UNIVERSIDAD DE MAGALLANES FACULTAD DE CIENCIAS ESC. CS. Y TEC. EN REC AGRIC Y ACUIC.

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1 UNIVERSIDAD DE MAGALLANES FACULTAD DE CIENCIAS ESC. CS. Y TEC. EN REC AGRIC Y ACUIC. Manejo de inseminación artificial Intra-cervical con semen fresco en ovinos de la Región de Magallanes Trabajo presentado para optar al titulo de: Ingeniero Agropecuario Profesor Guía: Claudia Salinas Autor: Vanessa Christie PUNTA ARENAS CHILE

2 INDICE RESUMEN 4 SUMMARY... 5 I. INTRODUCCIÓN 6 II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA Inseminación Artificial Ventajas y desventajas de la inseminación artificial Tipos de inseminación artificial Requerimientos de infraestructura Infraestructura Selección de animales Selección de carnero Selección de hembras Manejos previos a la I.A Manejo de machos para retajo Identificación de animales Esquila de ojos y/o cola Sincronización de celo Método Farmacológico Métodos Naturales Detección de celo Preparación Laboratorio Preparación equipo Inseminación Armado vagina artificial Recolección de semen y manipulación Armado Inyector Inseminación Artificial Intra-cervical Manejos Post inseminación Manejo Oveja Repaso con carnero. 22 III. CONCLUSIONES 23 IV. BIBLIOGRAFÍA.. 24 V. ANEXOS Materiales Calendario de Manejo Programa I.A Colocación y retiro esponja con prostaglandina

3 INDICE DE FIGURAS Y TABLAS Tabla 1 Resultados de I.A. utilizado semen fresco y congelado.. 9 Figura 1 Potreros para detección celo, corrales de aparte, laboratorio de inseminación artificial y bretes.. 10 Figura 2 Machos Reproductores 12 Figura 3 Hembras para programa de I.A Figura 4 Esponja con progesterona y aplicación 14 Figura 5 Aplicación pintura retajo y aparte de ovejas marcadas Figura 6 Arnes marcador y chaleco para macho entero Figura 7 Laboratorio instalado.. 17 Figura 8 Partes de una vagina artificial y su armado 18 Figura 9 Extracción semen 19 Figura 10 Evaluación semen 20 Figura 11 Inyector 21 Figura 12 Cervix e inseminación. 21 3

4 RESUMEN El método más comúnmente utilizado para ovejas es la inseminación cervical utilizando semen fresco. Cuando se practica adecuadamente, la inseminación cervical de semen fresco o semen sin diluir da por resultado una alta fertilidad, comparable a la obtenida en rebaños con monta natural. La Inseminacion Artificial (IA) con semen fresco es la técnica más utilizada en Chile y en el mundo. En nuestro país la IA con semen fresco se utiliza desde hace varios años, especialmente en planteles y/o estancias de la XI y XII región. El objetivo general es el de entregar los conocimientos básicos de manejo más adecuado en el uso de la tecnica de inseminación artificial intra-cervical para el ganado ovino de la Región de Magallanes, considerando aspectos tanto en los manejos previos, la realización de la inseminación y aquellos manejos posteriores a la realización del trabajo. Los requerimientos de infraestructura, selección de animales (carneros y hembras), manejos previos y posteriores a la inseminación son de vital importancia para el éxito de la técnica. Entre los requerimientos de infraestructura se encuentran: corrales de aparte, laboratorio de inseminación, potreros para la detección de celo y bretes. Por otro lado, entre los manejos previos a la inseminación se detallan: manejo de machos para retajo, identificación de los animales, esquila de ojo y/o cola, sincronización de celo, detección de celo, preparación de laboratorio y equipo; para la etapa de inseminación propiamente tal, se detallan: armado de vagina, recolección y manipulación de semen, armado de inyector y realización de la inseminación; por último como manejo post inseminación, se pueden encontrar: manejo de la oveja y repaso con carneros enteros. Cada una de las etapas descritas son indispensables para el éxito de este manejo, que es de gran ayuda para incrementar la progenie de los mejores reproductores existentes en la majada, y así obtener las características deseadas en cuanto a la producción de carne y lana. 4

5 SUMMARY The most commonly used methods for ewes is the cervical insemination using fresh semen. When it is practiced suitably, the cervical insemination with fresh semen or without diluting semen gives as a result a high fertility, comparable to the the obtained in flocks. The IA with fresh semen is the most used technique in Chile and the world. In our country the IA with fresh semen is being used for several years, especially in establishments and/farms of the XI and XII regions. The general objective of this paper is to give rules for the most suitable handling in intracervical artificial insemination on sheep of the Magallanes Region, considering previous, during the process and after the ia aspectsin order to have a good accomplishment of the work. Infrastructure requirements, animal selection (ewes and rams), previous and later handlings of the insemination are of vital importance for the success of the technique. The infrastructure requirements are: aside corrals, insemination laboratory, detailed: handling of teaser rams, identification of the animals, eye and/or tail sheaing, heat synchronization, heat detection, preparation of laboratory and equipment. For the insemination stage are detailed: vagina preparation, semen collection and manipulation, injector preparation and accomplishment of the insemination; finally as post insemination handling, can be found: ewes handling and rams service after ia. Each of the described stages are indispensable for the success of this handling, that is helpful in order to increase the progeny of the best existing reproducers and thus to obtain the characteristics wished in meat and wool production. 5

