TRANSCRIPCIÓN. Mathews C.K.; Van Holde K.E.; Ahern, K. G (2002). Bioquímica, 3ª ed. Addison Wesley

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1 TRANSCRIPCIÓN Nelson DL y Cox MM (2000) Lehninger Principios de Bioquímica 3ª ed Ed Omega Nelson DL y Cox MM. (2000). Lehninger Principios de Bioquímica, 3ª ed. Ed. Omega. Mathews C.K.; Van Holde K.E.; Ahern, K. G (2002). Bioquímica, 3ª ed. Addison Wesley

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3 ADN ARN El ARN es una cadena sencilla Se pliegan? Tiene funciones informativas y catalíticas Con excepción de los genomas de ARN de ciertos virus, todas las moléculas de ARN se forman a partir de información almacenada en el ADN. Tres clases principales de ARN: ARNmensajero, ARNtransferencia y ARNribosómico.

4 La transcripción es más selectiva que la replicación Secuencias reguladores específicas indican el principio y el fin de los segmentos de ADN que han de ser transcritos.

5 TIPOS DE ARN s ARNm (mensajero) codifica la secuencia de aminoácidos de un polipeptido ARNr (ribosomal) componente estructural de los ribosomas ARNt (transferencia) transferencia de aminoácidos durante la traducción ARNnc (no codificantes) procesamiento co/post transcripcional

6 REPLICACIÓN vs TRANSCRIPCIÓN Síntesis de ADN Dependiente del molde Dependiente de cebador 5 -> 3 Copias simples de ambas cadenas FASES: Iniciación, elongación, terminación. Corrección de errores (Exonucleasa 3 -> 5 ) Síntesis de ARN Dependiente del molde No requiere de cebador 5 -> 3 Copias múltiples de una región de una cadena FASES: PREINICIACIÓN, iniciación, elongación, terminación. No actividad de exonucleasa (no hay corrección de errores) Por qué?

7 Procariontes Eucariontes

8 G E N Región de ADN que codifica para un péptido o una proteína (ARNm)

9 Hebra no molde (codificante) de ADN Hebra molde de ADN Transcripto de ARN El transcripto de ARN se sintetiza sobre la hebra molde complementaria.

10 PROMOTORES Son secuencias específicas del ADN. (Las cuales dirigen la transcripción de los genes). Las secuencias no son idénticas en todos los promotores bacterianos, pero si forman secuencias consenso.

11 CORRIENTE ARRIBA CORRIENTE ABAJO

12 Procariontes similitudes Eucariontes

13 Secuencias conservadas de los promotores reconocidos por la ARN polimerasa de E. coli. PURINA

14 Estructura de la ARN polimerasa E. coli.

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17 Los RNAs Procarióticos son a policistrónicos

18 Los RNAs Eucarióticos son monocistrónicos

19 Inicio de la transcripción: El promotor Los promotores son el inicio de la transcripción donde se une la ARN polimerasa *Secuencias Consenso en posiciones 35 y 10 *Región 10 abundancia de AT, fácil ruptura de puentes de H. *Los promotores difieres en su eficiencia i i *Los distintos factores sigma confieren transcripción diferencial (Heat Shock, N, P) *Existen reguladores adicionales (represores y potenciadores)

20 La polimerasa se une al promotor y forma sucesivamente un complejo cerrado (ADN intacto) Un complejo abierto (en el cual el ADN está intacto pero se encuentra parcialmente desenrrollado) El i i t dl lj d t i ió El movimiento del complejo de transcripción lo aleja del promotor.

21 Elongación La síntesis de la cadena continúa en dirección 5 3'. Después de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza(caperuza o líder) de metil GTP en el extremo 5 con función protectora.

22 Finalización Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una polia polimerasa añadeunaseriedenucleótidos con adenina, la cola polia, y el ARN, llamado ahora ARNm precursor, se libera.

23 TE ERM MINA ACIÓ ÓN DE RHO (ƿ) DIEN NTE DEP PEN Pausa en los lugares de terminación dependientes de ƿ La proteína Ƿ posee actividad ARN- ADN helicasa dependiente de ATP Ƿ se mueve hacia el extremo 3 desplazando la cadena molde de ARN. Esto debilita la interacción, haciendo que se disocien, el ARNm, ARNpolimerasa, Ƿ.

24 ÓN RHO ERM MINA ACIÓ ENDIE ENTE E DE R TE IND DEPE (ƿ) Transcripción de un ARNm con abundante U La doble cadena ARN ARN estabilizada G C, elimina algunos de los apareamientos de bases entre el molde y el transcrito. Los A U inestables se disocian, liberando el transcrito

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33 MADURACIÓN DEL ARN EN EUCARIONTES El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones Se trata por lo tanto de El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las ARN ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.

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36 α β γ CAPUCHÓN EN 5

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