VALIDACIÓN DE PRUEBAS DE TAMIZAJE Y CONTROL DE CALIDAD
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- Elisa Toro Pérez
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1 VALIDACIÓN DE PRUEBAS DE TAMIZAJE Y CONTROL DE CALIDAD Sección VIH y Hepatitis Unidad Central de Referencia para la Vigilancia Epidemiológica Laboratorio Nacional de Salud
2 VALIDACIÓN La validación de procedimientos se realiza cuando se pone en marcha una técnica analítica. Su objetivo es garantizar que los métodos cumplen determinados criterios, en términos de precisión, exactitud, etc. adecuadas a la aplicación que se le quiere dar.
3 Validación de pruebas Tanto la OMS como CDC recomiendan la validación local de pruebas rápidas de forma periódica, con la consiguiente actualización del algoritmo diagnóstico que permita ajustarse a los cambios de la epidemia en los países. En Guatemala, como primer paso en el 2012, el LNS en conjunto con el PNS, con la asistencia técnica de la UVG, realizaron la primera fase de la validación local de pruebas rápidas tomando en cuenta las marcas comerciales disponibles en el país al momento.
4 Validación de pruebas / 2 El aseguramiento de la calidad es uno de los principales retos que se tiene al utilizar algoritmos basados en pruebas rápidas, considerando la diversidad de los sitios que realizan dichas pruebas (hospitales, centros de salud, etc.) Para solventar este reto, un sistema de aseguramiento externo de calidad y la estandarización de los registros, son algunas de las principales herramientas utilizadas para el constante monitoreo del desempeño de los sitios
5 En vista de los temas mencionados previamente, el LNS junto con el PNS, con apoyo de la UVG y URC en su calidad de implementadores del CDC, proponen la realización de una evaluación piloto en 3 componentes: Validación en campo de pruebas rápidas para el algoritmo diagnóstico de VIH Libro de registro para dx de VIH Paneles de proficiencia (MST)
6 Objetivo General Fortalecer la calidad de diagnóstico de VIH a través de la estandarización de los procedimientos de la validación en campo de las pruebas rápidas, libro de registro para diagnóstico de VIH y paneles de proficiencia (MST) en seis servicios de salud durante el año 2015
7 Algoritmo diagnóstico de VIH para población general Muestra 1 prueba Reactiva No reactiva Reactiva 2 prueba No reactiva Resultado NEGATIVO Resultado POSITIVO INDETERMINADO 3 prueba Reactiva No reactiva Resultado POSITIVO Resultado NEGATIVO
8 Secuencia a validar en campo
9 Desempeño de Pruebas Rápidas Numerosos estudios han demostrado que el desempeño de las pruebas rápidas es comparable a los métodos estándar como ELISA 3ra Gen. y Western blot pacientes con la infección establecida cohortes de pacientes recién infectados, evaluados en intervalos regulares durante el período de seroconversión
10 10 Detección del VIH en diferentes etapas por pruebas diagnósticas SÍntomas AntÍgeno p24 ARN VIH VIH ELISA* Western blot Semanas post-infección After Fiebig et al, *3 rd generation, IgM-sensitive EIA AIDS 2003; 17(13): *2 nd generation EIA *viral lysate EIA
11 Ventajas Aumento en la cantidad de personas que conocen su estatus Incrementa el acceso a la prevención e intervenciones Entrega de resultados a un mayor número de personas Menor dependencia de los servicios de laboratorio centralizados La mayoría no necesita de refrigeración Mínima destreza técnica
12 Desventajas Se pueden correr pocas pruebas a la vez El aseguramiento de la calidad/control de calidad en múltiples sitios El procedimiento es diferente dependiendo de la marca Variación en la lectura e interpretación de resultados
13 Diagnóstico de sífilis en el país Servicios sin capacidad de laboratorio Nota: Se refiere a servicios que no cuentan con equipo, infraestructura y/o personal capacitado para procesar pruebas de laboratorio.
