Situación de resistencia de la garrapata Boophilus microplus. a acaricidas en Colombia

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1 Situación de resistencia de la garrapata Boophilus microplus a acaricidas en Colombia SEGUNDA ENTREGA EFRAÍN BENAVIDES ORTIZ - ALVARO ROMERO NASAYO - JOSÉ L RODRÍGUEZ BAUTISTA El diagnóstico de resistencia Para comprobar que existe resistencia a los acaricidas en una finca, se requiere una cuidadosa evaluación de las prácticas utilizadas para su aplicación, esto permite estar seguro de que realmente se está ante una situación de desarrollo genético de resistencia y no ante un problema de inadecuado uso de un producto. Hecha la revisión de los métodos de aplicación, se dispone de dos alternativas para confirmar la presencia de resistencia: la primera es la utilización de pruebas de laboratorio (conocidas como pruebas in-vitro) y, la segunda, es la prueba biológica sobre animales experimentales (bovinos), la que se conoce como prueba in-vivo. Las ventajas de las técnicas in-vitro se resumen en que sus resultados se obtienen con mayor rapidez, tienen menores costos y permiten obtener un mayor caudal de información, por la cantidad de individuos y compuestos que es factible evaluar en corto tiempo. Su desventaja radica en que es imposible representar la compleja realidad de lo que ocurre en la finca, mediante una prueba de laboratorio, que sólo simula parte de esa compleja relación garrapata - huésped y el efecto de un ingrediente activo sobre el parásito. Estas pruebas requieren experiencia para interpretar los resultados y precisar el alcance de sus implicaciones biológicas; afortunadamente, la investigación adelantada en laboratorios del país y del exterior permite hoy en día contar con criterios efectivos para ello. Pruebas in-vitro Las pruebas in-vitro a su vez se dividen en dos grupos: las que utilizan larvas y las que CARTA FEDEGÁN 13

2 se realizan con garrapatas repletas (adultas). Cada una de ellas tiene sus ventajas y desventajas. En el primer tipo se requieren más de seis semanas para entregar los resultados, debido a que es necesario recolectar en la finca garrapatas repletas, esperar cuatro semanas para que nazcan las larvas y luego otras dos o tres hasta que tengan la edad adecuada para desarrollar la prueba. El uso de del producto, a partir de concentrados emulsionables disponibles en el niercado, por un determinado tiempo (técnica de emparedado o de Sha) o ponerlas en contacto con sobres impregnados con él. Esta última ha sido adoptada por la FAO como prueba estándar para el estudio de resistencia en todo el mundo. En las fotos 1 y 2 se ilustra la forma como se realiza. esta técnica permite disponer de un número amplio de individuos y evaluar cantidades importantes de principios activos y concentraciones de producto. En ellas se mide la capacidad del producto para matar (o inmovilizar) los individuos expuestos. Las técnicas que trabajan con garrapatas adultas se basan en la e\aluación de parámetros de fertilidad, es decir, miden la capacidad de un producto para inhibir la postura de huevos por parte de la garrapata. Esta técnica es conocida como 'prueba de inmersión Existen dos formas de exponer las larvas al acaricida: sumergiéndolas en suspensiones e de adultos" o técnica de Drummond s 3 y 4) y trabaja con base en productos comer- L Prueba Luego del paquete de 24 horas Únicamente aquellas de larvas (Kids se determina larvas que FAO); las larvas la mortalidad son capaces FEDERACIÓN COLOMBIANA DE GANADEROS se exponen al acaricida en los paquetes 2). de caminar son consideradas como vivas. de papel de filtro í).

3 o C E P A Y E E R O N G PILLY INMERSIÓN C O N AMITRAZ p.p.m. o PRUEBA INMERSION DE A D U L T O S EN AMITRAZ CEPA MONTECITOS p.p.m. Prueba en de Drummond el acaricida, cuando (inmersión se observa es resistente de adultos); la postura. 4), la postura Cuando es luego la cepa de 15 días de haber es susceptible sumergido 3) se inhibe las garrapatas la postura, completa. cíales, ofreciendo información rápida sobre la situación de resistencia en condiciones de campo (es factible obtener resultados a las dos semanas). La desventaja de esta prueba es que requiere de un alto número de garrapatas adultas ( ) de buena calidad, las que en ocasiones son difíciles de recolectar en condiciones de campo. CARTA FEDEGÁN 15

