GUÍA PARA TOMA DE MUESTRAS PATOLOGÍA CLÍNICA

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1 GUÍAPARATOMADEMUESTRASPATOLOGÍACLÍNICA ConsideracionesGenerales Confirmarayunodesólidosylíquidosde12horasantesdelmuestreo Agujadecalibreadecuadoaltamañodelvasosanguíneoyalvolumendelajeringa(evitar vacíoviolento) Conservarantisepsia Torniquetemáximo10segundos Retirarlaagujaydepositarlamuestraeneltuboresbalándolaporlasparedes Identificarlamuestracorrectamente:nombre,especie,fecha/horademuestreo,sihay sospechadezoonosis

2 I.Hematología SANGREENTERACONANTICOAGULANTE Conservarproporciónsangre/anticoagulante(llenartubohastalamarca) Sisecentrifugaseobtieneplasmaútilenalgunaspruebasbioquímicas EDTA(tubocontapónmorado) *Hemograma Llenarhastalacapacidadmarcadayhomogeneizar10vecessuavemente. Despuésdeatemperarse(15min),mantenerlamuestraenrefrigeración nuncacongelar! Silamuestraparahemogramavaatardarenanalizarsemásdedoshoras,hacer2frotisy fijarlosalaire InadecuadaproporcióndeanticoagulanteEDTA(pocasangreeneltubo)ocasionaunfalso incrementodesólidostotales,deshidratacióndeeritrocitos(equinocitos). Lapresenciadecoágulos(sinimportarsutamaño)puedesubestimarlosconteoscelulares porloquedichasmuestrasnoseránprocesadas. *Determinacióndeamoniaco Utilizamosplasma Llenar tubo con EDTA hasta la capacidad marcada, homogeneizar 10 veces suavemente y colocarenaguaconhielo. *PruebasdecompatibilidadSanguínea *Tipificaciónsanguínea *Citometríadeflujo *PruebadeCoombs *Panelinmunecanino *PerfilCID *Hemoglobinaglicosilada *Etilenglicol *Plomoensangre *CardiopetproBNP *Coronavirusfelino *PCR *IFA *Mycoplasmashemotrópicosfelinos *Hemocultivogeneral Llenarhastalacapacidadmarcadayhomogeneizar10vecessuavemente. Despuésdeatemperarsemantenerlamuestraenrefrigeración nuncacongelar! CITRATODESODIO3.8%(tubocontapónazul) *TiemposdeCoagulación *FactordeVonWillebrad

3 *PerfilCID *BrucellacanisHemocultivo Utilizamos 1 ml de plasma o 2 3 ml sangre entera con citrato (conservar proporción sangre/anticoagulante9:1),mezclarsuavemente10veces. Sedebetrabajarenuntiempomáximode4horas. HEPARINA(tuboverde) *Amoniaco *CalcioIonizado *Etilenglicol *Zincensangre Jeringaheparinizadade1a3mLdesangrecompletavenosaoarterial,utilizamosplasma *Gasometría Jeringaheparinizadade1a3mLdesangrecompletavenosaoarterial,utilizamosplasma Nopresionarelvasosanguíneopormásde20segundosparaevitaralteraciones Evitargenerarburbujasoeliminarlasdejandosalirunagotadesangre Colocartapóndegomaenpuntadeaguja Procesarinmediatamente. *Hemograma/Bioquímicaenespeciesexóticas Jeringaheparinizadade1a3mLdesangrecompletavenosa.

