Urianálisis y hematología de laboratorio
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- Francisco José Cordero Álvarez
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1 LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS ANIMALES DE COMPAÑÍA Urianálisis y hematología de laboratorio Dirigido a veterinarios, estudiantes, profesores y profesionales del sector. CARACTERÍSTICAS TÉCNICAS Autor: Carolyn A. Sink Bernard F. Feldman, Formato: 15 x 21 cm. Número de páginas: 160. Número de imágenes: 100. Encuadernación: Tapa dura. Wire-o oculto. ISBN: Año: Esta obra recopila los últimos avances en los aspectos técnicos del laboratorio veterinario de patología clínica, en el campo de la hematología y el urianálisis. Aborda todos los aspectos del análisis sanguíneo y urinario, desde la recogida de muestras hasta la interpretación y evaluación de las mismas. Andador del Palacio de Larrinaga, Zaragoza - España Tel.: Fax: pedidos@grupoasis.com
2 LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS Urianálisis y hematología de laboratorio ÍNDICE DE CONTENIDO 1. Recogida de muestras y análisis mediante tiras de orina Introducción Algunas pistas útiles Obtención de la muestra Definición de urianálisis Procedimiento para llevar a cabo el análisis químico mediante el método de las tiras de orina con reactivo seco Metodologías de química seca 2. Análisis microscópico Centrifugación de la muestra de orina Elementos del sedimento urinario Valores de referencia para el análisis de orina 3. Recogida de muestras y realización de pruebas Procedimiento de obtención de muestras Definición de recuento hemático completo Procedimientos de las pruebas manuales 5. Glóbulos rojos Función y características físicas Análisis de laboratorio Terminología relativa a los glóbulos rojos Producción de glóbulos rojos Reticulocitos Directrices para la evaluación del frotis de sangre 6. Plaquetas Estructura y función de las plaquetas Análisis de laboratorio 7. Índice alfabético 8. Lecturas recomendadas 4. Glóbulos blancos Función y características físicas Términos descriptivos relativos a los glóbulos blancos Secuencia de maduración de los neutrófilos Andador del Palacio de Larrinaga, Zaragoza - España Tel.: Fax: pedidos@grupoasis.com
3 HEMATOLOGÍA glóbulos rojos 55Los equinocitos presentan múltiples protrusiones o espículas de márgenes redondeados, que pueden ser romas o puntiagudas, y que se distribuyen de manera uniforme por todo el glóbulo rojo (figura 5.7). Los equinocitos con espículas romas también se denominan glóbulos rojos crenados. Aunque estas células suelen ser un artefacto in vitro, los equinocitos pueden aparecer debido a distintos trastornos metabólicos. ÁÁLas células espinosas son equinocitos con múltiples espículas puntiagudas (figura 5.8). Se producen por una rotura de la membrana celular. Pueden observarse en la enfermedad renal. ÁÁLos acantocitos tienen múltiples espículas digitiformes e irregulares (figura 5.9). Se suelen relacionar con enfermedad hepática. Figura 5.8. Células espinosas en un frotis de sangre Figura 5.7. Glóbulos rojos crenados en un frotis de sangre Figura 5.9. Acantocitos en un frotis de sangre
4 hematología glóbulos blancos Eosinófilos Función Los eosinófilos poseen propiedades fagocíticas y bactericidas pero en estos procesos son menos eficaces que los neutrófilos. Los eosinófilos atacan a los helmintos para matarlos, y resultan atraídos por mediadores químicos liberados por mastocitos durante las reacciones alérgicas y anafilácticas. Descripción Los eosinófilos están presentes en pequeña cantidad en animales sanos. Tienen un tamaño similar o ligeramente superior al de los neutrófilos. Los eosinófilos son fáciles de reconocer mediante tinción de Wright, puesto que los gránulos citoplásmicos se tiñen de color rojo brillante. Los gránulos de los eosinófilos del gato pueden ser más ovoides que los del perro (figura 4.7). Los gránulos de los eosinófilos del perro son redondos y de tamaño y cantidad bastante variables (figuras 4.8 y 4.9). El núcleo del eosinófilo se parece al del neutrófilo en que es segmentado, pero los segmentos pueden no estar bien definidos. Figura 4.8. Eosinófilo Figura 4.7. Eosinófilo periférica de gato Figura 4.9. Eosinófilo desgranulándose 78 79
5 hematología recogida de muestras y realización de pruebas Frotis de sangre periférica 55El análisis microscópico de los componentes celulares de la sangre se lleva a cabo mediante la preparación y tinción de un frotis de sangre periférica. Existen dos métodos de preparación: el método del cubreobjetos y el método del portaobjetos. 55El método del cubreobjetos se basa en el uso de dos cubreobjetos, del número 1 o 1,5 (22 mm 2 ) para frotis de sangre. 55Se coloca una pequeña gota de sangre sobre uno de los cubreobjetos, se invierte y se sitúa sobre el otro, de modo que entre ambos se consiga la figura de una estrella de ocho puntas. La sangre difundirá entre ambos cubreobjetos rápidamente y de manera uniforme. Justo cuando la sangre haya difundido, separe los cubreobjetos rápidamente y con decisión deslizándolos uno contra el otro a lo largo del plano paralelo a sus superficies. Los cubreobjetos deben secarse al aire boca arriba. 