HISTOLOGIA ANIMAL Tejido Óseo 29-08

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1 HISTOLOGIA ANIMAL 2017 Tejido Óseo 29-08

2 ANATOMIA DE LOS HUESOS

3 Tejido óseo vs hueso TEJIDO ÓSEO Es una forma ESPECIALIZADA de TC denso Representa la parte principal del esqueleto Dureza y fortaleza con el mínimo peso posible y con cierta elasticidad Principal función: órgano de sostén 1) 2) 3) Sitio de inserción de los músculos Brinda rigidez al organismo y lo protege de las fuerzas de gravedad Protege cerebro, médula espinal y órganos del tórax y el abdomen Otra importante función: reservorio del 99% del calcio

4 Según la forma se clasifica a: largo b b: plano c: corto c c

5 TEJIDO ÓSEO: Anatomía macroscópica Disco intervertebral Tejido óseo trabecular (esponjoso) Tejido óseo cortical (compacto) Tejido óseo trabecular o esponjoso: finos listones/hojas (=trabéculas) que se entrecruzan en distintas direcciones y forman un reticulado esponjoso. Los espacios entre las trabéculas están ocupados por médula ósea Tejido óseo compacto o cortical: forma a simple vista una masa compacta sin espacios visibles Casi todos los huesos e componen de tejido óseo trabecular + tejido óseo compacto aunque las proporciones de los mismos vayan variando

6 CORTE A NIVEL DE EPIFISIS

7 Huesos largos (húmero o tibia) Diáfisis: T.O.C. (paredes gruesas que rodean el espacio medular) Epífisis: T.O.E. (++) T.O.C. (capa delgada en la parte más externa) Epífisis En ella se encuentran las superficies articulares recubiertas por cartílago hialino (cartílago articular) Espacio medular (diáfisis) Espacios de la sustancia esponjosa de la epífisis

8 Disco epifisario: estructura cartilaginosa que separa la diáfisis de la epífisis. Crecimiento longitudinal del hueso Periostio: capa de tejido conectivo denso que rodea al hueso por fuera Endostio: capa de tejido conectivo laxo que recubre el espacio medular y los espacios de la sustancia esponjosa

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10 ESQUEMA A NIVEL DE DIAFISIS PERIOSTIO ENDOSTIO: Orificios nutricios PERIOSTIO Laminilla de la osteona compacto esponjoso

11 HISTOLOGIA DE LOS HUESOS

12 Métodos de estudio para el tejido óseo 1) DECALCIFICACION: Requiere fijación previa Se pueden observar células A) Métodos electroquímicos: extraen el Ca2+ B) Ácidos o quelantes: Disuelven las sales calcáreas Se consumen a medida que transcurre la reacción. Se usan grandes volúmenes y cambios frecuentes

13 Protocolo de decalcificación con ácido fórmico 1) Fijación en formol 2) Lavado en agua destilada 3) Solución decalcificante: citrato de sodio + ácido fórmico (50:50) hasta que se ablande el hueso. La solución se cambia cada 3 días. Cabezas de peces cíclidos tardan 4 días en descalcificar en adultos y 2 días en larvas. 4) Lavado en agua destilada 5) 24 hs en solucion saturada de alumbre de potasio 6) 48 hs en solución de glicerina + 1% de acético a 4 C 7) 3 hs lavado con agua corriente 8) Deshidratación e inclusion

14 2) DESGASTE Y PULIDO Para hueso seco sin fijar No se verán células. Sólo se observa la textura de la matriz ósea (lagunas y canalículos) Serruchar discos tan delgados como sea posible y luego lijarlos hasta hacerlos tan finos que permitan el pasaje de la luz del microscopio

15 TEJIDO ÓSEO Es una forma ESPECIALIZADA de TC denso Características generales: 1) Alta irrigación 2) M.E. muy dura por depósito de minerales: calcificación/dureza de la matriz 3) Funciones de sostén, protección y regulación de la calcemia. 4) Rodeado por PERIOSTIO Fibrilar (fibras colágenas I) Condrotinsulfato Proteoglicanos Matriz ósea Queratánsulfato Sialoproteínas I y II Agrecan Amorfa Osteonectina Glicoproteínas Osteopontina Osteocalcina Sales: fosfato de calcio, Mg, K, Na, carbonato, citrato

16 Células del tejido óseo: Osteoprogenitoras Osteoblastos Osteocitos De recubrimiento óseo Osteoclastos Zona fibrosa PERIOSTIO Zona osteógena

17 Utilizaremos como modelo al hueso compacto preparado por desgaste Sustancia intracelular = matriz extracelular = matriz ósea Forma láminas (= capas) de 3 um de espesor Los osteocitos se alojan en lagunas (espacios pequeños y alargados que se alojan a su vez en las láminas)

