CATÁLOGO PRÁCTICAS. Material didáctico para prácticas de laboratorio. Prácticas: KIT DE INMUNODIFUSIÓN DOBLE (OUCHTERLONY)

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1 Material didáctico para prácticas de laboratorio Prácticas: KIT DE INMUNODIFUSIÓN DOBLE (OUCHTERLONY) KIT DE INMNUNODIFUSIÓN RADIAL KIT ELISA RC didac KIT ELISA INMNUDOTING IMD didac KIT DE ELECTROFORESIS EN ACETATO DE CELULOSA KIT DE CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD KIT DE CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA ASCENDENTE KIT DE INMUNOCROMATOGRAFÍA KIT DE DETECCIÓN DE ANTIBIÓTICOS ZEU-INMUNOTEC, S.L. C/ Bari, 25 dpdo Zaragoza (ESPAÑA) Tlf: (+34) Fax: (+34)

2 Página 2 CATÁLOGO PRÁCTICAS INMUNODIFUSIÓN DOBLE (OUCHTERLONY) INMUNODIFUSIÓN DOBLE Ref.:ZE/PR1K P.V.P. 119 La inmunodifusión doble es una técnica que permite la identificación cualitativa de antígenos. En un gel de agarosa tamponado, el antígeno y anticuerpo se cargan en pocillos perforados con anterioridad a 0,3-0,5 cm de separación. Después de una difusión de 12 y 48 horas, el reconocimiento del antígeno por el anticuerpo se detecta por la formación de una línea de inmunoprecipitación entre los pocillos. La inmunoprecipitación ocurrirá en algún lugar entre los pocillos siempre que se dé la reacción antígeno/anticuerpo en la zona de equivalencia. El objetivo de la práctica es el de realizar una inmunodifusión doble entre muestras de albúmina bovina y caprina y el suero anti-albúmina bovina. INMUNODIFUSIÓN RADIAL (MANCINI) INMUNODIFU- SIÓN RADIAL o MANZINI Ref.:ZE/PR2K P.V.P. 136 La inmunodifusión radial es una técnica que permite la cuantificación de antígenos. En esta técnica, el antígeno se aplica sobre unos pocillos practicados en geles de agarosa que contienen una concentración determinada del antisuero específico. El antígeno difunde a través del gel y reacciona con el antisuero hasta alcanzar la zona de equivalencia. En este punto aparecen precipitados antígeno-anticuerpo en forma de círculo concéntrico alrededor del pocillo. El diámetro del círculo formado es proporcional a la concentración de antígeno. Este aspecto cuantitativo es la principal ventaja de esta técnica. habitualmente, la inmunodifusión radial se utiliza para estimar la concentración de proteínas del plasma. Por ejemplo, IgGs o IgMs en pacientes sospechosos de padecer algunas gammaglobulinemias y mielomas múltiples respectivamente. El objetivo de la práctica es el de cuantificar por inmunodifusión radial la concentración de inmunoglobulinas en suero sanguíneo bovino.

3 Página 3 E.L.I.S.A.- RC-didac El ELISA es una técnica que permite la determinación cualitativa, semicuantitiva y cuantitativa tanto de antígenos como de anticuerpos. Éstos pueden ser detectados y cuantificados de forma rápida y específica y permite una gran flexibilidad de análisis:ensayos individuales, múltiples, manual o automático. Entre la diversidad de métodos ELISA desarrollados, una de las aplicaciones más extendidas es el método sándwich o de doble anticuerpo en placa microtiter. Un primer anticuerpo se inmoviliza en la superficie de los pocillos de la placa microtiter A continuación se añaden las muestras que contienen el antígeno que quedará atrapado por este primer anticuerpo. Las muestras se retiran y se añade el segundo anticuerpo que se une al antígeno formando un sándwich. Este segundo anticuerpo tiene una enzima unida que al añadir su sustrato producirá un producto coloreado. La intensidad de color del producto será proporcional a la cantidad de antígeno detectado que se cuantifica espectrofotométricamente. Las aplicaciones de los métodos de ELISA dentro del campo agroalimentario y medio ambiente son cada vez son más numerosas y variadas, para la detección de toxinas bacterianas (botulismo), hongos (micotoxinas), microorganismos patógenos, detección de adulteraciones, etc. Y en los laboratorios de bioquímica clínica para la medida de inmunoglobulinas, proteínas oncofetales y hormonas como la insulina, estrógenos y gonadotropina coriónica humana (test de embarazo). El objetivo de estas prácticas es cuantificar mediante la técnica de ELISA en placa microtiter, la concentración de IgGs en el suero sanguíneo. E.L.I.S.A.- Ref.:ZE/PR6K 6 meses P.V.P. 198 E.L.I.S.A.-INMUNODOTING El ELISA es una técnica inmunoquímica que permite la determinación cualitativa, semicuantitiva y cuantitativa de antígenos o anticuerpos. Los métodos ELISA se utilizan habitualmente para la determinación de residuos en alimentos, detección de adulteraciones como la adición de leche de vaca en leche de oveja, diagnóstico clínico para la determinación de inmunoglobulinas, proteínas oncofetales y hormonas como la insulina, estrógenos y gonadotropina coriónica humana (test de embarazo). Se denomina "inmunodot" a aquella técnica inmunoenzimática ("E.L.I.S.A.") que se realiza sobre una membrana. En esta práctica utilizaremos una membrana de nitrocelulosa sobre la que se fija un antígeno. Posteriormente se añade sobre la membrana el anticuerpo que reconoce específicamente a ese antígeno. Este anticuerpo tiene unida una enzima que al añadir su sustrato generará un producto coloreado. El objetivo de estas prácticas es detectar la presencia o ausencia de IgGs bovinas en varias muestras problema de suero mediante un ensayo inmunodot. E.L.I.S.A.- INMUNODOTING Ref.:ZE/PR5K 7 meses P.V.P. 115