6 I. INTRODUCCION La Reproducción Animal es de suma importancia en la evolución de la ganadería ovina, siendo una técnica muy bien aceptada en la región la inseminación artificial con semen fresco, la que incrementa notablemente el aprovechamiento de un buen reproductor y por ende el mejoramiento de la majada, así mismo, se reduce el riesgo de diseminación de enfermedades. La Inseminación Artificial Intra-cervical con semen fresco es un método es barato y relativamente fácil. El semen es colectado artificialmente y depositado en el tracto reproductivo de las hembras, dentro de los primeros pliegues cervicales, los cuales son visibles con la ayuda de un espéculo con fuente de luz. El objetivo general es el de entregar los conocimientos básicos de manejo más adecuado en el uso de la técnica de inseminación artificial intra-cervical para el ganado ovino de la Región de Magallanes, considerando aspectos tanto en los manejos previos, la realización de la inseminación y aquellos manejos posteriores a la realización del trabajo. 6

7 II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 2. Inseminación artificial. La Inseminación Artificial (I.A.) es un método de reproducción en el que se obtiene el semen del macho para introducirlo posteriormente en el aparato genital de la hembra, por medio de instrumental. En este sistema no existe contacto directo entre el macho donante y la hembra a inseminar. La I.A. tiene como objetivo la utilización del eyaculado de un macho con características productivas superiores, en un gran número de hembras. De otra forma, y mediante el servicio natural, se obtendrá sólo la cubrición de una hembra por cada eyaculación. Esto traerá aparejado un beneficio económico, que estará relacionado con el objetivo productivo, con la calidad genética del reproductor y con los costos para implementar el programa de I.A. (Aisen, 2004). Los métodos diferen en cuanto a su complejidad y expectativas de éxito (Evans et. al., 1990). El método más comúnmente utilizado para ovejas es la inseminación cervical utilizando semen fresco. Cuando se practica adecuadamente, la inseminación cervical de semen fresco o semen sin diluir da por resultado una alta fertilidad, comparable a la obtenida en rebaños con monta natural. Este es el método generalmente recomendado de inseminación cuando se utiliza semen freso diluido o sin diluir (Monografía, S/A). La I.A. con semen fresco es la técnica más utilizada en Chile y en el mundo. En nuestro país la I.A. con semen fresco se utiliza desde hace varios años, especialmente en planteles y/o estancias de la XI y XII región. En las regiones centro-sur en cambio, es solo en los últimos años que se ha empezado a considerar la utilización de la IA con semen fresco, fundamentalmente con el establecimiento de lecherías ovinas (Universidad de Chile, 2000) Ventajas y Desventajas de I.A: Latorre et. al (2000) señala que esta tecnica tiene las siguientes ventajas respecto de a la monta natural. En primer lugar, es una herramienta de mejoramiento genético al utilizar machos seleccionados, puesto que un carnero es capaz de cubrir por mes 2000 ovejas o más si se utiliza semen fresco o 4000 o más vientres si es semen congelado. Un carnero en monta natural puede cubrir de 50 a 100 ovejas por temporada reproductiva. Adecuados métodos de conservación y transporte posibilitan el desplazamiento y diseminación del material genético sin el riesgo de adquirir o trasladar un reproductor caro. Existen técnicas de preservación del material seminal que puede ir más allá de la vida de los reproductores, constituyéndose en un seguro de vida de ellos y permitiendo la formación de Bancos de Semen para ser utilizados en programas de selección a largo plazo. Al utilizar carneros a los cuales se 7

8 les ha evaluado su potencial de fertilidad, se incrementa la eficiencia reproductiva evitando el empleo de machos de baja fertilidad y se anula la selectividad Macho- Hembra en la cual un macho permanece con la oveja hasta que ésta se le termina el celo no mostrando interés por otras ovejas en calor. La inseminación artificial se transforma en la mejor y más eficiente herramienta de prevención y control de enfermedades; puesto que sólo califican carneros sanos para ser empleados en programas de mejoramiento animal. Permite utilizar el material genético de carneros que por accidente no pueden efectuar monta. Por otra parte, Evans et. al.(1990) señala que la utilización de la I.A. permite mantener unos registros de producción muy seguros, los que se pueden utilizar para aumentar la seguridad de la selección o para eliminar caracteres indeseables dentro del rebaño La inseminación artificial supone un ahorro de machos, lo cual reduce los gastos de mantención y alimentación, evitándose así su obligado manejo. Se cuenta con un número reducido de ejemplares, pero de alto valor genético (Evans et. al., 1990). Latorre et. al. (2000) describe cinco consecuencias del mal uso de la inseminación, como desventajas de la Inseminación Artificial. En primra instancia indica que al utilizar en forma repetida un mismo carnero y cruzarlo con su descendencia (hijas, nietas, etc.) se aumenta la consanguinidad o grado de parentesco y esto produce una disminución en la fertilidad. También señala que se puede incrementar características poco deseables; si no se efectúa un rechazo inmediato en el producto del cruzamiento defectuoso. Si se utiliza un carnero no evaluado en sus características productivas y de fertilidad se produce un retroceso en vez de una mejora en la descendencia. Si se utilizamos individuos enfermos se potencia la propagación de enfermedades. Por último menciona que por fallas de manejo del material seminal obtenido de los carneros y/o el manejo de las ovejas inseminadas la fertilidad final es reducida Tipos de Inseminación Artificial: De acuerdo a Latorre et. al. (2000), los tipos de inseminación se pueden clasificar de acuerdo de donde es depositado el semen en el tracto de la oveja, hay tres alternativas: a. Intracervical: Se deposita del semen en el interior del canal del cuello del uterino o cérvix. Requiere de una dosis mayor de semen que si se utiliza otro método. b. Transfondo vaginal: Se deposita el en el fondo de la vagina. c. Intrauterino: Se deposita el semen en la curvatura mayor de cada cuerno uterino, en el interior del cuerno. La inseminación cervical implica la desposición del semen a una profundidad de hasta 3 cm. dentro del cervix. Si, como sucede en algunos animales, el cervix permite el paso de la pipeta, el método se tranforma en insemiación intrauterina, no quirúrgica (Evans et. al., 1990). 8

