Practica 2. BOMBEO DE PROTONES

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Roberto Miranda Quintero
hace 6 años
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1 UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS EXTENCION OCOZOCOAUTLA Practica 2. BOMBEO DE PROTONES Docente: Ana Olivia Cañas Urbina Integrantes: Gómez Martínez Yadira López Cameras Jorge Luis Ovando Gómez Valeria Semestre: 4 Ocozocoautla de Espinoza, Chiapas. 26 de Agosto de 2015.

2 INTRODUCCION Las levaduras son hongos microscópicos (unicelulares) son importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos cuerpos orgánicos. (Tortora, 2007) Las levaduras utilizan diversas fuentes de carbono como los aminoácidos, los carbohidratos, además de cierta acción por parte del nitrógeno y de algunas vitaminas. De la segunda fuente se pueden mencionar a la glucosa, fructosa, galactosa y manosa; la maltosa y la sacarosa. El metabolismo energético es la base de las funciones celulares. Una adecuada transferencia de electrones a través de una serie de reacciones de óxido reducción, garantiza la obtención de sustratos energéticos necesarios para el óptimo funcionamiento de las células. Para su funcionamiento las células requieren de energía bioquímica (ATP) la cual consiste en oxidar o fermentar la glucosa y así obtener energía para la célula, lo cual se le conoce como glucolisis, y de una fuente de potencial reductor (NADPH2 ó NADH2). El uso intensivo de ambas permite obtener el gran nivel de organización y estructura que caracteriza a los organismos. La síntesis de ATP y potencial reductor se acopla al metabolismo energético de las células, es decir, depende de la fotosíntesis y la respiración. En particular la generación de ATP requiere de la actividad de una clase especial de proteínas asociadas a membranas llamadas bombas de protones, cuya función es transportar protones (H+) hacia volúmenes específicos de las células. Esta actividad crea un gradiente de concentración de H+ lo bastante extenso como para establecer un diferencial de potencial que produce energía libre capaz de desarrollar trabajo (Campbell, 2007) 1

3 OBJETIVO Relacionar el consumo de glucosa con los cambios de ph producidos por las levaduras. MATERIAL Se utilizó: Tres vasos de precipitado de 100 ml, Pipetas de 5 y 10 ml, Potenciómetro, levadura, (200 mg/ml. Solución de glucosa (10%) para una concentración final de 1%. y agua destilada. MÉTODO Diluir 5 ml de la levadura con 40 ml de agua destilada. Determinar el ph de la solución y repetir la medición dos veces más con intervalos de 3 minutos para obtener la línea basal. Adicionar 5 ml de glucosa a 10 %, agitar y medir el ph. Determinar el ph de la solución cada 5 minutos 4 veces, y luego cada 10 minutos 2 veces más. Recuperado de: Manual de prácticas de laboratorio. Bioquímica. Facultad de Medicina. UNAM. URL: ttp:// 2

4 DIAGRAMA EXPERIMENTO 1 (CONTROL) Diluir 5ml de Levadura con 40 ml de agua destilada Determinar ph de la solución. Adicionar 5 ml de Glucosa al 10% Agitar y medir el ph Repetir medición dos veces más con intervalos de 3 minutos Determinar ph Cada 5 min por 4 veces, y Luego cada 10 min dos veces más. 3

5 ph UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS RESULTADOS ph :34, 5 11:37, 5 11:40, 5 11:41, :46, 4 11:51, :56, :06, :16, :31 11:38 11:45 11:52 12:00 12:07 12:14 12:21 Tiempo 11:34 11:37 11:40 11:41 11:46 11:51 11:56 12:06 12:16 SIMBOLOGÍA SOLUCIÓN COLOR Levadura Levadura + glucosa 1 Levadura + glucosa 2 TIEMPO ph 11: : : : : : : : :16 3.5

6 DISCUSIÓN DE RESULTADOS Los cambios de ph que se presentaron son debido a la ATPasa tipo P bombea K+ y protones en la membrana plasmática, bombea estos últimos del citosol hacia afuera de la célula estableciendo una diferencia electroquímica hasta 2 unidades de ph que es lo que se pudo observar. Los protones fueron transportados y eso logro el cambio de ph en la levadura. La universidad Icesi en el 2012 dijo: Cuando los hidrógenos aumentan su concentración en la parte externa de la membrana mitocondrial interna, reducen significativamente el ph de esa zona y aumentan el de la cara interna. La energía electroquímica que reside en este gradiente se convierte, debido a la tendencia de los protones de migrar hacia la cara interna para equilibrar el ph, en energía mecánica cuando los protones se incorporan a la ATP sintetasa, produciendo un movimiento giratorio. Pero también esto se debe a compuestos desacoplantes y compuestos inhibidores, Los compuestos desacoplantes actúan contribuyendo a la normalización del ph, permitiendo la continuidad de la cadena de transporte electrónico pero evitando la síntesis de ATP. Los compuestos inhibidores, en cambio, se desempeñan como oxidantes o como reductores al aceptar o liberar electrones en la cadena de transporte electrónico, por lo que son responsables de capturar la energía destinada al tránsito de los protones hacia la cara externa de la membrana mitocondrial interna, De esta manera evitan la formación del gradiente de concentración.

7 CONCLUSIÓN Saber cómo funcionan las enzimas y como estas nos ayudan a mediar ciertas reacciones de nuestro metabolismo es importantes, ya que muchas de esas funciones han ayudado a la ciencia a descubrir nuevas tecnologías para inhibir patologías que se llegan a provocar por alguna falla de estas. En la operación interna de varias enzimas, la célula mantienen una concentración de H+, por ellos, diferentes autores han tratado de atribuirle un papel predominante a la bomba de protones, en el control de ph interno, sin embargo la función de la bomba de protones como reguladora del ph aun no es muy clara, Jaramillo (2007) dice que por un lado es predominantes la participación de ATPasa para mantener una grande diferencia en el ph, pero no la misma bomba estaría a cargo del ph, pues más allá de esto se explica que hay mecanismo propios del metabolismo que son capaces de liberar o consumir una buena cantidad de protones que hacen regular el ph de la célula aun cuando la bomba de protones sea inhibida. El mecanismo de la bomba de protones por parte de la ATPasa en levadura da lugar no solo a que no se acidifique si no al contrario, en presencia de glucosa, sea más alto, dando lugar a una alcalinización, resulta pues, que la ATPasa funciona más como la responsable de los cambios y no de la reguladora de ph. 1

8 BIBLIOGRAFÍA Campbell. (2007). Biologia. Buenos Aires: Panamericana. Tortora. (2007). Introduccion a la microbiologia. Buenos Aires: Panamericana. Universidad Icesi.(2012).Bombeo De Protones En Levaduras Y Sus Procesos Inhibitorios.Santiago de Cali, Colombia.Extraido de: Levaduras-y/ html Jaramillo M. L: et al (1999). mecanismos de patogenicidad y adherencia de Pausterella haemolytica. Revista Latinoamericana de Microbiología, 41,

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