4 A nivel nacional estas pruebas se han venido perfeccionando en el laboratorio a través de los años. Primero fueron utilizadas como herramientas de investigación, pero actualmente desarrollo y validación de diferentes pruebas para el diagnóstico de resistencia en poblaciones de campo, trabajando primero con una colonia de laboratorio tbenavides et al., están disponibles como servicio tarifado, 1989) en el centro de investigación La para cualquier persona que requiera conocer la situación de garrapatas de su finca. En la actualidad se tienen disponibles técnicas para diagnosticar resistencia a lactonas macrocíclicas (ivermectinas), lo Libertad, en Villavicencio. Ese trabajo preliminar demostró que la colonia de La Libertad era susceptible al Amitraz, Clorfenfinfos, Cumafos, Ethion y Deltametrina, sugiriéndose la presencia de mismo que a las amidinas CE) resistencia incipiente hacia (amitraz), además de las que la Cipermetrina. se relacionan en las investigaciones realizadas. A mediados de los ochenta, en un trabajo preliminar, se Las técnicas Las técnicas in-vivo se consideran la "prueba reina", ya in-vivo se consideran departamento de Antioquia culminó un estudio en el que permiten conocer el la ''prueba reina", (López etal ) recolectando grado de resistencia que ya que permiten conocer garrapatas en matade ocurre realmente sobre los ros municipales y usando el grado de resistencia animales afectados, tratados como dosis discriminatoria que ocurre realmente adecuadamente con el producto en la prueba de Drummond, que se evalúa. Consis ten en infestar con garrapatas sobre los animales afectados, tratados la dosis recomendada por el fabricante; allí se sugirió que (de manera natural o artificial) a grupos de animales gente de resistencia a los existía un problema emer adecuadamente con el producto que (10-15 cada uno), los que piretroides sintéticos (PS) y se evalúa. luego son tratados con el que algunos compuestos garrapaticida a evaluar, realizando posteriormente eva- """" eran poco eficaces para controlar la eficacia reproductiva luaciones cuantitativas. Estos en muestras de campo. métodos requieren de infraestructura y personal entrenado, lo que las hace costosas y realizables solamente para fines de investigación. Por su parte algunos organofosforados (OP) a pesar de que fueron desplazados del mercado, demostraron un apropiado nivel de control. Reportes de resistencia en Colombia Desde inicios de la década del ochenta, nuestro grupo de investigación trabajó en el Betancourt (1993), utilizó la prueba de inmersión de adultos y el emparedado de Shaw examinando ocho cepas procedentes de los municipios del Tambo, Santander de FEDERACIÓN COLOMBIANA DE GANADEROS

5 4 Quilichao, Cartago, Zarzal, Palmira, Palestina, Manizales y Mariquita. En la prueba de Meta, Huila y Norte de Santander, basados dios poblacionales en los departamentos de inmersión de adultos, los PS flumetrina, deltametrina, alfacipermetrina y lambdacyalotri- finca y analizadas con el Kit FAO (Hernán en muestras recolectadas directamente en la na ejercieron un control entre bajo y moderado sobre la capacidad de reproducción de dez, 1993; Romero etal., 1997). las cepas estudiadas. El amitraz evidenció un Al mismo tiempo se aplicó una encuesta a buen control. nivel de campo sobre los métodos de control parasitario, para establecer la posible asocia Rivera y Rodríguez (1989), evaluaron nuevamente la colonia mantenida en el ICA de Villavicencio y cuatro cepas de campo, utilizando también las técnicas de inmersión de adultos, la prueba de inmersión de larvas (emparedado de Shaw) y ios Kits de FAO. Los resultados indicaron susceptibilidad a los OP ethion, clorfenvinfos, cumafos y además al amitraz. Para los PS cipermetrina y deltametrina, se detectó bajo efecto sobre la reproducción de las teleoginas, medida en la prueba de inmersión, en tanto que en la prueba de mortalidad larvaria se encontró susceptibilidad. Los resultados para las cs:> La resistencia ha tenido su origen, la mayoría de las veces, en las malas prácticas de aplicación que se dan con frecuencia en nuestras explotaciones ^^^ ción de factores de riesgo con la presencia de resistencia. Todos los factores de riesgo evaluados se asociaron con la presencia de resistencia, siendo los de mayor influencia la baja efectividad de los productos (reportada por los encuestados), el tiempo de utilización (menor de tres meses), el sistema de baño (bomba de aspersión manual), raza (tipo Bos taurus) y el tipo de explotación (leche y doble propósito). Como conclusión de estos estudios, se ha demostrado que el patrón de resistencia o susceptibilidad varía intensamente de finca a finca y que existen una serie de factores de riesgo cepas de campo mostraron susceptibilidad a que se asocian con la presencia de resistencia. los OP yal amitraz y diferentes grados de susceptibilidad y resistencia para los órganoclorados OC ya los PS. Los resultados de los estudios mencionados revelan que en el departamento del Meta, de Tres estudios poblacionales 40 muestras evaluadas se demostró la presencia de resistencia a los OP en 5 fincas, En el Centro de Investigación en Salud y Producción Animal (CEISA) de Bogotá, durante esta década se han culminado tres estucia a los PS (Hernández, 1993). En el mientras que 25 fincas demostraron resisten Huila, ni CARTA FEDEGÁN 17

