudiadas presentaron cuerpo lúteo funcional. Ainsworth L. and Shrestha J.N.B. (1983) compararon el porcentaje de fertilidad total en ovejas cuyo celo fue sincronizado con esponjas impregnadas con 60 mg. de MAP y 40 mg. de FGA más ecg en época reproductiva, no obteniendo diferencias significativas entre los dos tipos de esponjas. Sin embargo, los porcentajes de preñez obtenidos fueron más bajos que los logrados en el presente estudio (57% para MAP y 53% para FGA). Posteriormente, Crosby, T.F. y cols., (1991) y Gordon I., (1997) trabajando con ovejas cíclicas que fueron sincronizadas con esponjas impregnadas con 60 mg. de MAP y 30 mg. de FGA más ecg obtuvieron porcentajes de fertilidad total comprendidos entre el 70% y el 80%. Recientemente, Ungerfeld R. y Rubianes E. (2002), obtuvieron tasas de gestación muy similares a las determinadas por el presente estudio, concretamente un 62,5 % para las ovejas que fueron tratadas con esponjas intravaginales impregnadas con 60 mg. con MAP y un 67,4% para aquellas que fueron tratadas con esponjas intravaginales impregnadas con 30 mg. de FGA. De manera similar al presente estudio, en todas estas publicaciones las cubriciones se realizaron por monta directa de machos de la misma raza. Como comentamos anteriormente, Leyva, V. y cols. (1998b) informaron que al aplicar la esponja intravaginal (fuente exógena de progesterona) cada oveja se encuentra en diferentes momentos del ciclo estral (fase folicular o fase luteal), por lo que existe una variación en la duración de secreción endógena de progesterona entre ovejas. Estas combinaciones de progesterona endógena y exógena dan lugar a una alteración de la dinámica folicular, lo que podría limitar la fertilidad. Sin embargo, Evans A.C. y cols., (2001) publican en un estudio en el cual sincronizaron el celo de ovejas mediante esponjas intravaginales aplicadas en el día 6 del ciclo estral (fase luteal) durante 14 días, porcentajes de gestación de entre el 80 y 86%, concluyendo que la fase luteal no repercute en la fertilidad. Contrariamente, Abecia J.A. y cols., (2002) sincronizando celo con esponjas intravaginales en animales en fase folicular, inicio y mitad de fase luteal, e inseminación artificial. Encontraron diferencias significativas en los porcentajes de fertilidad logrados. Siendo estos superiores en fase folicular respecto de la fase luteal. Esta diferencia de resultados estaría debida a las diferencias de niveles de progesterona endógena y el momento de inicio del tratamiento. Estas diferencias incrementan y modifican el número de ondas foliculares, el tamaño de los folículos y los pulsos de la LH. Estas alteraciones podrían producir una asincronía entre el estro y la ovulación. En este estudio, para compensar la posible asincronía entre estro y ovulación se incrementó el tiempo de permanencia de las hembras con los machos y de este modo no se 6