4 Página 4 CATÁLOGO PRÁCTICAS ELECTROFORESIS EN ACETATO DE CELULOSA ELECTROFORESIS EN ACETATO DE CELULOSA Ref.:ZE/PR7K P.V.P. 121 El proceso de electroforesis reúne a un conjunto de métodos basados en la separación de biomoléculas aplicando un campo eléctrico. La electroforesis en acetato de celulosa es una de las técnicas electroforéticas más clásicas. Las muestras se aplican sobre una tira de acetato de celulosa cuyos extremos se sumergen en dos cubetas con tampón de electroforesis. Al aplicar un campo eléctrico, las muestras se separan en función de su carga dando unas bandas independientes que se pueden identificar después de la tinción de la tira. El objetivo de esta práctica es realizar una electroforesis en acetato de celulosa de una muestra de suero sanguíneo y de una muestra de albúmina bovina. CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD Ref.:ZE/PR8K P.V.P. 178 La cromatografía es una de las técnicas más comunes en la separación y purificación de una o varias moléculas biológicas de una mezcla. Los sistemas cromatográficos constan de dos fases. La elección de estas fases, móvil y estacionaria, se hace en función de las características de la mezcla a separar. La cromatografía de afinidad es un tipo de cromatografía de adsorción donde la fase estacionaria posee grupos funcionales que retienen de forma específica y reversible una molécula (proteínas, antígenos, anticuerpos; vitaminas...) La molécula retenida, separada de la mezcla, se eluye posteriormente en un medio adecuado. El objetivo de esta práctica es purificar la albúmina del suero sanguíneo mediante una columna de afinidad de azul de cibacrón que retiene específicamente a esta proteína.

5 Página 5 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA ASCENDENTE La cromatografía es una técnica de separación e identificación de sustancias químicas disueltas en un disolvente (fase móvil) que se mueve sobre una capa delgada de un adsorbente (fase estacionaria). La fase estacionaria está dispuesta en una fina lámina que está cubriendo un soporte de vidrio o plástico. La fase móvil depende del tipo de moléculas a separar, utilizándose disolventes o mezclas de disolventes de diferente polaridad. Las muestras se aplican en un extremo de la lámina de gel. A continuación, se coloca la lámina en posición vertical sobre un disolvente apropiado que ascenderá por capilaridad arrastrando las muestras. Las moléculas se separan y ocupan diferentes posiciones. Para poder observarlas mejor se utilizará un revelador que las coloree El objetivo de esta práctica es realizar la separación e identificación de los aminoácidos leucina, alanina y glicina mediante una cromatografía de capa fina ascendente. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA ASCENDENTE Ref.:ZE/PR9K P.V.P. 154 INMUNOCROMATOGRAFÍA La inmunocromatografía es una técnica inmunoquímica que permite la determinación cualitativa, sencilla y rápida de diferentes moléculas Cada vez son más las aplicaciones de esta técnica debido a que no es necesario reactivos ni instrumentación adicional. El ejemplo más conocido son los test de embarazo de las farmacias. El objetivo de esta práctica es determinar la posible adulteración de muestras de leche de oveja con leche de vaca mediante una inmunocromatografía. Este ensayo también permite detectar adulteración en queso. INMUNO- CROMATOGRAFÍA Ref.:ZE/PR10A aducidad: 12 meses P.V.P. 80

6 Página 6 CATÁLOGO PRÁCTICAS DETECCIÓN DE ANTIBIÓTICOS EN LECHE DETECCIÓN DE ANTIBIÓTICOS EN LECHE. TEST ECLIPSE Ref.:ZE/PR11A 9 meses P.V.P. 91 La detección de residuos de medicamentos veterinarios tiene una gran importancia debido a sus repercusiones en la Salud Publica, así como también sobre algunos procesos tecnológicos como en las fermentaciones (fabricación de quesos, yogures...). El uso de antibióticos en el tratamiento de procesos infecciosos del ganado está recomendado y es de uso generalizado en el control de enfermedades. Estos medicamentos pueden acumularse en tejidos animales o excretarse a través de la leche y pasar a la cadena alimentaria. En esta práctica utilizaremos un test para la detección cualitativa de inhibidores y antibióticos en leche cruda y tratada térmicamente a concentraciones superiores a los límites máximos de residuos permitidos (LMR). El kit esta basado en la inhibición del crecimiento microbiano,del Bacillus stearothermophilus. Los pocillos contienen un medio especifico con esporas del bacilo y un indicador ácidobase. Mediante la incubación de la muestra a 65ºC, las esporas germinan en ausencia de inhibidores acidificando el medio y provocando el viraje del color del indicador. El objetivo de la práctica es realizar un test de inhibición microbiana para la detección cualitativa de la presencia de antibióticos en leche.

7 Página 7 CONDICIONES GENERALES DE VENTA Los precios de tarifa no incluyen I.V.A. (21%). Gastos de envío incluidos en pedidos superiores a 325 Plazo aproximado de entrega: 15 días SERVICIO TECNICO Nuestro personal técnico atenderá todas las consultas que deseen realizarnos para conseguir un óptimo desarrollo de las prácticas. Alejandra González (Atención al cliente): pedidos@zeulab.com Tfno: Fax:

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