9 En la Tabla 1., se puede observar los resultados de inseminación artificial con semen fresco y semen congelado. Tabla 1. Resultados de I.A. utilizado semen fresco y congelado. Técnica Semen Fresco Semen congelado Vaginal 40-50% 10-20% Cervical 40-65% 20% Transcervical 60-80% 40-70% Intrauterino 70-90% 50-80% Funte: Buckrell (2000) citado por Monografía (S/A). 3. Requerimientos La I.A. supone ciertos gastos de infraestructura, de equipos y de mano de obra especializada, aunque una vez aprendida su metodología está al alcance de cualquier ganadero (Evans et. al., 1990). Los requerimientos de infraestructura, manejos previos y posteriores a la inseminación son de vital importancia para el éxito de la técnica Infraestructura: a. Corrales de aparte: Se debe contar con corrales de aparte como se observa en la figura 1, donde diariamente son separadas las ovejas pintadas por los retajos. Estos corrales deben estar lo más cerca posible del laboratorio de inseminación (Rojas M., 2007). b. Laboratorio de Inseminación: Según Rojas, 2007 es el lugar acondicionado para el procesamiento del semen, debe ser cerrado, contar con agua limpia, calefacción, luz eléctrica y mesones para el equipo de inseminación, ver en figura 1. c. Potreros para detección de celo: Se debe contar con potreros (figura 1) capaces de mantener las ovejas programadas por 9 días con suficiente agua y pasto (Rojas, 2007). d. Bretes: En el interior del galpón se deberá mantener a los carneros reproductores, los cuáles deberán contar agua, alimento y estar protegidos de la luz solar y altas temperaturas 1, lo que se observa en la figura 1. 1 Comunicación personal Vanessa Christie, Programa de I.A. OVITEC

10 Figura 1. Potreros para detección celo, corrales de aparte, laboratorio de inseminación artificial y bretes. Fuente: Vanessa Christie. Programa I.A. Ovitec Selección Animales: El éxito de la I.A. estará ligado a la fertilidad de las hembras, así como a la calidad/fertilidad del semen utilizado (Aisen, 2004). El macho produce más crías que la hembra por lo cuál se pone mayor atención en la selección de estos Selección de carnero: Según Arancibia et. al., (2008), los carneros son los encargados de realizar las mejoras genéticas en la descendencia que dejan. Al momento de definir cuales son las características del animal que deseamos mantener, debemos saber que existen características reproductivas y productivas. Las características productivas son aquellas como: kilogramos de lana, largo de mecha, color, conformación animal, etc., y con las características reproductivas nos referimos al porcentaje de mellizos, testículos de buen volumen, etc. En figura 2 se observan carneros reproductores. Aparte de los criterios genéticos existen otros factores que se deben considerar al seleccionar los machos para un programa de inseminación artificial. Entre estos encontramos el estado de salud y el buen estado de carnes, sin engrazamiento. No deben padecer ningún tipo de enfermedad. Los machos, particularmente los recién comprados o introducidos en el rebaño, se deben someter a un examen físico y controlar su estado de salud con el fin de asegurarnos que este exento de anormalidades o enfermedades. También se deben examinar los órganos reproductores poniendo especial atención en el 10

