1) Práctica privada, Aguascalientes (México) 2) Práctica privada, San Miguel de Allende. Guanajuato (México)

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1 REPRODUCCIÓN ASISTIDA EN GANADO DE LIDIA.- 1 Raquel Patrón Collantes, 2 Téllez H, J.R 1) Práctica privada, Aguascalientes (México) 2) Práctica privada, San Miguel de Allende. Guanajuato (México) La Inseminación Artificial (IA) en ganado de lidia, comenzó a aplicarse en México antes que en España. Fue D. Luis Obregón Santacilia, ganadero muy querido en el medio, y D. Antonio Obregón su hijo, quien estudió en los Estados Unidos la técnica de recolección de semen y durante los años 60 comenzó a aplicarla en México, e incluso llego a tener la ganadería más grande del mundo con 5000 cabezas de ganado. En aquel tiempo la realizaba en un rústico laboratorio, en su hacienda de San Juan Pan de Arriba, en el municipio de San Diego de la Union, Gto. Él mismo colectaba semen fresco que conservaba frio, para inseminar, de forma casi inmediata, aquellas vacas que detectaba en calor. (Información proporcionada al Dr. Julián Rolando Téllez Hoyos por Antonio Obregón hijo de D. Luis Obregón- y por el ganadero Jose Chafik Hamdam) LA INSEMINACIÓN ARTIFICIAL. Entre los ganaderos ha existido un prejuicio injustificado para la práctica de la inseminación artificial en ganado bravo. Sin embargo, las desventajas que presenta la técnica, pueden considerarse ínfimas si tenemos en cuenta las innumerables ventajas que este método ofrece. Ventajas de la técnica: La inseminación artificial en el ganado de lidia, ofrece una mejora genética de la ganadería, beneficiando en mucho el progreso de la misma. Esto es debido a que posibilita la inseminación de vacas con semen de toros de reconocida calidad genética, que en la mayoría de los casos no se posee y que sería imposible o demasiado costoso adquirir. Sin embargo y aunque el avance genético que se obtiene utilizando las técnicas de reproducción asistida, en ganado de leche o carne, son indiscutibles, en el ganado de lidia se tiene poco progreso y la mejora es lenta por la poca aceptación del ganadero en los programas modernos de reproducción. La principal razón que ofrece el ganadero son los altos costos frente al aumento moderado de la fertilidad. Es un seguro de vida de sementales excepcionales, ya que permite preservar sus genes, aún después de su muerte, siempre que se mantenga adecuadamente congelado. De esta forma, pueden utilizarlos años después en sus nietas y bisnietas, mediante un programa inteligente de cría en línea, evitando caer en la consanguinidad excesiva. Puede utilizarse semen de toros que se encuentran a largas distancias. Una sola extracción de semen permite crear varias dosis, con las cuales se puede inseminar a más vacas que con monta natural. Mayor control sanitario, ya que se pueden controlar muy efectivamente la transmisión de enfermedades venéreas. (brucelosis, leptospirosis, IBR, DBV, tricomoniasis, etc). Permite adelantar pruebas de progenie con un número grande de toros que no hay necesidad de conservar, si se le ha congelado un número suficiente de pajuelas. Es posible

2 obtener semen de toros de muy buena reata, conservarlo hasta ver su lidia y utilizarlo o no de acuerdo a los resultados. Desventajas de la técnica: Como expuse anteriormente, el principal argumento del ganadero es que la fertilidad es baja, y que los costos de llevar a cabo un programa de reproducción asistida son altos. Es cierto que con la IA, la fertilidad es más baja si la comparamos con la monta directa. Sin embargo, en la realidad hay ganaderías que con monta directa consiguen una fertilidad inferior al 40%. De la misma forma, de seguir al pie de la letra las recomendaciones para el éxito de un programa de reproducción asistida, la fertilidad puede llegar al 60%. Por otra parte, las técnicas usadas no son específicas para el ganado bravo en lidia. Debido a las características propias de las ganaderías y a su emplazamiento, los avances se producen en algunas ganaderías, pero no en todas. Es por ello que la aplicación de programas reproductivos de IA para grupos de ganaderos, son viables desde el punto de vista económico, productivo y genético. Son las ganaderías las que deben adaptarse a la técnica y no viceversa, por ello, algo de extrema importancia es tener un buen control de la alimentación, sanidad, manejo y personal, con vacas muy bien nutridas que desarrollen ovarios grandes. De no ser así, no hay buenos resultados en IA. Es necesario conocer todo lo relativo a cambios hormonales, ovulación, nutrición, sincronización, para hacer estandarizar y aplicativas las técnicas. Existe un cierto número de vacas que presentan ciclos irregulares o becerras con defectos de conformación del tracto genital (cuello muy estrecho), y por lo tanto, no se prestan para el desarrollo de un plan de este tipo. Por esta razón es recomendable introducir siempre al programa de Inseminación a Tiempo Fijo (IATF) vacas multíparas, pero no viejas. Particularidades de la técnica en ganado de lidia: Se encuadra a las vacas de lidia dentro de los bovinos de extensivo, pero son claramente diferentes a los bovinos en general. Las características reproductivas, tanto comportamentales como anatómicas de la vaca de lidia, son totalmente diferentes a otras debido a sus interacciones sociales, con el medio ambiente y manejo. Anatómicas: Cuello uterino de mayor longitud Inexistencia de cuerpo uterino: útero bipartito. Ovarios más pequeños comparados con una holstein o ganado europeo. Mayor tamaño del infundíbulo, que rodea gran parte del ovario.

