Diagnóstico de Laboratorio en la etapa de eliminación de Sarampión y Rubéola; Indicadores de Laboratorio

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Catalina Bustamante Ferreyra
hace 6 años
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1 INSTITUTO NACIONAL DE SALUD CENTRO NACIONAL DE SALUD PUBLICA Diagnóstico de Laboratorio en la etapa de eliminación de Sarampión y Rubéola; Indicadores de Laboratorio Blgo. Néstor Edwin Cabezudo Pillpe

2 Laboratorio de Sarampión y Rubéola Los avances notables que el Perú ha logrado hacia la erradicación del Sarampión, así como la eliminación de la rubéola, es gracias al apoyo político, financiero y la calidad de estrategias, que están permitiendo consolidar las metas: 0 casos confirmados de sarampión autóctono desde el año casos confirmados de rubéola autóctono desde el caso importado de sarampión el En este sentido el Instituto Nacional de Salud viene cumpliendo su labor esencial en el Marco de la Vigilancia Conjunta Sarampión y Rubéola y Vigilancia Centinela de Síndrome de Rubéola Congénita en garantizar los diagnósticos de laboratorio oportunos

3 Laboratorio de Sarampión y Rubéola Los casos sospechosos de Sarampión y Rubéola serán notificados inmediatamente en forma obligatoria y deberán ser incluidos en el reporte de notificación semanal (NOTI). Se debe obtener muestras de sangre para el diagnóstico serológico por ELISA IgM en el Instituto Nacional de Salud, así mismo obtener muestras de orina e hisopado nasal-oro faríngeo para el aislamiento viral. Ante la presencia de un caso confirmado de sarampión o rubéola por laboratorio en una cadena de transmisión (casos que tienen una fuente infección común), se debe obtener dos o tres muestras de orina e hisopado dentro de los cinco días de inicio de erupción Las Direcciones de Salud que tienen la base de datos de la erradicación de Sarampión (MESS), deberán incluir todos los casos sospechosos de Sarampión y Rubéola, debiendo concordar con la base del NOTI. Las Direcciones de Epidemiología de las DISAS, son los responsables del control de calidad de la ficha de investigación y el Laboratorio de Referencia Regional es el responsable del control de calidad de la muestra de suero, orina e hisopado manteniendo una coordinación estrecha entre ellos.

4 SARAMPION Agente: El virus del Sarampión, Familia Paramyxoviridae, Género: Morbillivirus. Reservorio: El ser humano. Estructura: - Es un virus ARN. - Tamaño: nm. - Presenta antígenos de envoltura con propiedades hemaglutinantes y hemolíticas. Transmisión: Contacto directo o aerosoles.

5 RUBEOLA Agente: El virus del Rubéola, Familia Togaviridae, Género: Rubivirus Reservorio: El ser humano. Estructura: - Es un virus ARN. - Tamaño: nm. - Presenta doble cadena lipídica su genoma esta compuesto por 10, nucleótidos Transmisión: Contacto directo secreción nasofaringea.

6 PROTECCION PASIVA R.N. PROTECCION CON ANTICUERPOS MATERNOS PROTECCION ACTIVA VACUNA ENFERMEDAD SARAMPION SUSCEPTIBLES VIRUS DEL SARAMPION REPLICACION VIRAL TEJIDO LINFOIDE REGIONAL: CONJUNITIVA RINOFARINGE VIREMIA I REPLICACION VIRAL TEJIDO LINFOIDE SISTEMICO VIREMIA II I N C B A C I O N 8 A 13 FASE DESCAMATIVA: DESCAMACION FINA FASE ERUPTIVA (4 a 5 días) MACULOPAPULAR GENERALIZADA CEFALO - CAUDAL FASE PRODROMICA (4 a 5 días) FIEBRE CONJUNTIVITIS CORIZA TOS KOPLIK D I A S