11 tamaño y forma de los testículos y epidídimos, órganos que pueden ser palpados a través del escroto. Los testículos deben ser firmes y elásticos, carentes de lesiones y deformidades y moverse libremente dentro del saco escrotal. La cola del epidídimo se debe palpar con facilidad y tener igual tamaño y forma en ambos testículos. Si alguna parte del epidídimo se encuentra endurecida o alargada se debe sospechar la existencia de epididimitis. También se debe poner atención a la integridad del conducto deferente, en el cuello del escroto, debe estar duro y fácilmente palpable. Finalmente, también se deben inspeccionar las posibles anormalidades en prepucio, péne y, particularmente, en el proceso uretral, que puede lesionarse fácilmente al expulsarse algún calculo urinario. Un tema que a menudo se olvida al seleccionar los sementales es su capacidad de servicio y su vigor sexual, que se puede controlar mediante una prueba de servicio, en la que el macho se expone a una serie de hembras en estro. La falta de voluntad a montarlas puede que sea debida a un trauma físico, posiblemente como causa de artritis, mal de pezuñas o lesiones en el péne. Es importante que el macho seleccionado posea semen de buena calidad y en cantidad (Monografía, S/A). Latorre (2000), detalla los manejos a realizar en los carneros seleccionados, como son: Examen clínico-genital y de semen. Evitar todo stress (transporte, esquila, corte de uñas, baños, etc). Dosifiaciones, 6 a 8 semanas antes del inicio del programa de inseminación (antiparasitarios, complejo vitamínico AD3E). Conocimiento previo del área de extracción, personal, aceptación vagina, monta sobre oveja en celo en cepo (2 semanas antes). Esquila anterior y lateral a la salida del pene al prepucio. Régimen de extracciones (3 diarias por 5 días y 1 día de descanso). Régimen de semiestabulación con alimentación especial (heno, concentradosales minerales-agua). Figura 2. Machos reproductores. Fuente: Vanessa Christie. Programa I.A. Ovitec

12 Selección hembras: Con tiempo suficiente antes que comience un programa de I.A. se deberá evaluar el estado de las hembras y su preparación para la inseminación (Aisen, 2004). Los programas de I.A. y mejoramiento genético están normalmente destinados a las ovejas de alto valor genético de la cabaña o establecimiento (Cueto et. al., S/A). Según el mismo autor, se debe tener en cuenta los siguientes aspectos de nutrición, sanidad y reproductivos: Las hembras deben alcanzar 2,5 3 puntos de condición corporal un mes antes de la inseminación. Consiste en medir la disposición grasa de los músculos lumbares, situados debajo de las apófisis transversas de las vértebras lumbares (máximo 5, mínimo 0). Las ovejas deben estar libres de enfermedades y parásitos. Rechazar ovejas viejas (son menos fértiles) y con problemas de ubre (pezones ciegos, ubres cortadas, mastitis), como así también aquellas ovejas que no hubieran retenido servicio por 2 años consecutivos (Cueto et.al., S/A). Ovejas con presencia de prognatismo superior o inferior en diferentes intensidades es causal de eliminación ya que es un defecto que se hereda, mostrándose un crecimiento anormal de la mandíbula superior o inferior produciendo una mascada imperfecta que altera la ingesta de alimento. Presencia de tumores, falta de dientes ya sea por traumatismo o por edad. (Latorre et. al., 2000). En cuanto a la conformación y apariencia, el mismo autor antes señalado menciona que la presencia de manchas de color en la lana blanca y características de ésta fuera del standard de la raza como ser diámetro de fibra, largo de mecha, etc. Unas blancas no son deseables ya que son susceptibles a enfermedades de pudrición o alteración de ellas. Aplomos defectuosos que impedirán que la oveja se desplace en busca de alimento o agua. Ovejas seleccionadas para programa de inseminación artificial se pueden observar en la figura a continuación (figura 3). Figura 3. Hembras para programa de I.A. Fuente: Vanessa Christie. Programa I.A. Ovitec

13 4. Manejos previos a la I.A. Es importante señalar que el manejo de las ovejas, antes, durante y postinseminación determina en más de un 70% el éxito de la inseminación, evitando situaciones de estrés causadas por el susto, el miedo, los ladridos de perros, golpes u otros, ya que producen la liberación de hormonas en el cuerpo de la oveja (adrenalina) que actúa contra el proceso de la fecundación (Latorre et. al., 2000) Manejo de machos para retajo: Se utilizarán machos de preferencia que no presenten problemas físicos evidentes (dientes, patas, estructura en general) y que estén clínicamente sanos. La vasectomía debe realizarse a lo menos 30 días antes del inicio de la inseminación. El número de retajos a usar deberá corresponder al 7% de las ovejas en manejo (sincronización), en celo natural se puede utilizar 3% (Rojas, 2007). También se pueden utilizar machos enteros, a los que se les instala un saco que les cubre la zona prepucial ("enchalecados"). El uso de estos carneros enchalecados presenta algunos inconvenientes, siendo el más notable el hecho de que frecuentemente el "chaleco" se les cae o desvía, quedando en condiciones de preñar a las hembras y por lo tanto inhabilitándolas para la I.A. Otro inconveniente es que estos machos se deben mantener en potreros alejados de los de las hembras, para evitar que ellos se pasen y las preñen en momentos inadecuados para el manejo de la explotación (Universidad de Chile, 2000) Identificación de animales: Marcar con aretes, puntos de pintura o tiza, los grupos seleccionados a inseminar, evitando el exceso de marcas para no contaminar la lana (Rojas, 2007) Esquila de ojos y/o cola: Según corresponda la necesidad de cada baño. La esquila de cola es muy importante para la higiene, evitar la acumulación de fecas (cascarrias). Todos estos manejos deben hacerse con al menos 2 o 3 semanas de anticipación (Rojas, 2007) Sincronización de celo: Los métodos de sincronización de celo son de gran utilidad para alcanzar mejores resultados en los mejoramientos genéticos, para facilitar el trabajo de inseminación artificial o servicio natural, permitiendo entre otras ventajas, un mejor uso de carneros o la realización de la inseminación artificial o servicio natural fuera de la época reproductiva (Arancibia et. al., 2008). Según Cueto et. al., se pueden dividir en: farmacológicamente y naturales. Cualquiera que sea el método hormonal para inducir la presentación y concentración de determinará que el trabajo se realice en un período no mayor a 5 días pudiéndose alargar el repaso o control al retorno al celo en una segunda etapa entre 7 y 10 días dependiendo del ritmo del ciclo sexual de cada oveja. Algunas ovejas repiten 13