3 El hecho de que existan estas diferencias, hace necesario cambiar la forma de trabajo: - Asegurar la entrada del catéter de IA en el útero, por su longitud. - Verificar la ovulación en el ovario para la deposición del semen, por ser bipartito. Comportamentales: Mayor rusticidad. Se dan a la carrera para evitar a sus depredadores. Recorren largas distancias para buscar alimentos. La reproducción en la ganadería de lidia se encuentra condicionada por una serie de factores que pueden afectar tanto al semental como a las vacas de vientre y que determinan la fertilidad en la misma. Entre otros se pueden destacar el estrés derivado del manejo, la sanidad, el hábitat y la alimentación, asi como la selección a la han sido sometidos los progenitores. Es por esto que diferentes técnicas reproductivas que se aplican en otras razas de bovinos no dan resultados y provocan que el ganadero de lidia, descarte su aplicación. 1. Raza Aumenta: Disminuye: Pubertad temprana (12 m VS 15 m en carne) Fertilidad relativamente alta. Gestación más corta ( d VS d) Estacionalidad. Anestro postparto. Celo más corto (6-10 h Vs 12-16h) 2. Ambientales y nutricionales El fotoperiodo, la temperatura y la pluviometría, influyen en la estacionalidad. Del mismo modo, es importante tener en cuenta que nunca deben existir deficiencias nutricionales graves. Por lo tanto, se recomienda administrar una alimentación adecuada a base de alfalfa achicalada, avena, alimento concentrado y un suplemento vitamínico mineral con una buena fuente de fosforo. 3. Manejo. - En las 3 semanas previas debe aplicarse fósforo y vitaminas ADE, desparasitar y hacer una buena revisión de la matriz y ovarios (con ultrasonido si es posible). - Es recomendado hacer un manejo lo más tranquilo posible del ganado sometido al programa. Para lograrlo se requiere de un cajón de contención adecuado donde la vaca será inseminada y por donde se le hará pasar varias veces para acostumbrarla. No deben ser lazadas y es preferible el uso de cabestros o meter delante de ella una vaca mansa. - Es conveniente alojarlos en un lugar cercano al destinado a la inseminación, de manera que se acostumbren a los sonidos de la personas que las van a manejar.

