GUÍA DE LABORATORIO Nº 1 MEDIOS DE CULTIVO. OBJETIVO Comprender la utilidad de los medios de cultivo en el trabajo microbiológico.

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José Ramón Carrizo Aguilar
hace 6 años
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1 GUÍA DE LABORATORIO Nº 1 MEDIOS DE CULTIVO OBJETIVO Comprender la utilidad de los medios de cultivo en el trabajo microbiológico. MATERIALES Placas de agar sangre y agar McConkey. Tubos con agar TSI, agar LIA, agar citrato y agar urea. Tubos con caldo nutritivo, caldo peptonado y Lowestein Jensen Gradilla, mechero, placa petri, asa de siembra. PROCEDIMIENTOS EXPERIENCIA 1: Medios de cultivo enriquecidos Examinar cuidadosamente la placa con el medio de cultivo. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. Agar Sangre 1. En qué casos se utiliza este medio de cultivo? EXPERIENCIA 2: Medios de cultivo selectivos Examinar cuidadosamente la placa con el medio de cultivo. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. Agar McConkey - 1 -

2 1. En qué casos se utiliza este medio de cultivo? EXPERIENCIA 3: Medios de cultivo de enriquecimiento y selectivos Examinar cuidadosamente los tubos de ensayo con los medios de cultivo. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. Caldo nutritivo Caldo peptonado 1. En qué casos se utilizan estos medios de cultivo? EXPERIENCIA 4: Medios de cultivo diferenciales Examinar cuidadosamente los tubos de ensayo con los medios de cultivo. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. Agar TSI Agar LIA Agar Urea Agar Citrato 1. En qué casos se utilizan estos medios de cultivo? CUESTIONARIO 1. Qué es un medio de cultivo? 2. Cómo se clasifican los medios de cultivo de acuerdo a su consistencia? Ejemplos. 3. Cómo se clasifican los medios de cultivo según su composición? Ejemplos. 4. Para qué se utiliza el medio de Löwenstein-Jensen? - 2 -

3 GUIA DE LABORATORIO N 2 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO OBJETIVOS Reconocer microscópicamente los caracteres morfológicos de diferentes grupos de bacterias. Observar el crecimiento bacteriano y determinar los factores que influyen en este proceso. MATERIALES 5 tubos de ensayo con tapa, leche fresca, colorante azul de metileno y gradilla. Láminas fijadas y coloreadas de bacterias Gram positivas, negativas y acido alcohol resistentes, aceite de inmersión, papel lente. PROCEDIMIENTOS EXPERIENCIA 1: Observación de bacterias grampositivas Examinar cuidadosamente la lámina coloreada, buscando identificar las formas bacterianas. Esquematizar las observaciones e interpretar y anotar los resultados. Bacteria grampositva 1. Cuáles son las principales bacterias grampositivas y los cuadros clínicos asociados a estas bacterias? EXPERIENCIA 2: Observación de bacterias gramnegativas Examinar cuidadosamente la lámina coloreada, buscando identificar las formas bacterianas. Esquematizar las observaciones e interpretar y anotar los resultados

4 Bacteria gramnegativa 1. Cuáles son las principales bacterias y cuadros clínicos asociados a estas bacterias? EXPERIENCIA 3: Observación de bacterias ácido-alcohol resistentes Examinar cuidadosamente la lámina coloreada, buscando identificar las formas bacterianas. Esquematizar las observaciones e interpretar y anotar los resultados. Mycobacterium tuberculosis 1. Cuáles es el principal cuadro clínico asociado a esta bacteria? EXPERIENCIA 4: Determinación del crecimiento bacteriano Enumerar 5 tubos y colocar 3 ml de leche fresca con las siguientes características: - Por 6 días a temperatura ambiente (tubo 1) - Por 4 días a temperatura ambiente (tubo 2) - Por 2 días a temperatura ambiente (tubo 3) - Por 6 días en refrigeración (tubo 4) y - Recién abierta al momento de la práctica (tubo 5) Dejar reposar los tubos durante unos minutos

5 Tubo #1 Tubo #2 Tubo #3 Tubo #4 Tubo #5 Agregar a cada tubo 5 gotas de azul de metileno y agitar enérgicamente hasta obtener un color homogéneo. Tapar los tubos y anotar el color inicial. Empuñar los tubos por 30 minutos. Observar y anotar los resultados. Tubo #1 Tubo #2 Tubo #3 Tubo #4 Tubo #5 1. Qué cambios de color se observan? Qué indican? 2. Qué factores influyen en el crecimiento bacteriano? CUESTIONARIO 1 Cuál es el fundamento de la coloración de Gram? 2 En qué consiste la técnica de coloración de Ziehl-Neelsen? 3 Qué bacterias pueden crecer en la leche? 4 Qué importancia (médica e industrial) tienen estas bacterias? - 5 -

6 GUIA DE LABORATORIO N 3 DIAGNÓSTICO MICOLÓGICO OBJETIVO Reconocer microscópicamente los caracteres morfológicos de los hongos. MATERIALES Alimentos contaminados con hongos (pan, frutas). Medio de cultivo para hongos (sembrados). Estilete, láminas porta objeto, cubreobjetos. Azul de lactofenol. Microscópio PROCEDIMIENTOS EXPERIENCIA 1: Observación de las estructuras de los hongos Con el estilete coger la muestra de hongos. Colocar la muestra en el porta objetos y añadir una o dos gotas del colorante azul de lactofenol. Cubrir la preparación con el cubreobjetos. Examinar cuidadosamente la lámina coloreada, buscando identificar las formas micológicas. Esquematizar las observaciones e interpretar y anotar los resultados. 1. Cuáles son los principales cuadros clínicos asociados a estos hongos? EXPERIENCIA 2: Observación macroscópica de hongos Examinar cuidadosamente la placa sembrada con hongos. Esquematizar las observaciones e interpretar y anotar los resultados. CUESTIONARIO 1. Cuáles son las principales diferencias entre hongos y bacterias? 2. En qué se diferencia un moho de una levadura? 3. En qué consiste el dimorfismo de los hongos? 4. Qué es micosis y como se clasifican? 5. Qué ventajas tiene el agar Sabouraud en el diagnóstico de hongos? - 6 -

7 GUIA DE LABORATORIO N 4 DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO OBJETIVO Reconocer microscópicamente los caracteres morfológicos de diferentes grupos de parásitos. MATERIALES Láminas fijadas parásitos. Parásitos fijados en formol. PROCEDIMIENTOS EXPERIENCIA 1: Observación de helmintos Examinar cuidadosamente las muestras fijadas. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. Ascaris lumbricoides Taenia solium 1. Cuáles son los principales cuadros clínicos asociados a estos helmintos? Fasciola hepatica 2. Cuáles son los principales cuadros clínicos asociado a este helminto? - 7 -

8 EXPERIENCIA 2: Observación de láminas fijadas Examinar cuidadosamente las láminas fijadas. Esquematizar las observaciones y anotar los resultados. 1. Cuáles son los principales cuadros clínicos asociados a estos parásitos? CUESTIONARIO 1. Cuáles son los principales cuadros clinicos asociados a Giardia lamblia? 2. Cuáles son los principales cuadros clinicos asociados a Entamoeba histolytica? 3. En que consiste el método de sedimentación y cuál es su utilidad? 4. En qué consiste el método de flotación y cuál es su utilidad? 5. Cuál es el fundamento del método de la gota gruesa y cuál es su utilidad? 6. En qué consiste la técnica de Graham y cuál es su utilidad? - 8 -

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