A qui diagnosticarem la grip? Diagnòstic ràpid de grip.

Transcripción

1 A qui diagnosticarem la grip? Diagnòstic ràpid de grip. MªAngeles Marcos Servicio Microbiología. Hospital Clinic de Barcelona

2 Mutaciones puntuales (deriva antigénica)/ Cambios antigénicos mayores

3 Cuándo hacer Diagnóstico Virológico Confirmación de los primeros casos de un brote Pacientes enfermedades base, embarazadas Pacientes vacunados Casos graves y complicaciones Pacientes hospitalizados CON URGENCIA

4 No es necesario hacer pruebas a todos los pacientes con signos y síntomas de influenza para tomar decisiones sobre el tratamiento. Una vez documentada la actividad de la influenza en la comunidad o en la zona geográfica, se puede realizar un diagnóstico clínico de la influenza para pacientes ambulatorios con signos y síntomas coherentes con sospechas de influenza, especialmente durante períodos de picos máximos de influenza en la comunidad. La decisión de administrar antivirales para el tratamiento de la influenza o quimioprofilaxis, si está indicada, debe basarse en factores clínicos sobre la enfermedad y la epidemiología, y no se debe demorar el comienzo del tratamiento a la espera de los resultados de las pruebas.

5 Annals of Emergency Medicine 2013 Pacientes de Alto Riesgo con ILI en Urgencias El método óptimo (coste-eficacia) de diagnóstico y tratamiento depende de la prevalencia de influenza: prevalencia 3%-7%: PCR rápida de gripe prevalencia > 7% : no PCR. Tratamiento a todos

6 PRUEBAS DIAGNÓSTICAS PRUEBAS DIAGNÓSTICAS

7 No urgente Segumiento H. dia Hospital Clínic

8 RECOGIDA de MUESTRAS En los 3 primeros días del inicio de síntomas MUESTRAS RESPIRATORIAS: Frotis naso-faríngeos (células) Lavados nasofaríngeos (niños) Lavados broncoalveolares (graves) MEDIO de TRASPORTE especial para virus Guardar a 4ºC No descartar v. influenza en pacientes con neumonía con muestras nasofaríngeas negativas Thorpe C. BMJ 2009

9 Serología Cultivo DIAGNÓSTICO Detección Antígeno Métodos Moleculares Métodos de referencia para confirmar infección por v. influenza: PCR o cultivo celular

10 CULTIVO CELULAR Los virus son intracelulares obligados Crecimiento in vitro en líneas celulares (MDCK, SIAT) Efecto citopático (3-10 d) + IF/PCR Laboratorios de referencia Virus viable

11 DETECCIÓN de ANTÍGENOS

12 DETECCIÓN de ANTÍGENOS Técnicas de: Inmunofluorescencia, inmunocromatografía y enzimoinmunoanálisis VENTAJAS: Rapidez LIMITACIONES: Sensibilidad (30-75%) Tipo de virus / Tipo de técnica Niños > Adultos Tipo de muestra Inf.vias resp altas > neumonía Inicio de síntomas Un resultado negativo no descarta la infección por V.influenza

13 DETECCIÓN de ANTÍGENO: inmunofluorescencia Anticuerpos monoclonales Microscopio fluorescencia Rápido (2 horas) Gripe y otros virus respiratorios Sensibilidad limitada (40-70%) Importancia calidad de muestra Experiencia de quien lo hace y mira

14 DETECCIÓN de ANTÍGENO: RIDT

15 DETECCIÓN de ANTÍGENO: RIDT Resultado en min, facil interpretación, fácil utilización. Detecta influenza A / B (no subtipo) Sensibilidad: Si un 50-70% resultado negativo va a condicionar el manejo del paciente: necesita confirmación (RT- PCR). Especificidad: 90-95% Su valor predictivo depende de la PREVALENCIA Prevalencia alta: VPP alto, VPN bajo Prevalencia baja: VPP bajo, VPN alto Técnica de screening, point-of-care En: - Durante epidemia - No disponibilidad de laboratorio

16 MÉTODOS MOLECULARES

17 TÉCNICAS MOLECULARES Permiten identificar RNA del v. influenza VENTAJAS Alta Sensibilidad y Especificidad(>90%) Cada vez vez más rápidas (0.20h-8h) y fáciles de utilizar. Detección de virus influenza A/B Subtipar virus influenza A (H1N1pdm09, H3N2, H1N1s, ) Detección de virus nuevos LIMITACIONES Cambios antigénicos, revisión técnicas (primers/sondas). No siempre indica viabilidad del virus Precio VGA no subtipadas SECUENCIACIÓN

18 PCR +, en el SEGUIMIENTO del paciente?? No Evolución clínica del paciente Limitada utilidad: un resultado positivo no indica viabilidad CONFIRMACIÓN Cultivo PCR-cuantitativa MALA EVOLUCIÓN: secuenciación

19 TÉCN. MOLECULARES de DETECCIÓN MÚLTIPLE >4-8 horas

20 MÉTODOS MOLECULARES de DETECCIÓN RÁPIDA (<1 h). FDA

21 Alere TM i NAT Flu A/B FUNDAMENTO VIRUS MUESTRAS TIEMPO OTROS Amplificación isotérmica Influenza A/B Escobillones (m.trasporte) < 25 min Cualitativo Sensib >70% Especif >95%

22 FUNDAMENTO VIRUS MUESTRAS TIEMPO OTROS PCR a tiempo real (TaqMan) Influenza A/B Escobillones NF 20mim Cualitativo Sens/Esp>90%

23 Cepheid Xpert Flu/RSV Assay FUNDAMENTO VIRUS MUESTRAS TIEMPO OTROS PCR a tiempo real Influenza A/B V. Resp sincitial Escobillones, aspirados, lavados 1 hora Semicuantitativo Sensib/Especif >90%

24 PlosOne 2016 Tiempo de respuesta disminuye en urgencias: 9.1h Tiempo de aislamiento en pac hospitalizado: 23.7 h Disminución en el tratamiento con antivirales Disminución en el tiempo de exposición a otros pacientes u personal Disminución costes

25 Trabajo coordinado entre clínico y Microbiólogo