6 de nuevo se demostró resistencia a los piretroides sintéticos en 25/40 fincas y para los OP en el 12.5% de las fincas. En ambos departamentos dentro de los factores de riesgo de resistencia se encontró el tipo racial de los animales (genotipos lecheros). Para el caso del Norte de Santander (Benavides, Márquez y Romero, datos no publicados) los resultados de laboratorio indicaron la presencia de resistencia a los PS en cinco de diez fincas evaluadas para estos compuestos, mientras que en 8/13 fincas se encontraron altos niveles de resistencia para los OP. En cinco de esas fincas se demostró presencia de genes multi-resistentes para los dos grupos de compuestos evaluados. ubicación de algunas de las cepas multiresistentes encontradas hasta ahora en el país. Por otra parte, en la Unidad de Garrapatas de Palmira, así como en el CEISA se han multiplicado y caracterizado parcialmente algunas cepas resistentes de origen colombiano; se destacan entre ellas varias cepas resistentes a PS procedentes del Valle del Cauca (Tinajas, Danubio y Piedras Gordas); La Cepa Paso Ancho (Betancourt, A. & Cassalett, E., comunicación personal, 1999), la cual es multi-resistente a OP, PS y algo para amidinas. Por su parte nuestro grupo de investigación aisló la Cepa Bonanza del Piedemonte Llanero, la cual fue tipificada por el WARRC (World Acaricide Resistance Reference Center) como multi-resistente para OC, OP y PS. Recientemente se ha concluido la caracterización de la Cepa Montecitos la cual es multi-resistente para OP, PS y Amitraz (Benavides, Romero & Sánchez, 1997) y de la Cepa Palma de Vino, la cual es resistente a los PS y OP, susceptible a las amidinas y se poseen fuertes indicios de que es resistente a las Ivermectinas. En el Mapa se observa la Ubicación geográfica de cepas de la garrapata Boophilus microplus, multi-resistentes a varios grupos de acaricidas, en Colombia. Las características de cada cepa se detallan en el texto. Conclusiones 1. La resistencia a los acaricidas en Colombia es un hecho real. 2. Se han encontrado en el país tanto cepas resistentes a un principio activo como a varios de ellos, dependiendo de las diferentes regiones. 3. La resistencia ha tenido su origen, la mayoría de las veces, en las malas prácticas de aplicación que se dan con frecuencia en nuestras explotaciones. V Espere en la próxima entrega las recomendaciones específicas de Manejo Integrado de Plagas que deben ponerse en práctica a nivel de finca, para disminuir el impacto de la resistencia. FEDERACIÓN COLOMBIANA DE GANADEROS

7 F E D ER A C I ó N C Q L o M B la NA DE GA NA D EROS Imp certifi ái de fié en la colomtiiana ^ Resolución ICA de 1999 B Zona libre sin vacunación ^ certificada OIE 1997 Zona libre con vacunación a certificar OIE 2001 ' Zona de protección Zona endémica