Cartilla para Estudiantes. Trabajo Práctico Nº1: Microscopía Técnicas Histológicas. Cátedra de Histología Normal y Elementos de Histopatología

Transcripción

1 Cartilla para Estudiantes Trabajo Práctico Nº1: Microscopía Técnicas Histológicas Cátedra de Histología Normal y Elementos de Histopatología Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia U.N.T. 2017

2 TEMARIO: TRABAJO PRACTICO N 1: MICROSCOPÍA - TÉCNICAS HISTOLÓGICAS MICROSCOPIA: Niveles de observación en citología e histología. Microscopio óptico común: sus partes (óptica y mecánica). Indice de refracción y del poder de resolución. Microscopios ópticos especiales: Sus indicaciones. Microscopio electrónico: características principales. Unidades de medidas utilizadas- en la microscopía óptica y electrónica. TÉCNICAS HISTOLÓGICAS: Métodos de rutina para microscopía óptica y electrónica: fijación, deshidratación, inclusión, corte, tinción y montaje. Importancia del corte por congelación. Colorantes ácidos y básicos. Acidofilia, basofilia y metacromasia. Fundamentos y ejemplos de la Histoquímica, Inmunohistoquímica y Radioautografía.

3 OBJETIVOS: Que el alumno sea capaz de: Reconocer las partes constitutivas y las propiedades del M.O. Manejar adecuadamente el M.O. Conocer las características y utilidades de los distintos microscopios. Comparar las características y funcionamiento del M.O. y del M.E. Conocer los pasos fundamentales en el procesamiento de un material biológico para estudio histológico y citológico. Familiarizarse con los conceptos de acidofilia y basofilia; ortocromasia y metacromasia. Reconocer los fundamentos y utilidades de las técnicas de coloración de rutina en Histología y Citología. Conocer los fundamentos y aplicaciones de técnicas histológicas especiales.

4 1-a) Señale las partes del microscopio óptico y diga que función cumple cada una.

5 b) Reconozca cada una de las partes individualizadas del MO y explique su funcionamiento.

6 2- En el siguiente esquema comparativo de los diferentes tipos de microscopios, señale en cada uno: a) Fuente de radiaciones b) Lente condensador c) Lente objetivo d) Lente ocular o de proyección e)ubicación de la muestra f) Lugar donde se forma la imagen.

7 3- Complete el siguiente cuadro indicando a qué microscopio corresponden cada una de las columnas del cuadro. Justifique su respuesta Poder de resolución Aumento máximo Espesor de los cortes de la radiación utilizada 200 nm 0,5 nm 2,5nm 1500x x x 5-10um <5nm Luz visible nm 0,002nm 0,007nm

8 4- Que tipo de microscopio se utilizó para obtener las siguientes imágenes? Fundamente su elección e indique que información estructural le ofrece cada una de las imágenes. Células caliciformes Condrocitos Pelo

9 5- Utilizando las imágenes describa los pasos de la técnica histológica para la microscopia óptica (fijadores, colorantes, medio de inclusión, aparato para realizar el corte).

10 Hema toxilina Agua Cte Agua Dest Eosina Ol 96º Ol 96º Ol 100º Ol 100º Xilol Xilol

11 6- a) Qué técnica se empleó para obtener la siguientes imágenes? Utilizando el esquema describa su fundamento y diga en qué casos se utiliza.

12 b) Explique en qué consisten los cortes por congelación, su importancia y en qué casos se utilizan.

13 7- a) Describa como actúan un colorante ácido y uno básico. Defina los conceptos de acidofilia y basofilia. b) En las microfotografías indique las afinidades tintoriales de las distintas estructuras. Fundamente su respuesta.

14 8- Identifique que coloración se utilizó en cada una de las siguientes microfotografías y explique los resultados.

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16 9- a) Fundamente el fenómeno de la metacromasia. b) Describa las estructuras metacromáticas en estos ejemplos. Cartílago Hialino

17 10 - Describa el método empleado en las siguientes imágenes para poner en evidencia distintos componentes de los tejidos. Incorporación de un factor de crecimiemto- I 125 en la zona apical de una célula intestinal

18 Bibliografía Eynard, Valentich, Rovasio. Histología y Embriología del ser Humano. Bases celulares y moleculares. 4º ed., Ed. Médica Panamericana, Geneser, Finn. Atlas Color de Histología. 1º ed. E. Médica Panamericana, Geneser, Finn. Histología. 4ª ed., Ed. Medica Panamericana, 2015 Hib, J. Histología de Di Fiore. Texto y Atlas. Ed. El Ateneo, Ross, M, Pawlina, W. Histología Texto y Atlas Color con Biología Celular y Molecular. 6º ed., Ed. Médica Panamericana, Sobotta, Histología, 5 ed., Ed. Médica Panamericana, 2008.