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19 Desgaste

20 Descalcificación + H-E

21 Canalículos: canales estrechos que contienen las delgadas y numerosas prolongaciones de los osteocitos desembocadura perpendicular 1) Lagunas 2) Unión con otros canalículos 3) Canales ricos en vasos sanguíneos del tejido óseo Su función es intercambiar sustancias por difusión entre canalículos y lagunas ya que la matriz ósea calcificada es impermeable

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25 Sistemas de Havers u osteonas corticales: -Se definen para el hueso compacto - Las láminas se disponen en forma concéntrica alrededor de canales longitudinales del hueso: conductos de Havers -50 um de diámetro - Contenido: - 1 o 2 capilares - vasos linfáticos - fibras nerviosas - tejido conectivo Cada osteona (150 um de diámetro y 3000 um de longitud ) está formada por 15 láminas dispuestas en anillos concéntricos al conducto de Havers Láminas = osteocitos + fibras colágenas

26 Sistema intersticial: zonas irregulares de tejido óseo laminar que corresponde a osteonas degradadas Sistemas circunferenciales: Transcurren paralelos a la superficie externa e interna de la diáfisis Externo: asociado al periostio Interno: asociado al endostio Línea de cemento: formada por escasas fibras colágenas no calcificadas marcando el límite de las osteonas

27 Sistema circunferencial externo osteona

28 Conductos de Volkmann: -Sistema de canales conductores - Comunican: a) conductos de Havers entre si b) conductos de Havers con las superficies internas y externas del hueso - Atraviesan el tejido óseo en sentido transversal - No rodeados por láminas concéntricas - Comunican los vasos de los conductos de Havers con los del periostio y el endostio

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33 Tejido óseo trabecular o esponjoso

34 Tejido óseo trabecular o esponjoso -Compuesto por láminas que no forman osteonas - Sin conductos de Havers, ni Volkmann, ni vasos sanguíneos - Trabéculas u osteonas trabeculares ( um de espesor) - Nutrición por difusión directa a través del endostio

35 PERIOSTIO 2 capas en el período de crecimiento del hueso a) Interna: - TC laxo vascularizado - Osteoblastos y células osteoprogenitoras (similares al TC) - Potencial osteogénico durante el crecimiento - Finalizado el crecimiento se convierten en células de recubrimiento óseo (capa plana sin poder osteogénico) - La capa interna más profunda de caso de fractura recupera potencial osteogénico b) Externa: - TC denso - Poco vasos sanguíneos de mayor tamaño que se ramifican hacia Volkmann - Fibras de Sharpey: haces de colágeno dirigidas hacia la parte interna del hueso anclando el periostio al mismo

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39 ENDOSTIO -Única capa de células planas (células osteoprogenitoras) - Reviste: Superficie interna de trabéculas Espacio medular Conductos de Havers Conductos de Volkmann

40 Matriz ósea Matriz orgánica (propiedades elásticas y resistencia a la tracción) + Sales inorgánicas (dureza y resistencia a la compresión) Matriz orgánica Fibras colágenas (90%) + sustancia fundamental Alta acidofilia (Q+)

41 Sustancia fundamental de la matriz ósea 1) Condroitinsulfato (++) 2) Ácido Hilaurónico (+) 3) Osteopontina: propiedades tipo fibronectina 4) Osteonectina: glucoproteína adhesiva que se une a las superficies celulares y a la hidroxiapatita 5) Osteocalcina o BGP (proteína no colágena más abundante) -S! por osteoblastos - Depende la vitamina K y D -Se une a la hidroxiapatita (imp en calicificación) - Se mide en plasma para estimar el grado de formación de tejido óseo Colágeno de la matriz ósea Tipo I (tipo TC)

42 Sales minerales de la matriz ósea -Corresponden al 75% del peso seco -Cristales de hidroxiapatita con forma de varas finas que se disponen en paralelo y en estrecha relación con la fibras colágenas - Mineralización/Calcificación: depósito de minerales en la matriz orgánica del tejido óseo (no es igual a osificación) Mecanismo no conocidos con exactitud: Una vez formada la sustancia osteoide se depositan fosfato de calcio amorfo que luego se transforma en hidroxiapatita Colágeno + proteoglucanos captan fosfato de calcio de la fase acuosa circundante Osteoblastos secretan fosfatasa alcalina que libera iones fosfato que aumentan el ph y la basofilia local favoreciendo la precipitafción del fosfato de calcio. También intervendría la osteoclacina

43 Células del tejido óseo 1) Células osteoprogenitoras (M) Cavidad medular, (Opc) celulas osteoprogenitoras, (Ob) osteoblastos, (Os) osteoide, (Oc) osteocito, (CB) Matriz osea calcificada, (C) canaliculos, (L) limite entre dos laminillas.