Control de calidad del diagnóstico serológico El INS participa desde el año 2000 en el programa de control de calidad externo a través de paneles realizados por el centro colaborador de la OMS

7 Control de calidad del diagnóstico serológico El INS participa desde el año 2000 en el programa de control de calidad externo a través de paneles realizados por el centro colaborador de la OMS en la región (CDC-EEUU), obteniendo 100% de concordancia durante todos los años año 2000 año 2001 año 2002 año 2003 año 2004 año 2005 año 2006 año 2007 año 2008 año 2009 año 2010

8 Indicadores de Vigilancia de Sarampión y Rubéola Indicador Estándar (%) * Notificacion oportuna % Investigacion adecuada % Visita domiciliaria en 48 horas % Muestra adecuada %Muestra que llega al laboratorio < 5 dias % Resultado de laboratorio <4 dias * SE26 Tabla 1. Indicadores de vigilancia de sarampion-rubeola. Perú *. Fuente: Dirección General de Epidemiología - RENACE / MINSA.

9 ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO AGOSTO SETIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICEMBRE ENERO FEBERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO JULIO AGOSTO SETIEMBRE OCTUBRE NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO MARZO ABRIL MAYO JUNIO Porcentaje Proporción de resultados que son emitidos dentro de los 4 días

10 Indicadores en la etapa final de certificación de eliminación del sarampión y la rubéola Indicadores para evaluar la calidad de la vigilancia integrada de sarampión y rubéola y monitorear la eliminación Criterio Confirmación por laboratorio Indicador % casos sospechosos con muestra adecuada de sangre Estándar de cumplimiento > 80% Detección viral % de brotes con muestra adecuada y al menos una detección/aislamiento viral > 80%

11 Indicadores para Evaluar la Calidad de la Vigilancia del SRC y Monitorear la Eliminación Criterio Tasa de reporte Indicador Tasa anual de reporte de casos sospechosos de SRC Estándar de cumplimiento > 1 por NV Confirmación por laboratorio. % de casos confirmados por laboratorio. > 80% Detección viral. Monitoreo de la excreción del virus % de casos con muestras para detección/aislamiento viral. % casos confirmados con al menos 2 pruebas de detección/aislamiento negativo, después de los 3 meses de edad, y con un intervalo de un mes entre ellas. > 80% > 80%

12 Muestra para el diagnóstico serológico: Detección de anticuerpos IgM e IgG Suero sanguíneo Extraer 5 ml de sangre venosa sin anticoagulante. Centrifugar a 2500 rpm x 10 min, (si no hay centrífuga dejar el tubo en reposo por 2 horas para que se separe el coágulo del suero) Trasvasar entre 0,5-2,0 ml a un vial estéril.

Muestra para el diagnóstico virológico: Aislamiento Viral Hisopado nasal y

Procedimientos: Hasta 5 días después del inicio de la erupción En un frasco

Centrifugar a 2500 rpm x 10 min y colocar el sedimento en medio de

13 Muestra para el diagnóstico virológico: Aislamiento Viral Hisopado nasal y faríngeo Hasta 5 días después del inicio de la erupción Orina Procedimientos: Hasta 5 días después del inicio de la erupción En un frasco estéril colectar entre 50 y 100 ml de orina. Centrifugar a 2500 rpm x 10 min y colocar el sedimento en medio de transporte viral (MTV). Si no se cuenta con MTV, se debe mantener en refrigeración (2-8 C) para su envío al INS. NO congelar la muestra.