4 4. Ciclo reproductivo. - Poliéstricas estacionales Estro: 6-10 h Metaestro: 3 d Diestro: d Proestro: 2-3 d - Es necesario considerar que después del parto se producen anormalidades en el ciclo. 5. Enfermedades infecciosas y parasitarias. - Infecciones bacterianas y víricas, como brucelosis, listeriosis, leptospirosis, IBR, BVD, etc, suponen una pérdida económica y sanitaria. 6. Factores genéticos. - De gran interés por el sistema de selección, ya que un gran porcentaje está basado en producción de líneas consanguíneas. - La consanguinidad se asocia a una disminución del rendimiento y su capacidad reproductiva. - Las alteraciones de la fertilidad de un macho no son tan frecuentes como las de las hembras; pero económicamente son mucho más importantes y difíciles de detectar en el caso de la subfertilidad. Criterios para selección de vacas: La selección de las vacas que van a ser inseminadas, y los requerimientos para tener buenos resultados podían sintetizarse de la siguiente manera: 1. Vacas con historial de buena fertilidad 2. En el caso de terneras, deben tener buen desarrollo corporal y 2 años y medio de edad mínimo. En las vacas multíparas es preferible que no tengan becerro amamantando, o que esté casi al destete (7 meses) Es fundamental para la IA y disminuir el estrés, tener en cuenta el momento de ovulación espontánea. Sin embargo, en ganado de lidia no se ha estudiado todavía, lo que podría ser una causa de la baja fertilidad obtenida con IA. INSEMINACIÓN OPORTUNA DE LAS VACAS. La ovulación ocurre al terminar el celo, dentro de las 6-18 horas del cese de los síntomas de celo, siendo un promedio de 14 h. por ello, para obtener mejores resultados en la IA, las vacas deben inseminarse al final del celo o poco después de la desaparición del mismo. Como regla general se puede decir que a vaca que se nota en celo en la mañana, debe inseminarse en la tarde del mismo día, y la que se nota en celo por la tarde, se servirá en la mañana siguiente. Sin embargo, por cuestiones de manejo y practicidad en la ganadería brava, es recomendable la incorporación de protocolos de sincronización. PROTOCOLOS DE SINCRONIZACIÓN. 1. Prostaglandinas (PG) y análogos: basado en la acción luteolítica de la PGF 2 α.

5 Sólo puede aplicarse a animales cíclicos y en fase luteal (siempre y cuando haya un cuerpo lúteo CL- grande) Entre los días 1-5 del ciclo, puede no existir un CL plenamente funcional, por lo que se da una falta de respuesta. CARACTERÍSTICAS Sólo válido hasta el día 17 del ciclo, ya que en este momento se produce la luteolisis por la PGF 2 α endógena. Funciona muy bien en vacas que serán cargadas por un semental pero no para IATF. 2. GnRH PGF 2 α GnRH (GPG): Aplicable en cualquier momento del ciclo CARACTERÍSTICAS Existe un pequeño porcentaje de animales que sufren una luteolisis incompleta y no presentan estro, por lo que el folículo dominante pasa a ser persistente. Los resultados en lidia han sido muy deficientes o nulos. Se trata de sincronizar una onda folicular para provocar la ovulación en el momento esperado, lo que permite inseminar animales sin presencia de un celo evidente. La GnRH (Gonadotropina humana no recombinante) el día 0 induce la liberación de FSH (Hormona folículo estimulante) y LH (Hormona luteinizante). Esta última provoca la desaparición del folículo dominante, por ovulación o atresia. De esta forma se disminuyen los niveles de estrógenos, lo que inhibe la posibilidad de un celo espontáneo entre los días 0 y 7 del tratamiento. Si existe un CL al inicio del tratamiento, la LH aumenta el número de células luteales grandes, y la FSH provoca el paso de folículos de clase 1 a clase 2, y la atresia de los folículos de clase 2. La PGF 2 α provoca la luteolisis. En consecuencia, las concentraciones de estrógenos aumentan y también los pulsos de LH. Se produce entonces un estro sincronizado. Cuando los pulsos de LH aumentan mucho provocan el cambio de folículo dominante a folículo ovulatorio. La segunda dosis de GnRH a las 48 horas de la PGF 2 α asegura la ovulación del nuevo folículo dominante. 3. Progesterona (P 4) o progestágenos sintéticos, combinados con Estrógenos (E 2) y Gonadotropina sérica de yegua gestante (PMSG). Permite IATF CARACTERÍSTICAS Es el más interesante en la vaca brava Actúa sobre vacas en anestro.

