Dr. Horacio Decanini Arcaute Anatomopatólogo

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1 Dr. Horacio Decanini Arcaute Anatomopatólogo

2 Consenso general Introducción: La sobre- expresión del gen Her / 2 neu se encuentra Asociada con comportamiento agresivo y es considerada Como factor predictivo negativo en el adenocarcinama de La glándula mamaria

3 PROTOONCOGÉN FUNCIÓN NORMAL CÁNCER ASOCIADO K-ras Molécula de trasducción de señales Colorectal, vejiga CDK2,4 Regulan las fases del ciclo celular Vejiga, mama Ciclinas c-erbb RARα Se unen a CDK y regulan el ciclo celular Receptor transmembrana de factores de crecimiento Factor de transcrición dependiente de hormonas Pulmón, esófago Glioblastomas, cervical, mama Leucemia promielocítoca aguda c-raf Trasducción de señales Estómago c-kit Trasducción de señales Sarcomas c-fos Factor de transcripción Osteosarcomas c-myc Factor de transcripción Linfomas, pulmón, leucemias

4 Carcinoma invasor Su Solo relación una baja con proporción la genética y de la ellas identificación evolucionan de estas alteraciones a carcinoma, cada por vez lo tanto adquieren la progresión mas valor no en es el obligatoria diagnóstico. Evolución celular en el cáncer de glándula mamaria Epitelio normal hiperplasia tipica hiperplasia atípica Carcinoma ductal in situ

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8 TEJIDO CONGELADO : INMUNOHISTOQUIMICA MARCADORES MOLECULARES BANCO DE TEJIDOS TEJIDO FRESCO ESTERIL: CULTIVO CELULAR CITOGENETICA TEJIDO FRESCO NO ESTERIL GLUTARALDEHIDO PARA ME FACS.PLOIDIA IMPRONTAS PARA HISF(FISH) TEJIDO FIJADO EN FORMOL INCLUIDO EN PARAFINA Y PLASTICO HISTOLOGIA CONVENCIONAL INMUNOHISTOQUIMICA Pinkerton R. Lancet 1994;344:

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14 Her 2 La guia comprende de revisión de la literatura de : Medline Pre Medline Cochrane Collaboratoio Library ASCO and CAP abstracts from Abstracts from the Breast Cancer Symposium ( 2000-

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17 El mecanismo primario de Her/ 2 es la sobre-expresión Her/ 2 se encuentra amplificado en 18-20% de los carcinomas mamarios La amplificación de Her/ 2 esta asociada a: Alto riesgo de recurrencia y mortalidad Resistencia relativa a la terapia endócrina menores resultados utilizando algunas quimioterapias (No antraciclinas no Taxanos)

18 Se han diseñado agentes en contra del blanco de Her/ 2 neu Trastuzumab fue aprobado por FDA en 1998 para enfermedad metastásica Como adyuvante Trastuzumab reduce el riesgo de recurrencia local y mortalidad En un tercio aaproximadamente El costo de un año con Trastuzumab es de a USD Trastuzumab correlaciona copn cardiomiopatía en 5 a 15 % de los pacientes Y presentan falla cardiaca congestiva 2 a 4 % de los pacientes

19 20 % de los estudios realizados para probar Her / 2 son inadecuados Her / 2 Inmunohistoquimica FISH

20 ASCO/ CAP Se recomienda de rutina realizar Her/2 en pacientes con adenocarcinoma mamario Se recomienda validar la realización de las pruebas para Her / 2 Metodololgía específica

21 Como deben de ser consideradas validas las mediciones Controles positivos y negativos Internos y externos Mediciones Binarias Sensibilidad % depositivos cuando se evaluan verdaderos positivos Especificidad % de negativos cuando se evaluan verdaderos negativos Adecuado: % de concordancia entre la muestra evaluada y el estándar de oro Mezclando especificidad y sensibilidad en un solo numero se Conoce el verdadero estado de la prueba

22 Existe un algoritmo para Her / 2? Cuales son las estrategias para ayuda en realización e interpretación y reporte de las pruebas y resultados?

