Artisan Grocott s Methenamine Silver Eosin Stain Kit. Nº de catálogo AR376. Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro.
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- Pedro Silva Campos
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1 Artisan Grocott s Methenamine Silver Eosin Stain Kit Nº de catálogo AR376 Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro. Grocott s Methenamine Silver (GMS) Eosin Stain Kit está diseñado para su uso en laboratorio con objeto de identificar, por microscopía óptica, organismos fúngicos y Pneumocystis jirovecii (conocidos anteriormente como carinii) en muestras de tejidos. 1-3 Se pueden utilizar muestras (incluidas en parafina) procesadas de la manera habitual. El agente de fijación preferido es formol tamponado neutro. La interpretación clínica de los resultados de cualquier tinción o su ausencia debe complementarse con estudios morfológicos mediante los controles adecuados y debe evaluarla un anatomopatólogo calificado en el contexto de la historia clínica del paciente y de otras pruebas diagnósticas. Todos los reactivos del GMS Eosin Stain Kit se han preparado de forma óptima para su uso en el Artisan Link Staining System de Dako y no precisan ni mezcla ni dilución. Resumen y explicación El GMS Eosin Stain Kit se emplea para identificar organismos fúngicos en cortes de tejido. Resulta más adecuado para identificar las infecciones fúngicas que las tinciones con hematoxilina y eosina y el ácido periódico Schiff (PAS), en especial en los casos en los que exista un número reducido de organismos. La aplicación más ampliamente utilizada de esta técnica es la identificación de Pneumocystis jirovecii, un hongo oportunista que puede crecer en los pulmones de los pacientes con SIDA. 1 Principio del procedimiento Los organismos fúngicos resultan visibles en preparaciones con hematoxilina y eosina utilizando microscopía óptica. No obstante, se consigue mayor sensibilidad para detectar la presencia de hongos con la aplicación de esta tinción especial. El GMS Eosin Stain Kit es una modificación del método de metenamina de plata de Grocott original. 2 En cuanto a la contratinción con eosina, ésta se ha sustituido por el verde claro. El GMS Eosin Stain Kit se ha optimizado para su uso con el Artisan Link Staining System con o sin la Artisan Clearing Solution. Todos los pasos de tinción van seguidos por pasos de lavado. Tras la tinción, se retiran del instrumento los portaobjetos secados al aire, se aclaran con xileno o un sustituto del xileno y se montan utilizando un medio de montaje adecuado. Los resultados se interpretan con un microscopio óptico estándar. Tejido de control: tejido con Aspergillus, Candida o Pneumocystis. Reactivos suministrados El GMS Stain Eosin Kit está compuesto por ocho cartuchos de dispensador listos para su uso, que contienen: Cromato de sodio al 10 % Cromato de sodio en agua desionizada Ácido perclórico al 10 % Ácido perclórico en agua desionizada Bisulfito de sodio al 1 % Bisulfito de sodio en agua desionizada Nitrato de plata al 0,21 % Nitrato de plata en agua desionizada Borato de metenamina al 3 % Metenamina al 2,7 % y borato de sodio al 0,38 % en agua desionizada Cloruro de oro al 0,2 % Cloruro de oro en agua desionizada ( ) P04310ES_01/AR376/ p. 1/5
2 Tiosulfato de sodio al 2 % Tiosulfato de sodio en agua desionizada con ProClin 300 al 0,05 % Dako Eosin Eosina en agua desionizada Deje que los cartuchos de reactivo de GMS se equilibren a temperatura ambiente antes de su uso. Dako suministra estos reactivos con una formulación óptima para su uso según las instrucciones facilitadas para la tinción en cortes de tejido preparados. Cualquier desviación de los procedimientos recomendados de las pruebas puede invalidar los resultados declarados esperados. Material necesario, pero no suministrado 1. Portaobjetos para microscopio 2. Artisan Link Staining System 3. Solución de lavado (nº de catálogo AR102) 4. Artisan Clearing Solution (nº de catálogo AR309) opcional Precauciones 1. Para usuarios profesionales. 2. Evite la contaminación microbiana de los reactivos, ya que es posible que se incrementen las tinciones inespecíficas. 3. Los cartuchos de reactivos pueden contener solución residual tras completar el número de pruebas especificado. 4. El uso de tiempos de incubación o temperaturas diferentes a los especificados puede causar resultados incorrectos. El usuario debe validar cualquier cambio realizado sobre el procedimiento original. 5. Almacene los cartuchos de reactivos en posición vertical cuando no se estén utilizando en el instrumento. 6. Mantenga los cartuchos de reactivos alejados de la luz solar directa y de otras fuentes generadoras de calor. 7. Como regla general, los menores de 18 años no pueden manipular este producto. Los usuarios deben ser meticulosamente instruidos en el procedimiento correcto, las propiedades peligrosas del producto y las instrucciones de seguridad necesarias. 8. Utilice el equipo de protección personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel. 9. La solución no utilizada debe desecharse con arreglo a las normativas locales, provinciales y nacionales. 10. La hoja de datos de seguridad se encuentra disponible para los usuarios profesionales. Sodium Chromate 10%: 10-30% Chromic acid (H2CrO4), disodium salt, tetrahydrate H311 + H331 Tóxico en contacto con la piel o si se inhala. H302 Nocivo en caso de ingestión. H334 Puede provocar síntomas de alergia o asma o dificultades respiratorias si se inhala. H340 Puede provocar defectos genéticos. H350 Puede provocar cáncer. H360 Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. H372 Provoca daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. P285 En caso de ventilación insuficiente, llevar equipo de protección respiratoria. P271 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. P260 No respirar vapores. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P314 Consultar a un médico si la persona se encuentra mal. P308 + P313 EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. para respirar. Llamar P342 + P311 En caso de síntomas respiratorios: Llamar a un CENTRO DE TOXICOLOGÍA/médico/... P P303 + P361 + P312 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Llamar un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico si la persona se encuentra mal. ( ) P04310ES_01/AR376/ p. 2/5