14 celo cada 9 días, la gran mayoría cada 17 días (Concha et. al., 1967 citado por Latorre et. al., 2000) Método Farmacológico: Tiene la ventaja de concentrar un alto porcentaje de celos en un período corto de tiempo, lo que facilita la programación y realización de los trabajos de I.A. Para esto se utilizan sustancias comerciales disponibles en el mercado. a. Prostaglandina sintética: Simula la acción de la hormona prostaglandina F2 alfa, agente luteolítico liberado por el útero, acortando la vida del cuerpo lúteo. Por este motivo, sólo pueden utilizarse durante la estación reproductiva (Cueto et. al., S/A). Según Rojas (2007), se pueden utilizar dos inyecciones separadas por 10 a 12 días o una sola dosis. Con 2 dosis el celo se manifiesta el 2º día después de la segunda aplicación concentrando un 100% de las ovejas en un período de 5 días app. En una sola aplicación se puede alcanzar una concentración de celos del 65-75%. Debido a la menor fertilidad de los estros inducidos hormonalmente, es preferible inseminar sobre un segundo celo post-sincronización (celo natural), comenzándose con la detección de celos a partir del día 16 post-aplicación y durente un período de 5 días (Cueto et. al., S/A). b. Progesterona: De acuerdo a Cueto et.al. (S/A) y Latorre et. al. (2000), a través de dispositivos (esponjas, T) que liberan progesterona lentamente simulan la acción del cuerpo lúteo. Estos dispositivos son colocados en la vagina de la oveja por días, al retirarse presentan celo al 2º a 3º día. Se puede asociar a otras hormonas para estimular la ovulación como la PMSG (200 y 400 UI), la que se administra por inyección intramuscular al momento de retirar las esponjas, pudiendo presentar un 85-95% de ovejas en celo. Se puede utilizar en anestro. Ver figura 4. Figura 4. Esponja con progesterona y aplicación. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A. Ovitec Métodos Naturales: El más conocido es el efecto macho, que si bien da buenos resultados no es tan efectivo ni preciso como los métodos farmacológicos (Arancibia, 2007).La actividad sexual de las ovejas puede ser inducida al comienzo de la estación, por la acción que sobre la fisiología reproductiva, ejerce la incorporación de machos en una majada de hembras que haya permanecido aislada de los mismos por un período de 4 semanas. Este último estímulo sexual se denomina efecto macho. Si bien es un método 14

15 económico, se observa una concentración de celos variables. Se utiliza machos jóvenes vasectomizados en una proporción del 4% preferentemente no borregos y en buen estado corporal. Para este método sea efectivo es necesario que un gran porcentaje de hembras se encuentren en anestro, próximas al inicio de la estación de reproductiva. Entre el 40 y 100% de las ovejas en anestro estacional responde ante la presencia de los machos, presentando 2 momentos de concentración de estros, alrededor de los 18 días y 24 días post introducción de los machos (Cueto et. al., S/A) Detección de celo: Cualquiera que sea el tipo de animal empleado para la detección de celos, estos deben ser provistos de algún dispositivo que permita reconocer a las hembras en celo que han sido montadas. Existe en el mercado diferentes modelos de "arneses marcadores" (figura 5). Estos se instalan en el pecho del animal celador y presentan una cera coloreada que imprime una marca en la grupa de las ovejas en celo. Aún cuando el uso de estos arneses puede resultar cómodo, en la práctica se ha observado que son de baja eficiencia, fundamentalmente porque la consistencia del material marcador es inadecuada, sobretodo cuando la temperatura ambiental es baja, como ocurre en la zona austral del país, o bien, porque el dispositivo marcador se desprenda del soporte, impidiendo marcar las hembras en celo. Como alternativa a este sistema, se ha probado una mezcla de aceite comestible y tierra de color (figura 6), con la que se empapa diariamente el pecho de los celadores. Este método artesanal ha resultado muy eficiente y barato, logrando detectarse casi la totalidad de las hembras en celo (Universidad de Chile, 2000). De acuerdo a Latorre et. al. (2000), el arreo de la oveja a los corrales de aparte deber ser realizado con calma, sin perros, ni golpes. Los retajos se introducen la tarde anterior en el rebaño a ovejas a inseminar. Por lo general, se realiza un aparte de ovejas marcadas en la mañana entre las 8:00 y 9:00 am. (figura 6), apartando las ovejas marcadas a un potrero conjunto en espera de su inseminación, de 1 a 2 horas después del aparte. Es recomendable repintar los retajos con aceite y tierra color cada dos días. 2 Figura 5. Arnes marcador y chaleco para macho entero. Fuente: Monografías S/A. 2 Comunicación personal, Vanessa Christie, Programa I.A. OVITEC