8 observaron diferencias de fertilidad en las ovejas tratadas en fase folicular y luteal con esponjas impregnadas con MAP o FGA. 5. CONCLUSIONES 1.- Al final de la etapa reproductiva de la oveja merina fleischaf, los niveles de fertilidad no se ven afectados tras un tratamiento de 12 días con esponjas intravaginales de MAP o FGA más ecg. 2.- La tasa de gestación no es afectada cuando el tratamiento de sincronización comienza en la fase luteal o folicular del ciclo estral de la oveja. 6.- BIBLIOGRAFÍA Abecia J.A., Forcada F., Zúñiga O., Valares J.A., The effect of progestagen treatment on sheep reproductive performance at different phases of the oestrous cycle. Anim. Res. 51, Ainsworth. L., Lachance, R. and Labrie, F., 1982/1983. Effects of progestagen treatments and PMSG on the induction of the preovulatory LH discharge in ewes. Anim. Reprod. Sci. 5, Ainsworth L. and Shrestha J.N.B., Effect of type of intravaginal progestagen treatment on estrous response and reproductive performance of ewes. Theriogenology 19, Bartlewski P.M., Aravindakshan J., Beard A.P., Nelson M.L., Batista-Arteaga M., Cook S.J., Rawlings N.C., Effects of medroxyprogesterone acetate (MAP) on ovarian antral follicle development, gonadotrophin secretion and response to ovulation induction with gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) in seasonally anoestrous ewes. Anim. Reprod. Sci. 81, Boland, M.P., Crosby, T.F. and Gordon, I., Effect of mating management and PMSG dose on lambing outcome in ewes bred in late anoestrus. J. Agric. Sci. (camb.) 91, Crosby, T.F., Boland, M.P., Gordon, I., Effect of progestagen treatments on the incidence of oestrus and pregnancy rates in ewes. Anim. Reprod. Sci. 24, Deweese W.P., Glimp H.A. and R.H. Dutt, Comparison of medroxyprogesterone acetate orally and in vaginal sponges for synchronizing estrus in ewes. J. Anim. Sci. 31,

9 Evans A.C.O., Duffy P., Crosby T.F., Hawken P.A.R., Boland M.P., Beard A.P., Effect of ram exposure at the end of progestagen treatment on estrus synchronisation and fertility during the breeding season in ewes. Anim. Reprod. Sci. 84, Evans A.C., Flynn J.D., Quinn K.M., Daffy P., Quinn P., Madgwick S., Crosby T.F., Bolan M.P., Beard A.P., Ovulation of aged follicles does not affect embryo quality or fertility after a 14-day progestagen estrus synchronization protocol in ewes. Theriogenology 56(5), Ginther O.J., Influence of exogenous progesterone and the uterus on ovarian activity in sheep. Endocrinology 83, Gordon, I., Controlled reproduction in sheep and goats. CAB International, New York. Hüseyin Timurkan and Hamit Yildiz., Synchronization of oestrus in hamdani ewes: the use of different PMSG doses. Bull Vet Inst Pulawy 49, Leyva V., Buckrell B.C. and Walton J.S., 1998a. Follicular activity and ovulation regulated by exogenous progestagen and PMSG in anestrous ewes. Theriogenology 50, Leyva V., Buckrell B.C. and Walton J.S., 1998b. Regulation of follicular activity and ovulation in ewes by exogenous progestagen. Theriogenology 50, McCracken, John A., Edward E. Custer, and Justin C. Lamsa., Luteolysis: A Neuroendocrine-Mediated Event. Physiol. Rev. 79, Neal Schrick F., Surface R. A., Pritchard J. Y., Dailey R. A., Townsend E. C. and Inskeep E. K., Ovarian structures during the estrous cycle and early pregnancy in ewes. Biology of Reproduction 49, Noël B., Bister J.L., Pierquin B. and Paquay R., Effects of FGA and PMSG on follicular growth and LH secretion in suffolk ewes. Theriogenology 41, Robinson, T.J., Conclusions. In: Robinson, T.J. (Ed.), The control of the ovarian cycle in the sheep. Sydney University Press, Sydney, pp Simonetti L., Blanco M.R., Gardón J.C., Estrus synchronization in ewes treated with sponges impregnated with different doses of medroxyprogesterone acetate. Small Ruminant Research 38, Thwaites C.J., Exogenous progesterone and estrous cycle length in the ewe. J. Agric. Sci. 77, Ungerfeld R., Rubianes E., Short term primings with different progestogen intravaginal devices (MAP, FGA and CIDR) for ecg-estrous induction in anestrus ewes. Small Ruminant Research 46, Woody C.O., First N.L., Pope A.L., Effect of exogenous progesterone on estrous cycle length. J. Anim. Sci. 26,