6 Es el programa de IATF que mejores resultados ofrece en ganado bravo. Se basa en la aplicación de un dispositivo intravaginal (es el que mejor funciona) liberador de progesterona, que se mantiene durante 7 días, y al retirarlo, las vacas presentan celo entre las 36 y 48 horas posteriores. La P 4 contenida en el dispositivo produce un bloqueo en el hipotálamo, impidiendo la síntesis de GnRH, que impide las ovulaciones. En consecuencia, inhibe la síntesis de gonadotropinas en la hipófisis, lo que favorece el mantenimiento del CL existente, que libera más progesterona endógena, de la misma forma que sucede durante la fase lútea del ciclo. Al retirarlo se favorece una producción abundante de gonadotropinas que se liberan de forma brusca. Tras aplicar el dispositivo, se inyecta vía i.m. un estrógeno (benzoato de estradiol EB- o estradiol 17β) junto a una inyección de fosforo y vitaminas. Los E 2 son potentes agentes antiluteotróficos durante los primeros días del ciclo, por lo que inducen la regresión del CL en formación y la atresia del folículo dominante sin importar la fase en que se encuentre. Ésta además, induce una nueva onda folicular cinco días después, que ayudará en el ciclo siguiente. De esta manera la sincronización resulta exitosa, porque todos las vacas tratadas, tienen una onda folicular el mismo día y el folículo dominante siempre se encuentra en una fase óptima de desarrollo. La ovulación se producirá entonces simultáneamente al retirar el dispositivo alrededor de 60 horas posteriores, pudiéndose realizar la inseminación a tiempo fijo sin control de celos. Al retirar el dispositivo, se aplican PMSG, vía intramuscular (i.m). y Cipionato de estradiol. La primera induce la formación de folículos gracias a su efecto FSH, y la segunda incrementa la precisión del inicio del estro y facilitar la detección del celo. Además se inyecta PGF2α, que tiene acción luteolitica. La IA se hace a las horas de retirado el dispositivo, momento en que se aplica GNRH, para favorecer la ovulación. Los dispositivos pueden ser utilizados solamente una vez más, obviamente después de un buen lavado. RESUMEN DEL PROGRAMA DE INSEMINACION A TIEMPO FIJO DIA 0 Insertar dispositivo con progestágeno. Inyección de EB, 2 mg IM y Butafosfan con vitamina B12, 20 ml IM DIA 7 Retiro de dispositivo. Inyección de PMSG, en dosis de 500 U.I via IM. PGF2α, 2 ml, IM. y Cipionato de estradiol 0.5 mg IM. DIA 9- IA a las horas post retiro del dispositivo. Inyección de Gonadorelina, 1 ml, IM. DISCUSIÓN Frente al tratamiento que nosotros hemos puesto en práctica, Palma (2008), en biotecnología de la reproducción indica que extraer el dispositivo el día 7 u 8, no supone una diferencia en la tasa de preñez de becerras y vacas cíclicas. Incluso Macmillan y col (1999) indica que es posible que los tratamientos de 8 días sean más beneficiosos que los de 7 días en vacas en anestro postparto.

7 Por otro lado, Bó y col. (2005) expone que en becerras los tratamientos de hasta 10 días no suponen una disminución en la fertilidad, siempre y cuando se utilicen dispositivos nuevos. Diskin et al (2002) coincide con esta afirmación, ya que afirma que para obtener un celo normalmente fértil, la duración del tratamiento se fija en días. Toda esta información está basada en ganado de carne, por ello estoy de acuerdo en que es necesario que en vaca de lidia, para facilitar los tratamientos y conseguir una buena fertilidad,las vacas sean cíclicas y tengas ovarios grandes y desarrollados. Con respecto a los estrógenos, en nuestro protocolo inyectamos cipionato de estradiol el mismo día de extracción del dispositivo, mientras que Palma (2008),, indica la aplicación de benzoato de estradiol (EB) 24 horas después de la extracción, para sincronizar la ovulación Bó y col.(1996); Bó y col.(2002). Según Colazo y col (2003, 2004) la aplicación de ECP al extraer el dispositivo es efectivo para sincronizar la ovulación y obtener una tasa de preñez mayores a EB, pero sólo cuando al inicio del tratamiento se administra estradiol 17-β y progesterona. Sin embargo, Bó y col (2005) y Basurelli y col (2007) indican que su aplicación en este momento resultó en tasas de preñez similares. En mi opinión, considero que es mejor el uso de cipionato de estradiol, ya que éste es una sal de estradiol con mayor vida media que el EB y por tanto asegura en mayor medida la sincronización de la ovulación en el tiempo hasta la inseminación a tiempo fijo (IATF) y además, es una buena alternativa para reducir el número de veces que los animales pasan por la manga, reduciendo así, el estrés del animal. En esta misma línea, Bó y col. (1996); Bó y col. (2002), afirma que se ha demostrado que el benzoato de estradiol no es efectivo para el desarrollo folicular y es menos eficaz que la prostaglandina F2α (PGF2α) para inducir la luteolisis. Es por ello que nosotros aplicamos PGF2α al retirar el dispositivo. De la misma forma, McDougal et al (2004) indica que el uso de estradiol al principio del tratamiento, incluso cuando su duración se prolonga hasta 12 días, no siempre garantiza que la regresión del cuerpo lúteo (CL) sea completa en todos los animales en el momento de la retirada de la progesterona o 24 horas después. Por ello recomienda que la PGF2α sea administrada en el momento de la retirada del dispositivo, para asegurar la regresión del CL en aquellos animales que no respondan al estradiol. Respecto al uso de PGF2α al retirar el dispositivo, Arthur, G.H (1991) en reproducción y obstetricia veterinaria, supone que debería lograr una sincronización próxima al 100%. Sin embargo, afirma que se obtienen mejores resultados cuando se inyecta 24 horas antes de la retirada del implante, consiguiendo un 67% de gestaciones. Personalmente, defiendo el protocolo que nosotros empleamos, debido a que la acción de la PGF2α tiene una acción sinérgica con la Gonadotropina no recombinante humana (GnRH) y Cipionato de estradiol aplicados en el mismo momento, facilitando la acción de estas para la sincronización de ciclo, manifestación del celo y ovulación. Además su acción es específica sobre el cuerpo lúteo y mucho más potente y segura que la de los estrógenos. CONCLUSIONES: La inseminación artificial que se realiza con toros de historial sobresaliente, mejora notablemente la genética de la ganadería y el ganadero incluso tiene la opción de utilizar semen de toros de diferentes procedencias, que obviamente liguen con el encaste.