3 P305 + P351 + P338 + Perchloric Acid 10%: 5-10% ácido Perclórico H272 Puede agravar un incendio; comburente. H370 Provoca daños en los órganos. P210 Mantener alejado del calor, superficies calientes, chispas llamas al descubierto y otras fuentes de ignición. No fumar. P220 Mantener alejado de la ropa, materiales incompatibles y materiales combustibles. P221 Tomar todas las precauciones necesarias para no mezclar con materias combustibles ni otros materiales incompatibles. P260 No respirar vapores. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P307 + P311 EN CASO DE exposición: Llamar a un CENTRO DE para respirar. Llamar P P303 + P361 + P305 + P351 + P338 + Methenamine Borate 3%: 30-60% Borax (B4Na2O7.10H2O), 30-60% Metenamina H360 Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. Usar guantes de protección. P308 + P313 EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Gold Chloride 0.2 percent: 0.1-1% Aurate(1-), tetrachloro-, hydrogen, trihydrate, (SP-4-1)- para respirar. Llamar P ( ) P04310ES_01/AR376/ p. 3/5
4 P303 + P361 + P302 + P352 P333 + P313 P305 + P351 + P338 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. Atención Sodium Thiosulfate 2%: < 0.1% 3(2H)-Isothiazolone, 5-chloro-2-methyl-, mixt. with 2-methyl-3(2H)-isothiazolone Usar guantes de protección. P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Almacenamiento Almacene el nitrato de plata al 0,21 %, el borato de metenamina al 3 %, el cromato de sodio al 10 %, el ácido perclórico al 10 %, y el tiosulfato de sodio al 2 % a una temperatura de 2-8 C. Almacene el cloruro de oro al 0,2 %, el bisulf ito de sodio al 1 %, y Dako Eosin a temperatura ambiente. No utilizar después de la fecha de caducidad. Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas, el usuario debe comprobarlas. No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto. Por consiguiente, se debe analizar el tejido adecuado como forma de control de dicha verificación. En caso de observarse una coloración inesperada que no pueda explicarse por las variaciones en los procedimientos del laboratorio o por un almacenamiento incorrecto, póngase en contacto con el servicio técnico de Dako. Procedimiento del instrumento / Procedimiento de tinción Observaciones preliminares Consulte la Guía del usuario del Artisan Link para conocer las instrucciones detalladas. Cebado de los cartuchos de reactivos Antes de comenzar la tinción, es necesario cebar los cartuchos de reactivos y comprobar que no presentan fugas. Compruebe el cebado de cada cartucho de reactivo siempre que se utilice un nuevo kit y antes del primer ciclo de tinción de la jornada. 1. Sobre una toalla de papel, retire la tapa de envío de color rojo o negro, si existen, del conjunto de dispensación del cartucho de reactivos tirando suavemente del tapón. 2. Para cebar un cartucho de reactivos al recibirlo por primera vez, mantenga el cartucho de reactivos con el conjunto de dispensación apuntando hacia abajo y golpee suavemente el lateral del cartucho de reactivos 2 3 veces a fin de expulsar cualquier burbuja de aire que pueda estar atrapada en el conjunto de dispensación. 3. Comprima y suelte completamente el émbolo 3 4 veces con rapidez, teniendo cuidado de absorber cualquier líquido expulsado con una toalla de papel, una gasa absorbente o un material similar hasta que se consiga un flujo uniforme. 4. Evite dispensar cantidades de reactivo excesivas durante el cebado. Un cebado excesivo tendrá como resultado una pérdida de reactivo, que provocará que el cartucho de reactivos se agote antes de completar el número de pruebas indicado. 5. Antes de cada uso, los cartuchos de reactivos se han de cebar 1 2 veces comprobando que se obtiene un flujo uniforme. 6. Mientras mantiene el cartucho de reactivos en una mano, introduzca la guía de montaje en la parte trasera del cartucho de reactivos en las ranuras del tambor de reactivos hasta que el cartucho quede perfectamente colocado. Procedimiento Consulte la sección Protocolo del software Dako Link para conocer el procedimiento detallado recomendado. Una vez que ha finalizado la tinción, los portaobjetos estarán secos. Sumerja los portaobjetos en xileno o en un sustituto de xileno y móntelos en medios permanentes. Interpretación de la tinción Hongos:...Negro Pneumocystis:...Negro Fondo:...Rosa Solución de problemas Consulte la sección Mantenimiento y solución de problemas de su Guía del usuario del Artisan o póngase en contacto con nuestro grupo de asistencia técnica. Referencias 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition, McGraw-Hill Book Company, New York, New York, Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods in Histotechnology, 1st edition, American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 ( ) P04310ES_01/AR376/ p. 4/5
5 Edición 08/15 ( ) P04310ES_01/AR376/ p. 5/5
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