23 M G0 G1 S

24 Se evaluara exclusivamente en el componente infiltrante y la tincion de Membrana Interpretación: Negativo 0 : Ausencia de tinción de membrana o tinción en menos del 10% de las células Negativo 1+ :Tinción de membrana débil e incompleta en menos del 10% de las células. Limítrofe 2+ :( dudoso) Tinción completa de membrana, débil o moderada en más del 10% de las células o tinción completa e intensa en % de las células. Positivo 3+ : Tinción de membrana completa e intensa en más del 30% de las células. Con la finalidad de indicar estudio adicional se incluyen en 2+ aquellos casos de Interpretación difícil o cuando existe mala fijación o tinción del tejido mamario normal

25 Her/ 2 FISH Se evaluara solo el componente infitlrante Se evaluarán al menos 20 células en al menos dos areas tumorales distintas Interpretación ( técincas de doble sonda) No amplificado: Proporción de señales del gen Her 2 Frente a señales del lcromosoma 17 menor a 1.8 Amplificado: Proporción de señales del gen de Her 2 Frente a señales del cromosoma 17 mayor de 2.2 Limitrofe: Proporción de señales del gen de Her 2 Frente a señales del cromosoma 17 entre 1.8 y 2.2 Polisomia: Numero de señales del centrómero 17 Poro arriba de 3 Monosomia Numero de señales del centrómero del Cromosoma 17 por núcleo menor a 1.5

26 No interpretable: No hay señales de una u otra sonda en al menos 20 células Si las señales son débiles e inexistentes en más del 25% de las células No es posible valorar como mínimo dos arreas diferentes de carcinoma Infiltrante Los controles no muestran el resultado esperado En algunos casos de Monosomias 17 la relación de 2 o mas es causada por la existencia de una sola copia del centrómero 17 y dos copias del gen Her 2, por lo que estos casos no deberian de reportarse como Amplificados.

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30 Criterios de calidad para la determinación de Her / 2 en cáncer de mama Adecuada dotación de recursos humanos e infraestructura. Estandarización de los procesos y procedimientos Uso de kits aprobados por agencias reguladoras y sin modificación del protocolo recomendado. Validación inicial del método con 25 casos positivos y negativos y cotejando los resultados con centro de referencia Numero de determinaciones para garantizar la suficiencia técnica IHQ 250 determinaciones FISH 100 determinaciones Utilización de controles adecuados para cada ronda de determinación y capacitación y formación periódica del personal que los realiza Participación al menos semestral en SEAP, UK NEQAS, Nordi,QC con resultados óptimos en el 90% de las determinaciones evaluadas Se recomienda certificación der los laboratorios

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34 Ca gástrico

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37 Her/ 2 neu Adenocarcinoma gastrico

38 El cáncer gástrico es la segunda neoplasia más frecuente a nivel mundial, representando el 3-10% de las muertes por cáncer. El 95% de los tumores gástricos son adenocarcinoma. El 65% se presentan en etapas avanzadas (T3/T4) y 85% presentan metástasis ganglionares. La sobrevida a 5 años, en pacientes con tumores resecables es de 10% a 30%. En el cáncer gástrico se han realizado estudios de inmunohistoquímica (IHQ) que reportan una frecuencia de expresión de HER2/neu del 8 al 91%. Algunos estudios han mostrado que la expresión de esta proteína se asocia con mal pronostico, mientras que algunos otros no han encontrado una asociación.

39 Se observó en el 35% de los carcinomas gástricos, y se asoció positivamente con la edad, género y la presencia de metástasis ganglionares pero no con otras variables. Mizutani y cols22 reportaron una frecuencia en la expresión del gen en el 14.2% y esta se correlacionó con la profundidad de invasión tumoral, tipo histológico, patrón de crecimiento y presencia de metástasis a hígado. Dong y cols, reportaron una frecuencia de expresión de 15.9% y mediante análisis univariado encontraron que tanto la expresión como la edad (mayores de 60 años), tamaño tumoral (tumores mayores de 5 cm) y etapa clínica avanzada tienen un mayor peso como factorespronósticos. Yonemura y cols, encontraron correlación positiva entre la intensidad de tinción inmunohistoquímica y el tamaño tumoral, invasión a serosa y metástasis ganglionares. Todoslos estudios antes mencionados muestran una frecuencia relativamente de baja de expresión (9-38%). Relación entre la expresión HER2/neu y el género, edad y presencia de metástasis ganglionares

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44 ALGORITMO

45 FISH

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49 Must at least see a cluster of 5 stain tumor cells for biopsy and at least 10% stained tumors cells for surgical specimens

50 Excluir: Metaplasia intestinal Tincion de lamina basal Tncion de luces Artificios creados por compresión extracción O tinción de fondo, Tinción heterogénea

51 2+

52 3+

53 Dr. Horacio Decanini Arcaute Anatomía Patologíca

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