ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE DATOS EXPERIMENTALES EN EL MEJORAMIENTO GENÉTICO VEGETAL. Ing. Agr. Pablo Mansilla MGV-FCA, UNC.
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- Juan Manuel Moreno Sandoval
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1 ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE DATOS EXPERIMENTALES EN EL MEJORAMIENTO GENÉTICO VEGETAL. Ing. Agr. Pablo Mansilla MGV-FCA, UNC.
2 ALGUNAS DEFINICIONES NECESARIAS.. UNIDAD EXPERIMENTAL (UE) Porción de material o terreno, un individuo o grupo de individuos, susceptible de tratamiento experimental y sobre la que se observa una respuesta. Generalmente coincide con la Unidad de Observación (UO). Ejemplos: planta, parcela de terreno, alícuota de materia prima (muestra de harina), grupo de insectos, etc. El tamaño de la unidad experimental es usualmente una decisión arbitraria, pero afecta la calidad de la observación de la variable respuesta.
3 RESPUESTA Cuando se planifica un experimento, se debe identificar la respuesta del sistema que se va a evaluar variables respuesta (variables dependientes) Cualitativas Univariadas (una sola variable) Cuantitativas Multivariadas (varias variables)
4 FACTORES Las potenciales fuentes de variación de la/s variable/s respuesta en un sistema experimental identificadas a priori son llamadas factores Los distintos estados o valores de los factores se designan niveles La combinación de niveles evaluados para un conjunto de factores recibe el nombre de tratamiento TRATAMIENTO: conjunto de acciones que se aplican sobre las unidades experimentales y que son objeto de comparación.
5 EJEMPLOS Se desea medir contenido de gluten en 15 cultivares de trigo Se desea comparar los rendimientos de 13 híbridos experimentales de maíz bajo diferentes dosis de nitrógeno (50, 90 y 120 kg/ha) Se desea comparar la efectividad de 3 fungicidas (Benomyl, Captane e Iprodione) en diferentes concentraciones ( 0.3, 3.0 y 30 mm) sobre cuatros hongos fitopatógenos (Colletrotrichum acutatum, Colletrotrichum fragariae, Colletrotrichum gloesporioides y Fusarium oxysporum)
6 ERROR EXPERIMENTAL El término error experimental se refiere a la diferencia entre el valor observado de la variable respuesta sobre una unidad experimental y su valor esperado (de acuerdo a un modelo). El error experimental es el responsable de la variación observada entre unidades experimentales tratadas de la misma forma.
7 COMPONENTES DEL ERROR EXPERIMENTAL Error de medición: Variación que introduce el instrumento o procedimiento de medición. Error de muestreo: Variación en la respuesta diferencial de cada UE al tratamiento que recibe y depende de propiedades inherentes a la UE. Error de observación: Variación debida al submuestreo de la unidad experimental. Error de tratamiento: Variación en la respuesta debida a los errores en la reproducción del tratamiento. Usualmente, una vez obtenido un dato experimental, no es posible identificar la magnitud de las distintas componentes que, sumadas, conforman el error experimental.
8 ALGUNOS RECURSOS DEL DISEÑO DE EXPERIMENTOS Aleatorización Repetición Bloqueo
9 ALEATORIZACIÓN Procedimiento de asignación aleatoria... de los tratamientos a las unidades experimentales (distribución del error de muestreo) del orden en que los tratamientos son aplicados (control sobre posibles variaciones en la aplicación de tratamientos) del orden en que se miden las respuestas (control de variaciones sistemáticas del error de medición) Permite distribuir aleatoriamente las fuentes de error
10 REPETICIÓN Se considera repetición a la aplicación de ese tratamiento a una nueva unidad experimental. Dado que toda observación tiene error, para estimar insesgadamente el efecto de un tratamiento, se debe promediar sobre un conjunto de repeticiones.
11 BLOQUEO Aunque la aleatorización distribuye los errores y controla el sesgo, no elimina ni minimiza el error experimental. El bloqueo es el resultado de un reconocimiento a priori de fuentes sistemáticas de error y permite obtener experimento más eficientes DISEÑOS EN BLOQUES El bloque señala que: Las unidades experimentales dentro de un bloque deben ser tan homogéneas como sea posible. Las diferencia entre UE deben ser explicadas por las diferencias entre bloques (heterogeneidad entre bloques).
12 EXPERIMENTO: 3 tratamientos en un Diseño en Bloques Completos al Azar (DBCA), con 4 repeticiones en bloques completos porque en cada bloque aparecen todos los tratamientos, y al azar porque los tratamientos son asignados en forma aleatoria dentro de cada bloque. Todas las UE de un mismo bloque tienen la misma probabilidad de recibir cualquiera de los tratamientos. Generalmente, el N de R coincide con el N de bloques.
13 MODELO Y ANÁLISIS Experimento bien planificado : Análisis simple Interpretación directa En estudios observacionales, el análisis se transforma en una herramienta de exploración de datos El objetivo es encontrar el modelo apropiado Se entra en un territorio donde la interpretación de los resultados puede ser poco confiable
14 ANÁLISIS DE LA VARIANZA
15 ANÁLISIS DE LA VARIANZA Descompone la variabilidad total en la muestra (suma de cuadrados total de las observaciones) en componentes (CUADRADOS MEDIOS) asociados cada uno a una fuente de variación reconocida.
