Cribado en Castilla y León mediante co-test citología/genotipado HPV
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- Emilia Sánchez Salazar
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1 Cribado en Castilla y León mediante co-test citología/genotipado HPV José Santos Salas Valién Servicio de Anatomía Patológica Complejo Asistencial Universitario de León
2 Resumen Ø -Cribado en Castilla y León. Ø Programa. Ø Datos estadísticos. Ø -Técnica de HPV en CyL. Ø Utilidad del genotipado. Ø -Discrepancias Citologias/HPV. Ø Citología positiva/hpv (-). Ø HPV Alto riesgo (+)/Citología negativa.
3 Cribado en Castilla y León Agradecimientos: Pedro Angel Redondo Cardeña Jefe de Servicio Servicio de Promoción de la Salud y Programas Preventivos Dirección General de Salud Pública Consejería de Sanidad Junta de Castilla y León
4 Antecedentes Cribado CyL Ø 1986:Programa de Prevención de Cánceres e Infecciones Ginecológicas. Población diana 25 a 65 años, y con factores de riesgo fuera de esa edad. Valladolid. Ø 1993: El Programa se implanta en toda la Comunidad Autónoma. Ø 1994:Incorporación del Programa de Castilla y León en la Red Europea de cribado de Cáncer Cervical. Ø 2003: Se modifica la población diana: 35 a 65 años, y con factores de riesgo fuera de esa edad. Ø 2005: Se modifica la población diana, 30 a 65 años (de 20 a 29 años si presentan factores de riesgo).
5 Modificación Ø 2008: Población diana: 20 a 64 años. Pruebas de cribado: citología convencional y determinación de VPH (incrementar la sensibilidad). Ø años (Intervalo de 3 años): Citología cervical convencional intervalo de 3 años Ø años (Intérvalo de 5 años): Citología cervical convencional. Determinación de VPH: Genotipado (CLART HPV2) 35 genotipos. HR: 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82 LR: 6,11,40,42,43,44,54,61,62,70,71,72,81,83,84,85,89
6
7 Distribución plataformas VPH
8 Revisión Cribado noviembre 2012 Ø 2012: Población diana: 25 a 64 años. ØMujeres de 25 a 34 años: CCC con intervalo de 3 años (las dos primeras citologías con un intervalo de 12 meses). ØMujeres de 35 a 64 años: CCC y detección de VPH por genotipado, con intervalo de 5 años.
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10
11 2013
12 Datos estadísticos
13 Participación ( ) (25-64 años) AREA DE SALUD Nº DE MUJERES MJ. PARTICIPANTES % ÁVILA ,03% BURGOS ,86% LEÓN ,84% EL BIERZO ,80% PALENCIA ,86% SALAMANCA ,09% SEGOVIA ,66% SORIA ,24% VALLADOLID OESTE ,36% VALLADOLID ESTE ,24% ZAMORA ,26% ,73%
14 Participación 2015 (25-64 años) AREA DE SALUD Nº DE MUJERES MJ. PARTICIPANTES % ÁVILA ,16% BURGOS ,30% LEÓN ,75% EL BIERZO ,89% PALENCIA ,16% SALAMANCA ,33% SEGOVIA ,96% SORIA ,84% VALLADOLID OESTE ,39% VALLADOLID ESTE ,82% ZAMORA ,89% ,32%
15 Participación por grupos de edad (25-64 años) AREA DE SALUD ÁVILA % 64,88% 68,31% 63,21% 57,55% 59,03% 54,16% 40,88% 25,92% BURGOS 80 75,17% 77,39% 70,23% 61,82% 61,00% 54,95% 46,59% 34,82% LEÓN 70 53,79% 57,09% 55,45% 53,17% 54,62% 52,62% 44,52% 31,39% EL BIERZO 60 58,70% 63,60% 63,81% 62,87% 65,33% 59,43% 50,02% 38,83% PALENCIA 50 73,53% 76,80% 73,99% 71,98% 69,60% 63,67% 50,23% 30,51% SALAMANCA 40 55,21% 55,75% 54,52% 51,02% 52,00% 49,16% 42,30% 31,19% SEGOVIA 30 64,55% 67,79% 60,92% 57,39% 54,55% 51,99% 41,80% 27,39% SORIA 20 57,75% 65,06% 65,18% 62,67% 60,54% 59,49% 52,72% 33,50% VALLADOLID OESTE 10 75,39% 76,86% 70,07% 66,56% 67,83% 65,76% 48,29% 35,25% VALLADOLID ESTE 0 72,80% 73,80% 67,65% 68,01% 69,08% 66,66% 50,78% 35,79% ZAMORA 67,27% 72,10% 66,86% 63,58% 61,67% 57,87% 44,74% 32,73% CASTILLA y LEÓN 66,59 68,82 64,21 60,71 60,90 57,22 46,04 32,60