10 Zeleke M., Greyling J.P.C., Schwalbach L.M.J., T. Muller, J.A. Erasmus., Effect of progestagen and PMSG on oestrous synchronization and fertility in Dorper ewes during the transition period. Small Ruminant Research 56, FIGURAS, TABLAS E IMÁGENES Gráfico 1.- Número de ovejas que se encuentran en fase folicular y fase luteal del ciclo estral del rebaño estudiado Nº Animales FASE FOLICULAR 261 FASE LUTEAL Clasificación de las ovejas en fase folicular y luteal tras ecografía transrectal. Tabla 1.- Porcentajes de preñez obtenidos en ovejas tratadas con esponjas de MAP o FGA en fase folicular o luteal del ciclo estral. % Preñez MAP % Preñez FGA Total 68,66% 73,38% Fase Folicular 67,50% 73,81% Fase Luteal 69,15% 73,20% 9

11 Imagen 1. Distintos casos del estado ovárico según la fase del ciclo estral: a) Fase Luteal: Ovario (elipse blanca) con folículos <4mm y un cuerpo lúteo (círculo rojo). b) Fase Folicular: Dos ovarios (elipses blancas) con folículos de distinto diámetro (elipses verdes) y uno > 4mm (flecha roja). a) b) 8. ABSTRACT Commercial programs of estrus synchronization in ewes are performed with intravaginal sponges impregnated with synthetic progestagens such as medroxiprogesterone acetate (MAP) or fluorogestone acetate (FGA). Normally sponges are placed deep into vagina in cyclic females at different moments of the estrus cycle. The aim of the present study was to compare fertility levels in ewes with estrus synchronized using commercial sponges impregnated either with 60 mg of MAP (emap) or 30 mg of FGA (efga) placed during the follicular or luteal phase of the oestrus cycle plus 500 IU ecg. A total of 373 sexually mature Fleischaf Merino ewes belonging to the same herd aged between 3 and 5.5 years and clinically healthy were scanned by transrectal ultrasonography with 8 Mhz probe (Aquila, Esaote-Pie medical, Maastricht, The Netherlands) to visualize the ovarian status in the reproductive season. Therefore, ovaries without CL and follicles 4 mm were considered in follicular phase meanwhile ovaries with CL and follicles 4 mm were considered in luteal phase. Thus, estrus synchronization was performed in 183 ewes treated with emap (Sincrogest, Ovejero Lab, Spain) of which 54 were in follicular phase and 129 were in luteal phase. On the other hand, 190 ewes were treated with efga (Sincropart, CEVA Lab, Barcelona, Spain) of which 57 during follicular phase and 133 were in luteal phase. Sponges were removed in all females after 12 days and 500 IU of ecg (Serigan, Ovejero Lab, Leon, Spain) were given. Then ewes were placed joint with rams in a ratio of 5 to 1 until no signs of mount were detected. Twenty eight days after the withdrawal of males, pregnancy rates were determined by transrectal ultrasonography with 8 Mhz probe. Fertility levels of the synchronized estrus with emap or efga sponges during follicular or luteal phase are expressed as a proportion of ewes and were analyzed by Chi-square Pearson analysis. Significance was at level of P <0.05. After ultrasound scanning from the initial 373 ewes, 30,03% were considered in follicular phase meanwhile 69,97% were in luteal phase of the oestrus cycle. Overall pregnancy rate was 68,66% and 73,38% for emap and efga respectively. Pregnancy rate for emap treated ewes during follicular phase was 67,50% and 69,15% for treatments during luteal phase. Also for ewes treated with efga was 73,81% during follicular phase and 73,20% during luteal phase. No significant differences were found in pregnancy rates either for emap or efga treated ewes during follicular or luteal phase of the oestrus cycle or whit 500 IU ecg. In 10

12 conclusion these results suggest that at the end of breeding season fertility levels are not affected in Merino ewes whose estrus were synchronized with intravaginal sponges impregnated MAP or FGA. In addition pregnancy rates are not affected if the synchronization treatments begin during follicular or luteal phase of the oestrus cycle. 11