UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA

Transcripción

1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA DIRECCIÓN DE INVESTIGACIÓN LABORATORIO DE MICROPROPAGACIÓN VEGETAL Generación de Protocolos para la propagación in vivo e in vitro de genotipos élites de especies forestales nativas y promisorias para la reforestación en la Región Sur del Ecuador RESPONSABLES: Ing. Agro. Julia Minchala Patiño. Ing. For. Víctor Hugo Eras Guamán

2 OBJETIVO GENERAL Contribuir a la generación de protocolos para la producción de plántulas de genotipos élites de Bursera grabeolens (palo santo), Tabebuia billbergii (guayacán), Loxopterigium huasango (hualtaco) y Prosopis sp. (algarrobo), por métodos in vivo e in vitro, para contribuir al establecimiento de programas de reforestación de la Región Sur del Ecuador.

3 OBJETIVOS ESPECIFICOS 1. Evaluar y seleccionar genotipos sobresalientes de las especies en estudio, para la obtención de material vegetal sexual y asexual a utilizar en la propagación biotecnológica y convencional. Delimitación del área de estudio Selección de los árboles con características sobresalientes Colecta de material vegetal

4 2. Establecer los protocolos biotecnológicos de las especies en estudio, para la inducción de procesos morfogénicos in vitro, a partir de diferentes fuentes de explantes. Germinación de semillas in vitro a. Selección de semillas b. Escarificación c. Desinfección de semillas d. Preparación de medio de cultivo e. Inoculación in vitro de semillas f. Parámetros a evaluar % Germinación, % contaminación, % mortalidad, días a la germinación.

5 Cultivo de ápices caulinares y segmentos nodales (elongación del brote, brotamiento y enraizamiento) Selección de explantes Desinfección de explantes Preparación del medio de cultivo Inoculación in vitro de los explantes Parámetros a evaluar % contaminación, % mortalidad, % de fenolización, altura de la planta, número de brotes, longitud del brote, número de nudos y número de hojas.

6 Inducción de callos Selección de explantes Preparación del medio de cultivo Inoculación in vitro de los explantes Parámetros a evaluar % de contaminación, % de mortalidad, % de fenolización, formación de callos, consistencia y color del callo y cualitativos: características morfológicas y fisiológicas de los explantes, callos inducidos.

7 3. Establecer los protocolos convencionales para la producción de plantones en condiciones de invernadero, mediante el uso de semillas, estacas y acodos aéreos de las especies en estudio. Propagación sexual por semillas Propagación asexual por estacas Propagación a asexual por acodos aéreos Propagación por regeneración natural

8 4. Evaluar el comportamiento de las plántulas obtenidas en el laboratorio e invernadero de las especies en estudio, en las fases de aclimatación, adaptación y desarrollo inicial en condiciones de un huerto semillero exsitu. Aclimatación de las vitroplantas Establecimiento del huerto semillero ex-situ Evaluación del desarrollo inicial de las plántulas establecidas en el huerto semillero ex-situ Entrega de plántulas obtenidas por semillas y regeneración natural a actores externos

9 RESULTADOS ALCANZADOS

10 1. Calendarios fenológicos y dendofenogramas para las cuatro especies en estudio.

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14 2. Protocolos para la propagación in vitro de las especies en estudio. Protocolos para germinación de semillas in vitro Desinfección Las semillas se seleccionan en grupos de 50. Se desinfectan en alcohol del 70 % por un minuto. Se desinfecta con hipoclorito de sodio 5,25 % de i.a. + 3 gotas de Tween 80 por 10 o 15 minutos. Medio de Cultivo Sales minerales MS (Murashige & Skoog, 1962), vitaminas (Thiamina 1,0 mg/l y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% y ácido giberélico (AG3) en concentraciones de 0,5 y 1,0 mg/l más un testigo sin AG3. Prosopis sp. Tabebuia billbergii Loxoterigium huasango Bursera graveolens

15 Protocolos para cultivo de ápice y segmentos nodales in vitro Medios de Cultivo Sales minerales MS (Murashige & Skoog, 1962), vitaminas (Thiamina 1,0 mg/l y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con KIN 0,2 mg L -1, ANA 0,2 mg L -1 KIN 0,2 mg L -1, AIA 0,2 mg L -1 KIN 0,2 mg L -1 y AIA 0,02 mg L -1 AG 3 0,02 mg L -1. Prosopis sp. Tabebuia billbergii

16 Protocolos para Brotamiento in vitro Medios de Cultivo Sales minerales MS, vitaminas (Thiamina 1,0 mg/l y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con KIN 1,0 mg L -1 y sulfato de adenina 25 mg L -1. Prosopis sp. Tabebuia billbergii

17 Protocolos para enraizamiento in vitro Medios de Cultivo Sales minerales MS, vitaminas (Thiamina 1,0 mg/l y m-inositol 100mg/L), sacarosa 2%, agar 0,6% suplementado con AIB 1,0 mg L -1. Tabebuia billbergii Loxoterigium huasango

18 3. Huerto semillero de las especies forestales en estudio, establecido con plántulas en Centro de Formación Binacional de Zapotepamba. ESPECIFICACIONES DEL HUERTO Sitio: Área del terreno: Especies sembradas: Centro de formación binacional Zapotepamba 1748 m 2 Prosopis sp, Tabebuia billbergii, Loxoterigium huasango y Bursera graveolens. Tratamientos: Número de indivíduos por especie: 3 (Humus; Humus + Fertilizante completo; Testigo) Prosopis sp= 27 Tabebuia billbergii= 21 Loxoterigium huasango= 27 Bursera graveolens= 26

19 COMUNIDAD DE LIMONES SR. GELMER VINCES MARTINEZ

20 GRACIAS POR SU ATENCION