16 Diagnósticos citológicos: Total Nº Citologías Negativas 96,15% 97,46% 98,02% 98,00% 97,53% 97,34% Positivas 2,63% 2,48% 1,97% 2,00% 2,43% 2,34% No valorables 1,10% 0,07% 0,01% 0,00% 0,01% 0,32% Diagnósticos sobre las citologías positivas: ASC-US 61,30% 65,17% 71,95% 71,14% 66,52% 66,22% Bajo grado 30,60% 28,58% 22,35% 20,50% 27,26% 26,77% Alto grado 1,70% 1,92% 1,84% 2,06% 1,16% 1,77% Alteraciones glandulares 5,30% 4,26% 3,85% 6,30% 5,05% 4,98%
17 Diagnósticos HPV TOTAL Nº de pruebas NO VALORABLES (%) 1988 (3,53%) 1964 (4,58%) 1974 (5,49%) 1265 (2,86%) 1097 (2,18%) 8288 (3,61%) NEGATIVOS (81,48%) (85,61%) (86,64%) (89,94%) (91,04%) (88,25%) TOTAL POSITIVOS AR Positivo POSITIVOS AR NO (6,73%) 876 (1,55%) 2913 (5,17%) 3258 (7,60%) 678 (1,58%) 2580 (6,02%) 2827 (7,87%) 602 (1,67%) 2225 (6,19%) 3184 (7,20%) 629 (1,42%) 2555 (5,78%) 3403 (6,78%) 714 (1,42%) 2689 (5,36%) (7,17%) 3499 (1,52%) (5,65%)
18 Resultado final cribado TOTAL PRUEBAS REALIZADAS RESULTADO NEGATIVO (94,09%) (94,64%) (93,34%) (93,81%) (93,25%) (93,87%) RESULTADO NO VALORABLE (3,46%) (2,45%) 444 (0,80%) 265 (0,42%) 233 (0,34%) (1,65%) NO DETERMINANTE 1 (0,00%) 412 (0,57%) (4,56%) (3,55%) (2,82%) (2,26%) RESULTADO POSITIVO (3,45%) (3,09%) (1,97%) (2,93%) (2,97%) (2,95%)
19 Resultado final cribado (Positivos) RESULTADO POSITIVO TOTAL (3,45%) (3,09%) (1,97%) (2,93%) (2,97%) (2,95%) BAJO GRADO % cribado 0,02% 0,22% 0,23% 0,22% 0,11% 0,15% % positivas 0,71% 7,12% 11,63% 7,40% 3,80% 5,13% ALTO GRADO % cribado 0,03% 0,16% 0,29% 0,27% 0,10% 0,16% % positivas 0,98% 5,33% 14,65% 9,24% 3,21% 5,36% CARCINOMA % cribado 0,04% 0,04% 0,02% 0,02% 0,00% 0,03% % positivas 1,38% 1,61% 1,19% 0,71% 0,15% 1,05%
20 Prevalencia de genotipos ( ) ALTO RIESGO BAJO RIESGO
21 Prevalencia de genotipos ( ) ALTO RIESGO BAJO RIESGO
22 Cambio en genotipos ( )
23 Técnica de HPV
24 Técnica usada cribado CyL Hibridación de ácidos nucleicos: Southern Blot, Hibridación in situ, etc. Hibridación + amplificación de señal Hc2, Cervista. Amplificación de ácidos nucleicos: CLART HPV 2, Cobas 4800, Inno-Lipa, Linear Array, Aptima, etc.
25 CLART HPV 2 (Genómica) Amplificación por PCR 450 pb de L1. Detección por microarray de baja densidad (Clinical Array Technology ), en fondo pocillo placa microtiter (CLART-Strip.CS )
26 Hibridación con sondas especificas inmovilizadas en zonas concretas y conocidas Productos amplificados marcados con biotina Unión del conjugado con la biotina de los productos amplificados Incubación con estreptavidinaperoxidasa La actividad peroxidasa provoca producto insoluble que precipita
27 CLART HPV2, (Controles) Control de PCR : (Se ha producido la reacción) Un par de primers que amplifican un plásmido modificado. Evita los resultados con falsos negativos. Control genómico : (Existe muestra) Amplificación DNA del paciente. Pareja de cebadores, que amplifican un fragmento de 892 pb del gen humano CFTR. Información sobre la presencia real de muestra. Múltiples Puntos en el array: (Tipo por triplicado) Los puntos se encuentran triplemente representados. Diferentes sondas en el mismo punto evitan inexpecificidades propias de la diversidad genética, que podían generar falsos negativos. Los puntos tanto genéricos como específicos, determinarán las especies de virus.