16 Figura 6. Aplicación de pintura retajo y aparte de ovejas marcadas. Fuente:Vanessa Christie. Programa de I.A. Ovitec Preparación de laboratorio inseminación: Las instalaciones utilizadas como laboratorio se deberán higienizar previo a la instalación de los instrumentos, desinfectando con cloro o algún desinfectante paredes y suelo. Una vez realizada la limpieza, se podrá instalar todo el equipo necesario para a inseminación 3. De acuerdo a lo publicado por Rojas (2007), se deberá determinar dos zonas en el laboratorio, una zona limpia donde se instalará todo el material de vidrio, entre otros (termo con agua, pistola de inseminación, etc); y una zona sucia para los materiales menos limpios, como por ejemplo vaginas artificiales, gomas vaginales, etc. Ver materiales utilizados en laboratorio Anexo 1. Según el mismo autor citado anteriormente, la sala de inseminación debe encontrarse a 20ºC app. En figura 7 se puede observar un laboratorio instalado. 6. Preparación del Equipo de inseminación: Al instalar el equipo (ver anexo 1) en el laboratorio, se deberá organizar bien la ubicación de los instrumentos para mantener el orden al momento de realizar la inseminación. También es importante preparar los equipos que son necesarios tener preparados antes de la extracción de semen, como son el termo para mantener el semen diluido el que debe encontrarse entre 30-32º C, en un matraz calentar 100 ml. de leche descremada tapada con papel aluminio durante 8 minutos a baño maría, y dejar reposar hasta llegar a 30-32ºC. Todos los materiales deben estar muy bien tapados, para evitar 3 Comunicación personal, Vanessa Christie, Programa I.A. OVITEC

17 posible contaminación (Arancibia et.al., 2008., Universidad de Chile, 2000 y Latorre. 2000). Figura 7. Laboratorio instalado. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A Inseminación Una vez preparado y ubicado todo el material se procede a realizar el trabajo de inseminación, el que se realiza siguiendo el orden a continuación descrito Armado vagina artificial: La vagina simula las características de la vagina de la oveja, en cuanto a lubricación, temperatura y presión. Puede ser fabricada de metal, caucho o PVC, con una goma interna y una capa o tubo de vidrio que se adosa en un extremo. Es en esta copa donde el semen es recibido producida la eyaculación, después de la monta (Latorre et. al., 2000). Colocar goma de vagina en vagina artificial y amarrar con un elástico en el extremo superior de la vagina. En el extremo inferior se rellena ¾ de la vagina con agua entre 46-47ºC y se cierra con elástico, al interior de la vagina deberá encontrarse entre 39-40ºC y estar muy seco. En la parte inferior se colocará en vaso colector, el que puede realizarse con la ayuda de gel íntimo y proteger la vagina y vaso recolector con una cobertura para que no pierda temperatura (paño, frazada, etc.). Y 17

18 por último se ingresa aire por medio de la válvula, para entregar presión a la vagina 4. Ver partes de vagina artificial y armado de esta en figura 8. Figura 8. Partes de una vagina artificial y su armado. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A Recolección del semen y manipulación: Es aconsejable excitar al animal previamente, para obtener un buen volumen de eyaculado. Para esto se utilizan las mismas ovejas en celo, se coloca una oveja en el cepo ( figura 9) y se deja que el carnero intente saltar varias veces, siempre impidiendo que logre la monta y el eyaculado, a la 3 o 4 vez se utiliza la vagina artificial para la recolección del eyaculado. Para realizar la recolección del eyaculado, el operador se coloca de rodillas a un costado del animal, en espera que el macho salte (figura 9). Es importante que antes de llevar al carnero frente a la oveja, sea limpiado el prepucio del carnero con un a toalla de papel para evitar contaminación, además de cortar los pelos prepuciales. Cuando el macho se monta sobre la oveja desviar el pene hacia la vagina artificial tomándolo del prepucio, para evitar la retracción del órgano. Luego, la vagina artificial se coloca en posición vertical, de manera que el semen vaya cayendo en la copa por efecto de gravedad, es importante que la copa se mantenga bien cubierta sin golpes de temperatura ni presencia de luz. De esta forma es llevada a laboratorio para su observación y análisis (Arancibia et. al., 2008). Se quita la presión al abrir la válvula, teniendo la precaución de que no salpique agua cerca del tubo de recogida de semen, se etiqueta, se tapa y se coloca en un baño a 30 C (Monografía, S/A). 4 Comunicación personal, Vanessa Christie, Programa I.A. OVITEC