8 Sin embargo, actualmente en la raza de lidia estas técnicas no son del todo aplicativas en una gran mayoría de explotaciones, por lo que la mejora genética en el toro bravo estaría estable o avanzando muy lentamente por la utilización de métodos antiguos de reproducción. Todo tratamiento que se utilice para controlar el ciclo estral debe contemplar el control de la actividad luteal y de la dinámica folicular de manera que se maximicen los porcentajes de preñez. En el caso de la IATF, se debe controlar el momento en el que ocurre la ovulación. Los sistemas basados en los progestágenos podrían considerarse el método de elección para el manejo del celo en las vacas de lidia, ya que permiten unos partos acumulados al principio de la estación (importante si consideramos el año ganadero), con un alto porcentaje de vacas que conciben en el primer estro sincronizado. Esto, a su vez, facilita una nueva y rápida presentación de las vacas que no han concebido durante el primer estro para volver a ser inseminadas, y permite una estación de partos más compacta. Desde el punto de vista sanitario, el utilizar siempre la monta natural en la ganadería brava, puede ser este el reservorio de enfermedades de tipo venéreo. La IA palia este problema. Las técnicas de reproducción son aplicativas cuando la ganadería se adapta a programas de control alimenticio, manejo, sanidad y personal. Nunca ha habido buenos resultados de inseminación artificial cuando se han aplicado en ganaderías no preparadas en estos cuatro puntos. Por todo ello se puede concluir, que utilizando semen de buena calidad, personal bien entrenado, un tratamiento farmacológico adecuado y un nivel satisfactorio de nutrición en las vacas, se pueden obtener buenos resultados con IA en ganado de lidia. La importancia que tiene el conocer los cambios hormonales y sus valores, momento de ovulación, influencia del estrés, niveles nutricionales idóneos, métodos de sincronización específicos, etc, son trabajos a desarrollar para hacer aplicativas y estandarizar estas técnicas en la mayor parte de las ganaderías. Para concluir, considero imperante la necesidad de realizar más estudios en este campo en toro de lidia, ya que toda la información existente está referida a vacuno de carne o leche, y como ya comenté en apartados anteriores, el bovino de lidia, aunque bovino, es diferente a cualquier otro. BIBLIOGRAFÍA. - Arthur, G.H; Noakes, D.E; Pearson,H.; Reproducción y obstetricia en veterinaria (Teriogenología).6º edición. Ed. Interamericana- McGraw-Hill. Madrid (España). - Ptaszynska, M.; Compendium de Reproducción Animal. 9º edición. Ed. Intervet internacional. Madrid (España). - Palma, G.A.; Biotecnología de la Reproducción. 2º edición. Ed. Repro Biotec. Mar del Plata Buenos Aires (Argentina). - González. C, E.; Durán. C, C.V; Domínguez. C, J.; La inseminación artificial en ganado de lidia. II Congreso Mundial de Criadores de Toros de Lidia. Sevilla (España) - Gómez. P, A Problemática de la aplicación de las técnicas de inseminación artificial en el ganado vacuno de lidia. Equipo nº 1 de reproducción de la ANGL.

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