28 CLART HPV2 Muestra Extracción y Purificación Amplificación 3 horas Visualización (2 horas) DNA Extracción y Purificación Manual /Automática
29 CLART HPV2 SOFTWARE DE ANÁLISIS DE IMÁGENES APLICACIONES BIOINFORMÁTICAS -Procesamiento fácil y rápido de la imagen del array. -Análisis de la imagen. -Informe de resultados finales. -Software específico. GESTIÓN DE DATOS -Almacenamiento de datos (hard disk). -Volcado resultados vía telematica, previa validación.
30 CLART HPV2
31 Qué nos puede aportar el genotipado del VPH en el cribado?
32 Human Papilloma Virus (HPV) in patients with cervical pathology compared with general population. A study of 6375 cytology samples in 3 years PATOLOGIA CRIBADO Cuesta A, Salas JS, González MA, Castro P, Rubio A, Ribas T. 24TH European Congress of Pathology September Prague.
33 Human Papilloma Virus (HPV) in patients with cervical pathology compared with general population. A study of 6375 cytology samples in 3 years PATOLOGIA CRIBADO Cuesta A, Salas JS, González MA, Castro P, Rubio A, Ribas T. 24TH European Congress of Pathology September Prague.
34 Tipificación de HPV en pacientes con lesión glandular y escamosa simultaneas de cérvix uterino (14 casos) VPH 31 VPH 16 A Cuesta, JS Salas, P Castro, A Rubio, B Castañón, T Ribas XXVI Congreso Nacional de la SEAP-IAP. Cádiz 22-24/05/2013
35 Un virus, Una lesión Quint W y cols. J Pathol 2012; 227: 62-71
36 Discrepancias Citología / HPV Citología (+) HPV (-)
37 Citología (+) HPV (-) 70 citologías durante Citología (+) HPV (-) Reevaluación (1 Citotécnico + 2 patólogos): Negativas: 34 ASCUS: 15 SIL: 15 Solo en 7 seguimiento con HPV: HPV (+): 4 HPV (-): 3 De La Fuente Escobar JP. Reunión Anual SEC.2016.
38 Citología (+) HPV (-) De La Fuente Escobar JP. Reunión Anual SEC.2016.
39 Citología (+) HPV (-) Revisar diagnósticos que emitimos (% ASCUS) Geisinger. et al. Am J Pathol 2007; 128: Influencia del diagnostico citológico según status de HPV Cuidado en las citologías de seguimiento postconización. Cribado con citología en HPV (+) Moriarty A. et al. Arch Pathol Lab Med Vol 138, September 2014
40 Discrepancias Citología / HPV HPV (+) Citología (-)
41 Citología (-) HPV (+) Citología (-) HPV (+) HPV 16/18 HPV AR no 16/18 Colposcopia No concluyente Seriación+p16+Ki67
42 Thumbnail
43 Legrado endocervix
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45 P-16
46 Ki 67
47 Seguimiento 273 pacientes HPV 16/18 y cito (-) Seguimiento de 273 pacientes remitidas al Hospital de León: HPV 16 y/o 18 Citología Negativa en el programa de cribado de la Junta de Castilla y León. Se realiza el seguimiento de estas pacientes: Colposcopia, citología, biopsia y detección y tipificación de HPV (CLART HPV2), según los hallazgos encontrados. Plataforma VPH-León: 273 con seguimiento XXVII Congreso Nacional de la SEAP-IAP Mayo-2015
48 Lesiones por tipo HPV El 22,7% de las pacientes tuvieron CIN2+ Plataforma VPH-León: 273 con seguimiento XXVII Congreso Nacional de la SEAP-IAP Mayo-2015
49 Qué pasa con los alto riesgo no 16-18? HPV alto riesgo no 16/18 43 casos Sin lesión: 32 (74,4%) Bajo grado: 4 (9,3%) Alto grado: 7 (16,3%)
50 HPV no 16/18 por lesión HPV
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