4 II.Bioquímica SANGREENTERASINANTICOAGULANTE(SUERO) Tuborojooamarillo *BioquímicaClínica *ANA *BrucellacanisAglutinaciónenplaca *Toxoplasma Esperarformacióndecoáguloatemperaturaambiente(30min) Separarelcoágulodelasparedesdeltuboconpalillodemaderaycentrifugara3000rpm por10min,separarelsueroenotrorecipiente Analizardeinmediatooconservarenrefrigeración(unavezseparadosepuedecongelar) Evitarexposiciónalaluz

5 III.Orina ORINA(recipientelimpiohermético) *Urianálisis Colección por micción espontánea (más común), cistocentesis (orina estéril), cateterismo, compresiónvesical. Colectarenunrecipientedeplásticoovidriolimpioyhermético(micción),recipienteestéril (sospechadeinfección). Evitarexposiciónalaluz Trabajarlaorinadentrodelasprimerascuatrohoras,conservarenrefrigeración *RelaciónCortisol/creatinina 4mldelaprimeraorinadelamañana Sesugiereobtenciónporelpropietariomediantemicciónespontánea *Urocultivo Obtencióndelamuestraporcistocentesis,conservaciónenrecipienteestéril,manteneren refrigeración.

6 IV.Citología Informaciónclínica Ademásdelareseña,anamnesisyexamenfísicoderutina,serequieredeunadescripción detalladadelalesiónamuestrearqueincluya: Distribuciónanatómicadela(s)lesión(es) Planosanatómicosafectados(cutánea,subcutáneaotejidosprofundos) Superficie,texturayforma(lisa,rugosa,alopécica,nodular,pediculada,sésiloulcerada) Color(negro,eritematoso,violáceo,etc.) Únicosomúltiples Calidad(seca,húmeda(exudado),hemorrágica) Dimensiones(tres:largo,anchoyprofundidad) Característicasalapalpación:consistencia(dura,blanda,mixta,turgente),rugosaolisa (subcutáneasoprofundas),delimitación,fijoomóvil,dolorosaono. Técnicasdemuestreo(obtenerde3 5laminillasporsitio) Aspiraciónconagujadelgada: Lamáscomúnenlesionsnodulares. Delimitar y sujetar la masa con la mano libre, introducir la aguja y mantener la presión negativa al mismo tiempo que se rota la aguja para obtener más material. Suspender la presión negativa una vez que se observe muestra al inicio de la jeringa, ya que indicaría hemodilución. Siloqueseaspiraeslíquido(lesiónquística),continuaraspirandoyremitirlo. Evitarlaaspiraciónentejidouórganomuyirrigado;preferirsolopunción. Punciónconagujadelgada: Se utiliza solo la aguja sin jeringa, la cual se introduce y retira varias veces (al menos 10 veces)almismotiempoquesevarotando. Impresión: Lesionesulceradas:Tomarimpresionesantesydespuésdelimpiarlaúlcera. Biopsias:secartejidoentoallasdepapeleimprimirvariasvecesenlalaminilla. Raspado: Enlesionesduras(mesenquimatosas),enepidermis,necropsias/biopsias. Utilizarunahojadebisturíolaminillahastaquelamuestraseaevidenteyuntarlamuestra sobrelalaminilla Enraspadosconjuntivalesutilizarlabasedelahojadelbisturíyprotegerelfiloconcinta.

7 Hisopado: Paralesionesfistulosasyórganostubulares(vagina,útero,conductoauditivo,fosasnasales, cavidadoral,recto). Verificarqueelhisopoestefijoalpalillodemadera Introducirhisopo,rotaryretirarevitandolacontaminaciónconotrostejidos Rotarhisoposobrelalaminillaejerciendoligerapresiónenformalineal Aspirado/punciónencavidadescorporales: Remitircomoevaluacióndelíquidoscorporalesparasuexamenfísico,químicoycitológico. (torácico,abdominal,lcr,articulaciones) Efusiones pleurales, peritoneales pericárdicas colectar en tubo EDTA (morado) y tubo sin anticoagulante LCRysinovialentubosinanticoagulante ElLCRdebeserprocesadoenlosprimeros30minutosposterioresalmuestreodebidoaque sufrerápidadegeneracióncelularlocualinterfiereensuidentificaciónydiagnóstico. Preparacióndemuestras Dependedelaconsistenciadelamuestra,comosevaaprepararparasuobservaciónenuna laminilla. Frotisterminal:muestrasconconsistenciacomosangre. Squashoaplastamiento:Muestrasespesasy/oviscosas. Frotislineal:muestrasmuylíquidasconpocacelularidad. Envíodemuestras Unavezquelasmuestrassehanfijadoalaire,protegerelladodelamuestraconlaparte limpiadeotralaminillayenviardentrodecontenedorrígidoconmaterialinmovilizadorpara evitarqueserompan. Las muestras con material oleoso no secarán por lo que las laminillas deben remitirse por separadoparaevitarquesepierdalamuestra. Incluirtodoslosdatosdereseña,anamnesisydescripcióndelalesión. Los líquidos obtenidos de masas deberán ser remitidos como citología no es necesario remitirlacomo evaluacióndelíquidos