44 Células osteoprogenitoras Fibroblastos Condrocitos CFU-F (fibroblast colony forming unit) Adipocitos Fibras musculares Células endoteliales Células osteoprogenitoras Feto: cerca de los centros de osificación y endostio Postparto: capa profunda del periostio -Parecen fibroblastos - Núcleo ovoide claro - Citoplasma claro con límites irregulares - Durante la formación de hueso se dividen y diferencian en osteoblastos (vida fetal, crecimiento y curación de fracturas)

45 2) Osteoblastos

46 Osteoblastos Sintetizan y secretan matriz ósea orgánica: fibras de colágeno, proteoglucanos, osteocalcina, osteopondina y osteonectina Adoptan aspecto de epitelio cúbico sobre el tejido óseo recién formado Se contactan entre si por prolongaciones cortas y delgadas unidas por nexos Núcleo excéntrico y ubicado opuesto a la nueva matriz ósea Basofilia citoplasmática (RER y Golgi desarrollados) Síntesis de fosfatasa alacalina (mineralización del hueso) PTH + Vit D Interleuquina 1, 6 y 11 Osteoblasto Estimula la formación de osteoclastos Atrae células osteoprogenitoras Osteoblasto TGF beta Producción de hueso Maduración de osteoblastos Producción de matriz Inhibe osteoclastos Osteocito (10%) Formación de hueso Osteoblasto Células de recubrimiento óseo

47 Osteoblastos hueso mineralizado OSTEOIDE finamente fibrilar mas basófila por carencia de Ca++ RER GOLGI NEXO Vesículas matriciales x 3400

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50 3) Osteocitos

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52 Osteocitos - verdadera célula ósea - prolongaciones alojadas en canalículos Osteoblasto Atrapado en laguna Osteocito (degradación del RER y Golgi) Células de recubrimiento óseo Comunican el estado del hueso a Osteoclastos Registran diferencias de potencial relacionados con la deformación mecánica del hueso Son los responsables en el mantenimiento de la calidad del tejido óseo

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55 4) Células de recubrimiento óseo (= osteocitos de superficie) -A partir de osteoblastos que finalizaron la formación de hueso - Aspecto de epitelio plano simple - Recubren capas internas y externas del hueso - Distribución dispersa - Apoyada sobre el osteoide (matriz ósea no mineralizada = colágeno) - Se activan a través de señales de los osteocitos y secretan colagenasas que degradan el osteoide, se retraen y permiten la llegada de los osteoclastos

56 5) Osteoclastos

57 Osteoclastos -Multinucleadas (5-10 y hasta 50 núcleos) - Hasta 100 um de diámetro - Células jóvenes basofilia citoplasmática. Luego bien acidófilas - Desarrollo de Golghi, mitocondrias - Citoplasma muy vacuolado (lisosomas primarios) Lagunas de Howship Cavidades de la superficie del hueso donde se apoya el OC

58 Borde fruncido Plegamientos y bolsas de membrana plasmática Presencia de fosfatas ácida entre el borde fruncido y el hueso Secreción de enzimas lisosomales + Indirecta (R en osteoblastos) PTH IL 1, 6 y 11 Fagocitosis de osteocitos colágenos y minerales

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60 CFU-GM Neutrófilos Monocitos-macrófagos Células progenitoras de osteoclastos Viajan por sangre o migración directa al tejido óseo Preosteoclastos (mononucleados) Fusión de varias células + Osteoclastos maduros (multinucleados) IL-6 IL-11 + PTH Vit D Finalizada la resorción el osteoclasto muere por apoptosis

61 TEJIDO OSEO 1-ESPONJOSO 2-COMPACTO MADURO TEJIDO OSEO INMADURO u OSTEOIDE 1 LAMINILLAR LAMINAR HOMOGÉNEO Del adulto En embriones, y en adultos, en tejido óseo en remodelación 2 3

62 Clasificación del tejido óseo según la disposición de la M.E. 1) HOMOGENEO O VASCULAR (preparado por desgaste en opérculo de bagre) Peces *Muy irrigado EN *Osteocitos al azar Reptiles Embriones de vertebrados Etmoides de aves y mamíferos 2) LAMINAR (preparado por desgaste en fémur de pavo) *Láminas: Hileras de osteocitos concéntricas al canal medular Aves Diáfisis de huesos largos de Tortugas Quirópteros Artiodactilos (ciervo, jirafa, camello)

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66 Compacto o haversiano OSTEONAS 3) LAMINILLAR Esponjoso o trabecular TRABECULAS

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