S. aureus resistente a meticilina.

Transcripción

1 III Jornades VINCat 28 Setembre 2011 Taller 1. Prevención y control de S. aureus resistente a meticilina. Diagnóstico microbiológico M. Ángeles Domínguez Luzón Servicio de Microbiología Hospital Universitari de Bellvitge

2 Diagnóstico microbiológico de SARM Estudio de portadores Identificación de SARM en muestras clínicas

3 Estudios de portadores Temas controvertidos (1): Estudios de cribaje / portadores: sí o no Cribaje universal o dirigido (Harbarth, Int J Antimicrob Agents 2011)

4 Estudios de portadores Temas controvertidos (2): Origen de la muestra: nasal / extranasal Tipo de torunda

5 Estudios de portadores Tipo de torunda Flocked vs traditional swabs» Flocked swabs have no internal mattress core to disperse and entrap the sample like traditional fiber wound swabs.» Perpendicular Nylon Fibers act like a soft brush and allow improved collection of cell samples. Capillary action between the Nylon fiber strands facilitates strong hydraulic uptake of liquid samples. Sample stays close to the surface allowing easier elution.

6 Estudios de portadores Temas controvertidos (2): Origen de la muestra: nasal / extranasal Tipo de torunda Métodos micobiológicos de cribaje

7 Métodos microbiológicos de cribaje Cultivos convencionales Métodos rápidos: Métodos moleculares basados en reacciones de amplificación (PCR /PCR-RT)

8 Métodos de cribaje La selección del método más adecuado depende de: Tipo de institución y características de la población Infraestructura, recursos y disponibilidad (abierto 24h, personal facultativo de guardia ) en el Laboratorio de Microbiología Experiencia del personal Características de los métodos disponibles y performance Capacidad de transmitir el resultado al médico o al equipo de control de la infección Objetivos del programa de control de infección. Política de actuación relacionada con la decolonización y/o aislamiento de los pacientes

9 Métodos de cribaje: Cultivos convencionales (CC) El uso de medios cromogénicos (=medios selectivos con sustratos enzimáticos cromogénicos) conlleva menor tiempo de respuesta y mayor sensibilidad. Se puede mejorar la sensibilidadad del CC: Importancia del caldo de enriquecimiento Prolongar la incubacion (disminuye la especificidad) Ojo al impacto de los falsos negativos a las 18-24h!!! en especial en unidades de riesgo No deben ser sustituidos por técnicas rápidas. Disponibilidad de la bacteria para estudios posteriores

10 Cultivo convencional Lectura 24 h Lectura 48 h Placas 1ª 2ª Lectura 72 h Caldo de enriquecimiento - 1ª 2ª

11 Placas selectivas: placas cromogénicas con antibiótico (oxacilina, cefoxitina o similar) (MRSA select, BioRad. Tras 24 h incubación)

12 (MRSA select, BioRad. Tras 48 h incubación)

13 Cultivo negativo para SARM Medio manitol coagulasa (MRSA select, BioRad. Tras 48 h incubación)

14 Métodos de cribaje: Métodos rápidos Métodos moleculares: PCR / PCR-RT (Harbarth, Int J Antimicrob Agents 2011)

15 Resultados de PCR-RT (BD GeneOhmTM MRSA -BD Diagnostics-) y cultivos convencionales (CC) en muestras nasales. CC Positivo CC Negativo PCR-TR Positivo PCR-TR Negativo S= 89% E= 94% VPP= 77% VPN= 97% (Congreso SEIMC, póster 426, 2009)

16 Molecular Target: MRSA DNA SCCmec mec A orfx S. aureus chromosome SCCmec primers (MR) Molecular beacon S. aureus primer (SA) Amplificación MRSA amplicon

17 Métodos de cribaje: Métodos rápidos Ventajas Tiempo de respuesta <2h Sensibilidad y especificidad Desarrollo de tecnología point-of-care (en algunos casos)

18 Métodos de cribaje: Métodos rápidos Impacto sobre las tasas de transmisión hospitalaria de SARM: Comparado con vigilancia mediante cultivo convencional: no hay impacto Comparado vigilancia ninguna: reducción 46% incidencia bacteriemia SARM, sin incidencia sobre infecciónes piel y partes blandas (Harbarth, JAMA, 2008) Reducción de los días de aislamiento preventivo (54%) y reducción del coste hospitalario (Uckay, ICHE, 2008)

19 Métodos de cribaje: Métodos rápidos Inconvenientes Falsos negativos: Aparición de nuevas cepas SARM con configuraciones variables del SCCmec que obligan a la actualización del diseño de la prueba Falsos positivos : Bacterias no viables, que no crecen en cultivo; bajo inóculo. Configuraciones genéticas del SCCmec no activas

20 Métodos de cribaje: Métodos rápidos Inconvenientes Peor performance en zonas de baja endemia Presentación del producto Coste

21 Diagnóstico rápido de SARM en muestras clínicas (hemocultivos) Mejora el manejo del paciente y su pronóstico Mejora el consumo de antibióticos

22 Diagnóstico rápido de SARM en muestras clínicas (hemocultivos) Técnicas disponibles: Paneles de detección de múltiples bacterias Detección específica de SARM/SASM Hemocultivos positivos para CGPR: GeneXpert BD StaphSR Disponibles también para muestras de piel y partes blandas

23 Consideraciones finales El diagnóstico rápido de SARM supone un reto para el Laboratorio de Microbiología. Los protocolos de detección y diagnóstico debe establecerse en un contexto multidisciplinar y atendiendo a la demanda de cada situación individual. Aunque las técnicas moleculares son muy sensibles y rápidas, pueden no ser lo más apropiado para cualquier institución. El cultivo se considera la técnica de referencia. El tiempo de respuesta puede ser largo pero la sensibilidad es muy buena en ciertas condiciones.