14 Servicios con capacidad de laboratorio Este mismo algoritmo aplica para mujeres embarazadas
15 CONTROL DE CALIDAD
16 Por qué el Aseguramiento de Calidad? Para satisfacer el continuo incremento en la necesidad de realizar pruebas en países con bajos recursos, se ha ido reemplazando el uso de Ensayos Inmunoenzimáticos por Pruebas Rápidas Bharat S. Parekh, PhD,1. Scaling Up HIV Rapid Testing in Developing Countries. Comprehensive Approach for Implementing Quality Assurance. Am J Clin Pathol 2010
17 Por qué es importante la calidad? Asegura que el resultado correcto es entregado al cliente correcto Provee mecanismos para prevenir, detectar y corregir errores Reduce costos
18 Calidad en Pruebas Rápidas Fase Pre analítica Kits en buenas condiciones Recolección adecuada de muestras Muestras almacenadas correctamente Fase Analítica Métodos estandarizados Resultados exactamente interpretados Fase Post analítica Resultados registrados y reportados
19 Control de Calidad Programa que tiene como propósito asegurar la confiabilidad de las pruebas analíticas llevadas a cabo en la muestra de un paciente Componente esencial de todo laboratorio exacto y fiable Detecta, evalúa y corrige errores
20 Calidad en las pruebas Obtener resultados exactos en un periodo de tiempo razonable Kits de prueba y materiales disponibles Kits de pruebas en buenas condiciones Especímenes colectados de manera apropiada (tipo y cantidad) Especímenes manejados correctamente Procedimientos operativos estándar cumplidos Resultados correctamente interpretados, registrados y reportados
21 Garantía de la Calidad (GC) Bioseguridad Control de Calidad (CC) Evaluación Externa de la Calidad (EEC) Mantenimiento de registros Otros Pruebas de Proficiencia (PC) Re-análisis de Muestras (Re-testeo) Visitas al centro Tipo de muestra: Suero Plasma DBS MST
22 Evaluación Externa de la Calidad EEC Describe métodos que permiten la comparación de las pruebas de laboratorio por una fuente externa. Controles de estado serológico conocido proporcionados por una fuente externa
23 Beneficios de participar en EEC Permite la comparación del desempeño y los resultados de diferentes sitios de prueba Provee alertas tempranas para los errores sistemáticos asociados a los kit de pruebas u operadores Indica áreas que necesitan ser mejoradas Identifica necesidades de capacitación Asegura a los usuarios que los resultados obtenidos en el laboratorio son confiables
24 Tipos de EEC Re análisis de muestras (supervisión indirecta) Supervisión Directa (en el sitio) Paneles de proficiencia
25 Re análisis de muestras Se envía al laboratorio de referencia el 10 % de todas las muestras negativas y el 100 % de las positivas Ventajas: Confirma los resultados positivos Desventajas: Envío de material bioinfeccioso hacia el laboratorio de referencia Puede incrementarse la carga de trabajo para el laboratorio de referencia
26 Supervisión Directa Visita al sitio donde se realizan las pruebas por parte del personal del laboratorio de referencia. Ventajas: Permite la evaluación directa de aspectos que puedan afectar el desempeño de las pruebas Desventajas: Costo Personal suficiente y capacitado por parte del laboratorio de referencia.
27 Paneles de proficiencia Más empleado El laboratorio de referencia envía muestras desconocidas en intervalos regulares a los laboratorios participantes, éstos analizan las muestras y envían los resultados obtenidos Se realiza el análisis de los resultados y se emite un informe Se toman decisiones para mejorar o mantener la calidad del desempeño
28 Muestra seca en tubo (MST) Concepto nuevo, práctico, simple, costo-eficaz Fácil de preparar Estable a temperatura ambiente (25 C) durante 3-4 semanas Puede ser transportado fácilmente, ya que no requiere cadena de frío, ni hay riesgo de derrames El panel puede realizarse en el país, por lo que es más barato, al igual que su transporte
29 Panel de MST
30 Preparación y pruebas con MST 1. Añadir colorante verde al suero o plasma (conc.final 0.1%) 2. Poner 20 µl de muestra/tubo (con 0,1 % de colorante verde) 3. Dejar secar por la noche a temperatura ambiente 4. Tapar y almacenar a temperatura ambiente Sedimento seco Mezclar y úselo para realizar la prueba rápida del VIH o inmunoanálisis Mezclar y dejar reposar durante la noche para rehidratar Para la prueba: Añadir 7 gotas (~ 200 µl) de PBS/Tween 20 (amortiguador para PC)
31 Hoja de instrucciones para la preparación del panel de proficiencia de VIH
32 Reporte de Resultados
33 Beneficios CCE de las pruebas rápidas de VIH garantiza que los resultados ofrecidos al paciente son correctos Evalúa el desempeño del personal Detecta y corrige errores Reducción de costos (preparación en el país del panel, transporte) No hay riesgo de derrame al transportar el panel
34 Garantía de la Calidad (GC) Bioseguridad Control de Calidad (CC) Evaluación Externa de la Calidad (EEC) Mantenimiento de registros Otros Pruebas de Proficiencia (PC) Re-análisis de Muestras (Re-testeo) Visitas al centro Tipo de muestra: Suero Plasma DBS MST
35 Cuáles son los registros actuales? A menudo inconsistentes o inadecuados No proporcionan información clave que se utiliza para identificar problemas nombre del kit de prueba y número de lote información sobre el responsable del análisis resultados de las pruebas individuales
36 Por qué es importante mantener registros adecuados? Supervisa la calidad de las pruebas Contabiliza el número de pruebas realizadas Determina los suministros necesarios
37 Claves para un buen mantenimiento de registros Comprender la información que está siendo registrada Asegurar que la información es registrada cada vez que el procedimiento es realizado Asegurar que toda la información requerida por cada paciente es registrada La información es documentada cada vez de la misma manera Confidencialidad
38 Libro de registro para el diagnóstico de VIH
39
40
41 GRACIAS.
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