PROYECTO DE INVESTIGACION por Universidad Nacional del Callao se encuentra bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.

Transcripción

1 PROYECTO DE INVESTIGACION por Universidad Nacional del Callao se encuentra bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Perú. Permisos que vayan más allá de lo cubierto por esta licencia pueden encontrarse en DIRECCION CDCITRA Universidad Nacional del Callao Teléfono:

2 UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y DE RECURSOS NATURALES INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN-FIARN AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN MOLECULAR DEL CHAMPIÑÓN DE JARDINES PARA SU CULTIVO SOBRE GRAS RESIDUAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO. AUTOR: Blgo. CARLOS ODORICO TOME RAMOS PERIODO DE EJECUCIÓN: Del 01/12/2011 al 30/11/2013 Resolución Rectoral de Aprobación N R PERÚ-CALLAO-2013 PROYECTO DE INVESTIGACION por Universidad Nacional del Callao se encuentra bajo una Licencia Creative Commons Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Perú. Permisos que vayan más allá de lo cubierto por esta licencia pueden encontrarse en DIRECCION CDCITRA Universidad Nacional del Callao Teléfono:

3 Índice 1. INDICE 1 2. RESUMEN 4 3. INTRODUCCIÓN Planteamiento del Problema Importancia y Justificación 7 4. MARCO TEORICO Importancia Ecológica de los Macromicetes Macromicetes Comestibles Macromicetes Comestibles en el Perú Cultivo de Hongos Comestibles Cultivo de Hongos Comestibles en el Perú Importancia comercial del cultivo de champiñones en el Perú Fermentación liquida de Macromicetes Fermentación Líquida del Género Agaricus Macromicetes como Biorremediadores Estudios sobre el Agaricus campestris Caracteristícas fenotípicas del Agaricus campestris Aislamiento y Cultivo del Agaricus campestris Identificación Molecular de Microorganismos Identificación Molecular de Hongos Identificación molecular de Agaricus MATERIALES Y MÉTODOS Materiales Población Técnicas e instrumentos de investigación Técnicas de análisis Metodología Muestreo de ejemplares de hongos macroscópicos 52

4 5.5.2 Obtención de Cultivo puro de la seta muestreada Propagación del Micelio Producción de la semilla o blanco Elaboración del pre compost a base del gras residual Preparación del sustrato para la siembre de las semillas o blanco de la seta y evaluación del cultivo Identificación molecular de la seta RESULTADOS Del Muestreo Del cultivo Puro de la seta muestreada De la propagación del Micelio De la Producción de la Semilla o Blanco De la elaboración del Pre compost a base del gras residual Del cultivo de la seta hasta el Fructificado Primera experiencia sobre el cultivo de la seta Segunda experiencia sobre el cultivo de las setas Tercera experiencia sobre el cultivo de las setas Cuarta experiencia sobre el cultivo de las setas De la identificación a nivel molecular DISCUSIÓN REFERENCIALES APÉNDICE ANEXOS 104

5 II.- RESUMEN La seta comestible Agaricus campestris crece de forma natural en el césped de las áreas verdes o suelos de cultivo de Lima y Callao, por ello en el presente trabajo de acuerdo a los objetivos planteados se aisló una cepa sobre el agar Sabouraud glucosado modificado con extracto del gras residual, se proliferó para obtener el blanco o semilla sobre trigo o cebada y luego se sembró sobre un sustrato a base de los residuos de la poda del césped de los jardines de la Universidad Nacional del Callao y cultivado bajo condiciones ambientales del laboratorio de Microbiología de la FIARN/UNAC y, con el apoyo del laboratorio de Biología y Genética Molecular de la facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos se realizó la identificación a nivel molecular de la cepa aislada. Del cultivo sobre los sustratos a base del gras residual se realizaron en cuatro oportunidades, en las cuales sólo se logró la invasión del micelio pero no el fructificado del hongo y; en relación a la identificación, por las características fenotípicas y el Análisis filogenético de la secuencia 5,8S ribosómico corresponde a la especie Agaricus campestris con un 99.9% de identidad para la secuencia analizada. La cepa de hongo aislado e identificado molecularmente como Agaricus campestris se desarrolla sobre sustratos a base del gras residual de las áreas verdes de la Universidad Nacional del Callao bajo condiciones ambientales del laboratorio de Microbiología de la facultad de Ingeniería Ambiental y de Recursos Naturales pero sin llegar al fructificado del mismo. Palabras Claves: Setas, cepas, micelios, fructificado de setas, sustratos.

6 ABSTRAC The eatable mushroom Agaricus campestris grows naturally in the lawn of the green areas or farming s land of Lima and Callao, so in the following work according to the objectives, the strain was isolated on the glycoside Sabouraud agar modified with extract of the residual grass, it was proliferated in order to obtain the white or seed of wheat or barley; and then they were planted over a substratum based on the residues of the pruning of the garden s lawn of the National University of Callao. They were cultivated low environmental conditions of the Microbiology s laboratory of the FIARN/UNAC and, with the support of the Biology and Molecular Genetics laboratory of the college Medicine Veterinary of the National University of San Marcos; it was accomplished the identification in a molecular level of the isolated strain. Of the crops of substratum based on the residual grass were realized in four opportunities, in which only the invasion of the mycelium were accomplished but not the mushroom s bear fruit and; in relation with the identification, according to the phenotypical characteristics and the analysis phylogenetic of the consequence 5,8S ribosomal, it corresponds with the specie Agaricus campestris with a 99,9% of identity for the sequence analyzed. The isolated and identified molecularly as Agaricus campestris, mushroom s strain, is developed on substratum based on residual grass of the green areas of the National University of Callao low environmental conditions of the Microbiology s laboratory of the college Environmental Engineering and Natural Resources but without the accomplishment of the bear fruit of the mentioned strain or mushroom. Key Words: Mushroom, strain, mycelium, strain s bear fruit, subst

7