14 Conservación de muestras Suero En refrigeración (2-8 ºC) hasta por 24 h. En caso se requiera mayor tiempo debe congelarse a -20 C. Hisopado nasal y faríngeo En refrigeración (2-8 ºC) hasta por 24 h. En caso se requiera mayor tiempo debe congelarse a -20 C. Orina : En refrigeración (2-8 ºC). No congelar la muestra Transporte de la muestra Mantenimiento de la cadena de frío según corresponda Enviar rápidamente al Instituto Nacional de Salud

15 Envío de muestras para aislamiento viral DISA/DIRESA 2008 Total AMAZONAS 1 AYACUCHO 12 JUNIN 2 LIMA 3 MOQUEGUA 2 PASCO 1 TUMBES 1 TOTAL 22 DISA/DIRESA 2009 Total Ayacucho 34 Callao 1 Huancavelica 2 Huanuco 1 Junin 8 Lima Ciudad 2 Pasco 2 TOTAL 50 DISA/DIRESA 2010 Total Ayacucho 28 Junin 19 Pasco 1 Callao 6 Lima Ciudad 4 Arequipa 1 Huánuco 14 La Libertad 4 Lima Norte 2 Madre de Dios 1 TOTAL 80

16 CASOS REPORTADOS POR UCAYALI CASOS SOSPECHOSOS RUBEOLA CASOS SOSPECHOSOS RUBEOLA

Epidemiología Molecular Figure 2: Major Global

Resultados y verificación de la ausencia de cepas

rubéola (mediante detección viral) en todo los

Genotypes B2 B3 D4 D5 D6 D8 H1 D4 D6 D5 D4 B3 B2

by WHO Measles/Rubella Laboratory Network *Data

17 Epidemiología Molecular Figure 2: Major Global Measles Virus Transmission Pathways Resultados y verificación de la ausencia de cepas endémicas de los virus del sarampión y de la rubéola (mediante detección viral) en todo los países de las Américas. Genotypes B2 B3 D4 D5 D6 D8 H1 D4 D6 D5 D4 B3 B2 D4 D8 D5 H1 D5 H1 Acknowledgement: Data provided by WHO Measles/Rubella Laboratory Network *Data until epidemiological week 43/2007 Transmission pathways with Epi links Suspected transmission pathways

Porcentaje de usuarios con 1 visita según DISA/DIRESA Región Usuarios con cero visitas Usuarios con? 1 visita* Numero total de usuarios % uso AMAZONAS 14 4 18 33.

0% HUANCAVELICA 11 8 19 42.1% HUANUCO 7 15 22 68.2% ICA 13 10 23 51.7% JUNIN 14 15 29 51.7% LA LIBERTAD 8 6 14 42.9% LAMBAYEQUE 19 13 32 40.6% LIMA 175 186 361 51.

26 Porcentaje de usuarios con 1 visita según DISA/DIRESA Región Usuarios con cero visitas Usuarios con? 1 visita* Numero total de usuarios % uso AMAZONAS % ANCASH % APURIMAC % AREQUIPA % AYACUCHO % CAJAMARCA % CALLAO % CUSCO % HUANCAVELICA % HUANUCO % ICA % JUNIN % LA LIBERTAD % LAMBAYEQUE % LIMA % LORETO % MADRE DE DIOS % MOQUEGUA % PASCO % PIURA % PUNO % SAN MARTIN % TACNA % TUMBES % UCAYALI %

Lucas Cobas Atoche 1año de edad Vacunado 31/01/2011 Rubéola IgM

27 CASO 1 Yovana Colla Santi Edad 16 años Rubéola IgM positivo Rubéola IgG positivo Sarampión IgM negativo Sarampión IgG positivo CASO 2 Lucas Cobas Atoche 1año de edad Vacunado 31/01/2011 Rubéola IgM positivo Rubéola IgG valor limite Sarampión IgM negativo Sarampión IgG positivo

29 CONCLUSIONES CASOS FALSOS POSITIVOS CASOS FALSOS NEGATIVOS MUESTRAS PARA AISLAMIENTO VIRAL OBTENCION DE SEGUNDA MUESTRA NO HAY PRUEBAS 100% ESPECIFICAS RESULTADOS IgM (INDICADOR) RESULTADOS IgG (INVESTIGACIÓN)

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