55Los cubreobjetos se pueden manipular para tinción colocándolos en un corcho. Una vez teñidos, el cubreobjetos debe colocarse sobre un portaobjetos para su análisis microscópico. ÁÁEste método de preparación de frotis de sangre periférica aporta una excelente distribución de glóbulos blancos con poco error de muestreo. ѥѥun inconveniente es que el cubreobjetos es difícil de manipular y precisa habilidad y práctica para conseguir frotis legibles. Estas preparaciones no se pueden teñir mediante sistemas automáticos. 55El método del portaobjetos se basa en el uso de portaobjetos de 7,5 x 2,5 cm. 55Se coloca una pequeña gota de sangre en el extremo de un portaobjetos. El otro portaobjetos se emplea como utensilio de extensión, de tal forma que uno de sus extremos se coloca delante de la gota de sangre y se desliza por encima del otro, extendiéndola. La gota de sangre se deja extender hacia los márgenes del portaobjetos que la contiene y a continuación se desplaza el portaobjetos superior hasta el extremo del inferior. El frotis se deja secar al aire y se etiqueta en el extremo rugoso con un rotulador indeleble. ÁÁRecuerde que algunos rotuladores no son indelebles y que se borran con las sustancias químicas utilizadas para las técnicas posteriores de tinción. 55En general, los frotis deben estar libres de crestas u otras irregularidades que pudieran impedir una distribución uniforme de las células. 55Debe haber una dispersión progresiva de células, de tal forma que la densidad vaya de más a menos. Así, las variaciones en el tamaño de la gota de sangre y en el ángulo que forme el portaobjetos extensor con el inferior, afectarán al grosor y longitud del frotis de sangre. Una gota de sangre más grande y un ángulo más grande aumentarán el grosor y disminuirán la longitud del frotis. 55Para poder realizar el análisis diferencial de leucocitos se necesita una monocapa uniforme de células; al final del portaobjetos debe quedar una figura en forma de puntas de pluma. 55Los cúmulos de plaquetas, si los hay, harán que el extremo en forma de puntas de pluma tenga un aspecto rugoso. 55Microscópicamente no debe haber acumulación de leucocitos en el extremo en forma de puntas de pluma. ÁÁLos beneficios del método del portaobjetos para la preparación de frotis de sangre periférica es que el portaobjetos es fácil de manipular tanto en la tinción manual como en la automática. Asimismo, estos frotis son fáciles de leer mediante microscopía convencional. Procedimiento de preparación de frotis de sangre periférica Principio Se extiende una gota de sangre sobre un portaobjetos y se deja secar al aire. A continuación, este frotis se puede teñir de la forma adecuada para su evaluación microscópica. Equipo/reactivos/material Dos portaobjetos para microscopio, limpios, sin polvo y de 7,5 x 2,5 cm. Muestra de sangre con anticoagulante. Tubo capilar sin anticoagulante. Procedimiento Al terminar, un portaobjetos será el frotis, y el otro se habrá usado como medio de extensión. 1. Coloque un portaobjetos sobre una superficie plana. Mediante un tubo capilar, coloque una gota de sangre de 2-3 mm sobre el portaobjetos, aproximadamente a 1 cm de uno de los extremos
6 hematología glóbulos blancos Eosinófilos Función Los eosinófilos poseen propiedades fagocíticas y bactericidas pero en estos procesos son menos eficaces que los neutrófilos. Los eosinófilos atacan a los helmintos para matarlos, y resultan atraídos por mediadores químicos liberados por mastocitos durante las reacciones alérgicas y anafilácticas. Descripción Los eosinófilos están presentes en pequeña cantidad en animales sanos. Tienen un tamaño similar o ligeramente superior al de los neutrófilos. Los eosinófilos son fáciles de reconocer mediante tinción de Wright, puesto que los gránulos citoplásmicos se tiñen de color rojo brillante. Los gránulos de los eosinófilos del gato pueden ser más ovoides que los del perro (figura 4.7). Los gránulos de los eosinófilos del perro son redondos y de tamaño y cantidad bastante variables (figuras 4.8 y 4.9). El núcleo del eosinófilo se parece al del neutrófilo en que es segmentado, pero los segmentos pueden no estar bien definidos. Figura 4.8. Eosinófilo Figura 4.7. Eosinófilo periférica de gato Figura 4.9. Eosinófilo desgranulándose 78 79
7 HEMATOLOGÍA glóbulos rojos 55Los equinocitos presentan múltiples protrusiones o espículas de márgenes redondeados, que pueden ser romas o puntiagudas, y que se distribuyen de manera uniforme por todo el glóbulo rojo (figura 5.7). Los equinocitos con espículas romas también se denominan glóbulos rojos crenados. Aunque estas células suelen ser un artefacto in vitro, los equinocitos pueden aparecer debido a distintos trastornos metabólicos. ÁÁLas células espinosas son equinocitos con múltiples espículas puntiagudas (figura 5.8). Se producen por una rotura de la membrana celular. Pueden observarse en la enfermedad renal. ÁÁLos acantocitos tienen múltiples espículas digitiformes e irregulares (figura 5.9). Se suelen relacionar con enfermedad hepática. Figura 5.8. Células espinosas en un frotis de sangre Figura 5.7. Glóbulos rojos crenados en un frotis de sangre Figura 5.9. Acantocitos en un frotis de sangre
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