8 V.Endocrinología *HemoglobinaGlicosilada *PTHr Tubo con EDTA: Llenar hasta la capacidad marcada y homogeneizar 10 veces suavemente. Despuésdeatemperarsemantenerlamuestraenrefrigeración nuncacongelar! *ACTHendógena Tubo con EDTA: Utilizar pipeta/tubo de plástico. Llenar hasta la capacidad marcada y homogeneizar 10 veces suavemente. Después de atemperarse mantener la muestra en refrigeración nuncacongelar! *Relaxina Citrato de Sodio: Utilizamos 1 ml de plasma o 2 3 ml sangre (conservar proporción sangre/anticoagulante9:1),mezclarsuavemente10veces. Heparina:Jeringaheparinizadade1a3mLdesangrecompletavenosa. *Cortisol *Insulina *PTH *Progesterona *Estradiol *Testosterona Sinanticoagulante:Esperarformacióndecoáguloatemperaturaambiente(30min) Separarlodelasparedesdeltuboconpalillodemaderaycentrifugara3000rpmpor10min Separar el suero en otro recipiente y analizar de inmediato o conservar en refrigeración Evitarexposiciónalaluz *T4Total/T4Libre Tubosinanticoagulante,SINgelseparador

9 VI.Histopatología Demanerageneral,seccionarlostejidosconcuidadodenolastimaryalterarlaarquitectura tisular. Abarcarsiempretejidosanoylesionado. Colocar el tejido recién cortado en el fijador (formol/formalina al 10%), procurando tener unaproporciónmínimade10:1(mililitrosdeformol/gramosdetejido) Paraevitarlaretraccióndeltejido,lasbiopsiasdepiel(sintumor/masa)deberáncolocarse enunasuperficieplana(porejemplo,cartónoabatelenguas)inmediatamentedespuésdesu obtenciónydepositarlasenelformol.nocolocarentredossuperficiesycomprimir. Cualquier órgano tubular (por ejemplo, esófago, intestino, vesícula biliar o vejiga) no deberánserincididos,lorecomendadoesincrementarlacantidaddemldeformol. Enelcasodetumor/masa,nodeberánsercortadosporlamitad,esmejorincrementarla cantidaddemldeformol. En caso de múltiples lesiones cutáneas similares y en diferentes sitios anatómicos, se recomiendamuestrearalmenos2sitiosincluyendotejidosanoyafectado.verificarquela muestracontengatejidoprofundo. Paraelcasodeneoplasias,sesugiereconsiderarretirar/remitirlinfonodosregionales. Para muestras obtenidas por endoscopía se sugiere consultar la siguiente referencia x/pdf Considerarquelostejidosaumentaránsuvolumenconformepasenlosdíasenelformolpor loquesesugierequeeltejidoabarque2/3partesdelcontenedor. En el caso de necropsias se recomienda remitir el cadáver lo antes posible (2 horas), la refrigeraciónesadmisiblemáximo24horasynuncadebecongelarse.

10 VI.Parasitología Identificarlasmuestras. Refrigerar,NOcongelar Considerarqueestaspruebaspuedenpresentarfalsosnegativosdebidoa: Bajacargaparasitaria Tratamientosantiparasitariosrecientes Formasparasitariaslábilesfueradelhospedador Eliminaciónintermitentedehuevosy/oformasparasitarias. Sesugiereelmuestreoseriado(3díasseguidos)decadapaciente

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