19 Figura 9. Extracción de semen. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A Rojas (2007) señala que el semen debe ser protegido en el interior del laboratorio, teniendo extremo cuidado con la exposición a la luz, agua, polvo, cambios de temperatura, etc. El semen debe someterse a una evaluación (figura 10), que consiste en un examen macroscópico directo (evaluación primaria) y un examen bajo microscopio (evaluación secundaria). El examen macroscópico se realiza directamente en la copa de recolección y debe evaluar las características: volumen (ml.), color (blanco cremoso, blanco lechoso, nebuloso, acuoso), olor (inoloro), y movimiento de masa (muy bueno, bueno, regular, malo). La evaluación microscópica debe considerar, al menos, el movimiento progresivo y el recuento espermático (Monografía, S/A). A veces es posible colectar dos saltos en la misma vagina, entonces el volumen del semen puede superar los 3 ml y cuando no es importante individualizar al padre en la descendencia se puede colectar con la misma vagina saltos de diferentes carneros y se analiza como pool de semen ; superando los 5 o 6 ml dependiendo de cuantos carneros saltan sobre la misma vagina (Latorre et. al., 2000). El semen fresco puede ser utilizado tal como se recolecta o puede ser diluido. En general se prefiere diluir el semen, ya que con ello se aumenta el volumen a inseminar, haciéndose más fácil el manejo y la dosificación del semen (Universidad de Chile, 2000). La dilución del semen obtenido se realiza en forma aproximada, asegurándose una cantidad de 100 a 150 millones de espermatozoides totales por dosis de inseminación de 0,02-0,25 cc (Cueto et.al, S/A). De acuerdo a Latorre (2000) y Universidad de Chile (2000), el diluyente natural más utilizado es la leche vaca descremada, sometida al proceso "UHT", la que se recomienda calentar a C por 8-10 min en baño María, para eliminar la presencia de posibles factores proteicos que pueden alterar la capacidad fertilizante de los espermatozoides. El diluyente se debe encontrar a 30-32ºC a baño maría al igual que el semen, y se debe agregar gota a gota por medio de una pipeta limpia, seca y entibiada, haciendo rotar suavemente la copa que contiene el semen. Latorre (2000) también señala 19

20 que dependiendo del número de ovejas inseminar por carnero, la dilución puede ser: 1:1, 1:2, 1:3 y 1:4. Se conocen diferentes tipos de diluyentes que pueden ser agrupados en sintéticos y naturales. Como diluyente natural se describe el agua de coco y la leche descremada en polvo o fluida de vaca; y entre los sintéticos el citrato-yema de huevo, glucosa, agua destilada y otros (Latorre et. al., 2000). La fertilidad obtenida con la I.A. con semen fresco concentrado o diluido, según la literatura es muy variable, encontrándose valores que oscilan entre un 34 % y un 81,8%. Sin embargo, en nuestra experiencia, hemos observado que es posible aumentar los porcentajes de fertilidad, pudiéndose llegar a un 90-93%, cuando se es estricto en los procedimientos (Universidad de Chile, 2000). Figura 10. Evaluación del semen. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A Armado inyector: Arancibia et. al. (2008) y Rojas (2007), mencionan que el inyector esta formado por una cánula larga y es un émbolo accionado por una varilla dentada el encargado de dosificar (figura 11). La punta del émbolo debe ser untada en la dilución y colocar la cánula de vidrio hasta que llegue al tope de la posición, se le coloca el casquillo que asegura la cánula, es muy importante regular el inyector antes que este sea utilizado (3 dientes). El inyector y pistola debe mantenerse a una temperatura de 28º a 30ºC y limpio, y una vez cargado no se debe exponer a golpes de temperatura, luz o contaminación (figura 11). 20

21 Figura 11. Inyector. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A Inseminación Artificial Intra-cervical: Las hembras se presentan inclinadas cabeza-abajo, con los cuartos traseros montados sobre una baranda o riel. También mediante un brete giratorio o carrito situado en la ventana de I.A. (Cueto et. al., S/A). El mismo autor indica que la vulva de la oveja debe ser limpiada con una toalla de papel e introducir lentamente hasta el fondo de la vagina el vaginoscopio, donde se localiza el orificio de entrada al útero (cérvix), donde se guía el inyector y es introducido mediante suaves movimientos giratorios, se procede a la descarga (3 disparos), se retira vaginoscopio e inyector. Evans et. al. (1990), señala que se debe evitar introducir el espéculo por la fuerza, ya que esto puede ocasionar lesiones en los tejidos. También menciona que si en la vagina se observa cualquier material extraño se debe elimar, antes de la inseminación, con la ayuda de unas pinzas largas. En Figura 12 se observa cérvix e inseminación. Figura 12. Cervix e inseminación. Fuente: Vanessa Christie. Programa de I.A

22 8. Manejo post- inseminación. Realizada la inseminación artificial, es recomendable realizar manejos post inseminación, lo que se señala a continuación: 8.1. Manejo oveja: Arancibia et al. (2008) y Cueto et. al. (S/A), señalan que posteriormente a la inseminación se deben dejar a las ovejas libres de estrés, permaneciendo de 2 a 3 minutos en posición de inseminación y luego en un brete contiguo a los machos un par de horas, de esta forma se favorece la retención y transporte de los espermatozoides, la oveja se debe identificar y completar el registro Repaso con carneros: Finalmente, si se desea hacer un repaso con carneros al final de la temporada reproductiva, los machos enchalecados no son aptos, ya que por el hecho de haber permanecido durante un largo periodo con las hembras, pierden paulatinamente el interés por ellas (Universidad de Chile, 2000). Evans et. al. (1990), señala que se suele introducir los sementales 10 a 12 días terminada la inseminación, se utilizan 2% de machos enteros cuando las ovejas no fueron sincronizadas, cifra que sube a 3-4% cuando se sincronizan en el ciclo anterior. 22