16 ANÁLISIS DE LA VARIANZA En experimentos con fines comparativos, usualmente se realiza la aplicación de varios tratamientos a un conjunto de unidades experimentales (parcelas, individuos, macetas, etc.) De esta manera, se logra que las alteraciones en las respuestas (variables) puedan ser atribuidas a la acción de los tratamientos, excepto por variaciones aleatorias. El propósito es comparar medias de tratamientos con el menor ruido posible. OBJETIVO... Establecer si las diferencias obtenidas entre las medias estimadas reflejan las diferencias entre las verdaderas medias (parámetros)
17 El modelo lineal Yij i ij DISEÑO EN BOQUES Efecto de tratamiento Efecto de bloque Y ij = + i + b j + ij las variaciones debidas a la estructura presente entre bloques, es eliminada de las comparaciones entre unidades que reciben el mismo tratamiento. El bloqueo permite disminuir el error
18 CONTRASTE DE HIPÓTESIS Hipótesis Nula: El modelo más simple es adecuado para explicar la variación observada en los datos La hipótesis nula en un análisis de la varianza es: Las medias de tratamientos son iguales a La hipótesis alternativa es: Existe al menos una media que se diferencia de las otras
19 Cómo se establece si el modelo más simple es adecuado para los datos observados? Dicho de otra manera Cómo se decide si la hipótesis nula es soportada por los datos experimentales?
20 Se asume que la hipótesis nula es cierta Se calcula una medida de credibilidad de la hipótesis nula, conocida como p- valor Cuanto menor es el p-valor, menos verosímil es la hipótesis nula Se fija un umbral por debajo del cual la hipótesis nula se rechaza, conocido como nivel de significancia (α)
21 Si se rechaza Ho Cuál o cuáles de las medias poblacionales son las diferentes?
22 PROCEDIMIENTOS DE COMPARACIONES MÚLTIPLES
23 Uno de los principales usos del ANOVA en MGV es para ESTIMAR VARIANZAS FV SC GL CM є (CM) ENTRE PROGENIES CME VE + R VG DENTRO PROGENIES CMD VE CUADRADO MEDIO DENTRO (CMD) = VARIANZA AMBIENTAL (VE) CUADRADO MEDIO ENTRE (CME) = VARIANZA FENOTÍPICA (VE + VG * R), donde R es el N de Repeticiones. VG = (CME CMD)/R %VG ó H 2 (amplio) = (VG) / (VG + VE)
24 ACTIVIDAD PRÁCTICA Documento Excel: base de datos para curso
25 TESIS EVALUACIÓN DEL VALOR NUTRICIONAL DE MAÍCES ESPECIALES (Zea mays L.): SELECCIÓN PARA CALIDAD AGROALIMENTARIA OBJETIVO GENERAL Evaluar el valor nutritivo de maíces especiales a partir de su composición química, a fin de seleccionarlos para calidad agroalimentaria.
26 PROTEÍNAS Varían entre el 8 y 11% del peso del grano
27 Posee una mutación natural en el gen recesivo o2, que codifica para la síntesis de zeínas. Limita la síntesis de zeína, y se traduce en la duplicación del contenido de lisina y triptófano La expresión de este gen (doble recesivo) lo convierte en maíz con valor nutritivo superior al maíz normal (QPM).
28 MATERIAL GENÉTICO: Prueba de progenies
29 ANÁLISIS DE CORRELACIÓN Se deben tener dos o más variables aleatorias relevadas sobre cada UE. El Coeficiente de correlación de Pearson (r) es una medida de la magnitud de la asociación lineal entre dos variables cuantitativas que no depende de las unidades de medida de las variables originales. Asume valores entre -1;1 y el signo indica la dirección de la asociación. LAS CORRELACIONES OBSERVADAS ENTRE DOS VARIABLES NO PUEDEN SER USADAS PARA ESTABLECER RELACIONES CAUSALES.
30 Valores p asociada a la prueba de hipotésis de correlación nula Oleico Linoleico Linolénico Proteína Oleico 1 0, , , Linoleico -0, , , Linolénico -0, , , Proteína 0, , , Coeficientes de correlación (r) p-valores a 0.05, estadísticamente significativos. Los p-valores significativos se corresponden a un coeficiente de correlación r. Se analiza el valor r considerando su valor absoluto y signo. Un signo positivo indica que ambas variables se incrementan o disminuyen en el mismo sentido; un signo negativo indica que mientras una variable se incrementa, la otra disminuye.
31 En MGV, el coeficiente de correlación de Pearson permite determinar las correlaciones fenotípicas entre caracteres, por ser la resultante de efectos genéticos y ambientales. UTILIDAD Caracteres asociados al rendimiento. ESTABLECER CRITERIOS DE SELECCIÓN
32 ANÁLISIS DE SENDERO (PATH ANALYSIS) En el análisis de sendero se pretende construir modelos de causa-efecto entre las variables a través de la partición de la correlación. Estos son efectos directos de una variable sobre otra (senderos simples) y efectos indirectos de una variable sobre otra, vía una o más variables exógenas (senderos compuestos). UTILIDAD SELECCIÓN INDIRECTA
33 INTERRELACIONES r cp-1 CARÁCTER 1 Se calculan los coeficientes de correlación fenotípica entre los caracteres, y CP r 1-2 r cp-2 los efectos directos e indirectos de los caracteres analizados sobre el carácter sobre el principal (CP). CARÁCTER 2
34 EJEMPLO La correlación entre biomasa y área foliar es significativa (r=-0.49, p=0.0272), y está casi completamente determinada (-0.52) por la correlación entre biomasa y semillas germinadas. Las semillas germinadas, posee una fuerte correlación con biomasa y un fuerte efecto indirecto sobre la relación encontrada entre área foliar y biomasa.
35 MUCHAS GRACIAS
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