23 III. COMENTARIOS FINALES De acuerdo al objetivo planteado, se puede mencionar que: La inseminación artificial intra-cervical es una herramienta eficaz que ayuda al mejoramiento genético del ganado en la región. Esta técnica es de fácil implementación y realización respecto a la inseminación intrauterina, pero todo va a depender de los resultados que el ganadero espera respecto a su mejoramiento genético y a lo que este dispuesto a invertir. Los resultados (%) de la técnica dependerán de la utilización de semen congelado o semen fresco, y de los cuidados de manejo que s realizen antes, durante y después de la I.A. Cada una de las etapas descritas son indispensables para el éxito de este manejo, que es de gran ayuda para incrementar la progenie de los mejores reproductores existentes en la majada, y así obtener las características deseadas en cuanto a la producción de carne y lana. La inseminación vaginal puede ser útil cuando el tiempo y las disponibilidades de factores (como instalaciones) sean factores limitantes o para inseminar ovejas virgenes donde no se permite la penetración del espéculo. La inseminación artificial es un método relativamente fácil de aplicar donde la deposición de semen es mucho más profunda que el método inseminación vaginal, lo que aumenta el índice de fertilidad. La inseminación intrauterina tiene mayor utilidad en los programas de transferencias de embriones y con semen congelado. Es una técnica mucho mas invasiva, que requiere de una minicirugía para la exposición de los cuernos (embriones) o la visualización de los cuernos uterinos (semen congelado) a travéz de un tocar o catéter. Cualquier ganader puede implementar su predio para realizar inseminación artificial, los requerimientos de infraestructura como de equipos son los mismos para un pequeño o un productor grande. 23

24 IV. BIBLIOGRAFIA AISEN E., (2004). Reproducción ovina y caprina. Editorial Intermédica. Buenos Aires, Argentina. 206 pág. ARANCIBIA L., y BRADASIC P., (2008). Mejoramiento genético ovino para pequeños ganaderos. Departamento de Fomento. Instituto de Desarrollo Agropecuario. Punta Arenas, Chile. 85 pág. CUETO M. y GIBBONS A., (S/A). Manual de inseminación artificial en especie ovina. Reproducción y genética. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Centro regional Patagonia Norte. 18 pág. EVANS G. y MAXWELL W., Inseminación Artificial de Ovejas y Cabras. Editorial Acribia. Zaragoza. España. 192 pág. LATORRE E., Curso de Inseminación Artificial Intra-Cervical en Ovinos. Instituto de Desarrollo Agropecuario. INIA-Kampenaike. Punta Arenas. 71 pág. LATORRE E. y SALES F Inseminación artificial ovina en la XII Región. I y II parte. Boletín INIA N 48. Instituto de Investigación Agropecuaria. Fundación para la innovación agraria. Punta Arenas, Chile. MONOGRAFÍAS, S/A. Técnicas de Inseminación artificial en ovinos. On line. Disponible en: Conectado el 05 de septiembre de ROJAS M., (2007). Inseminación artificial ovina con semen fresco por vía intracervical. Manual de Procedimientos OVITEC. Punta Arenas. 25 pág. UNIVERSIDAD DE CHILE, Monografías de Medicina Veterinaria. Inseminación artificial en ovinos. Principales procedimientos para I.A. en ovinos. Vol 2, nº2. On line. Disponible en: D18373%2526ISID%253D452%2526PRT%253D18371,00.html. Conectado 05 de Septiembre del

25 V. ANEXOS Anexo 1. Materiales Termómetro. Vagina artificial ovina. Mangas internas de goma. Copas de recolección de Semen. Protector de Copa. Protector de vagina. lubricante para vagina. Pipetas de inseminación ovina. Pistola de inseminación ovina. Vaginoscopio. Baño maría o termo para mantener la temperatura de diluyente y/o semen. Toalla Nova, Alcohol Destilado. Detergente. Cepillos. Leche Descremada. Matraz. Elásticos. Pinza para matraz. Porta y cubre objetos. Microscopio. Agua Destilada. 25

26 Anexo 2. Calendario de Manejo de Programa I.A. Manejo Selección Animales Vasectomía machos Aplicación Prostaglandina I.A. Repaso Carnero Fecha app. 30 días antes I.A. (Abril) 30 días antes I.A. (Abril) 16 días antes I.A. Mayo aproximadamente. 12 días después I.A. 26

27 Anexo 3. Colocación y retiro esponja con prostaglandina. 1. Rocíar externamente las esponjas con un antibiotico en aerosol o polvo sin corticoides. 2. Se comprime e introduce la esponja en el extremo bicelado del aplicador, cuidando que elhilo cuelgue hacia afuera. 3. Se coloca el vástago dentro del aplicador por el extremo libre hasta que haga contacto con la esponja. 4. Se humedece el extremo del aplicador con un desinfectante. 5. Se introduce el aplicador y el vástago suavemente hasta el fondo de la vagina de la hembra que está en posición natural. 6. Se retira el tubo aplicador unos 3-4 cm manteniendo el vástago en su sitio hasta liberar la esponja. 7. Al retirar la esponja, se tira firme pero suavemente el hilo hacia atrás, manteniendo una leve inclinación hacia abajo. Si no se presenta el hilo verificar con un vaginoscopio, que la esponja no se encuentre en el interiror de la vagina. 27