Tracto genital masculino Continuación

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1 Tracto genital masculino Continuación

2

3 Rete Testis

4 Epidídimo

5 Epidídimo en Punción de Testículo

6

7 TEM de epidídimo de rata

8 SEM de Epidídimo de ratas: Estereocilias

9 Espermatozoides en epidídimo: 2 semanas. Adquieren movilidad progresiva (proteína de epidídimo (L-carnitina) activa Adenilato Ciclasa?) Unión de CRISP1 de epidídimo Factores decapacitantes: Protección contra capacitación prematura (pérdida de colesterol y ácidos grasos poliinsaturados) Altas concentraciones de: Fosfatidiletanolamina (viscosidad), glicerofosforilcolina (energía), alfaglucosidasa (marcador de epidídimo) Oxidación de bases de ADN fragmentación (cuando es intensa, se recurre a ICSI con espermatozoides de punción testicular)

10

11 Epitelio cilíndrico Epitelio Cilíndrico Músculo liso Músculo liso Conductos Deferentes

12 Vesícula seminal

13 Próstata

14 Formación del semen Fluido testicular y epidimario con espermatozoides Secreción prostática Secreción de Vesículas Seminales Secreción de Glándulas bulbouretrales

15 Secreción Epididimaria Alfa-glucosidasa (marcador) L-Carnitina (marcador)

16 Secreción Prostática Acido Cítrico Fosfatasa ácida Zn+2 (bacteriostático, estabilizador de ADN, inhibidor de acrosina) Enzimas que coagulan proteínas seminales que aporta Vesícula seminal Espermina (bacteriostático, activador de acrosina) Albúmina Antígeno Prostático específico (PSA). Prostasomas (vesículas con alto contenido de colesterol: inhibidores de capacitación??)

17 Secreción de Vesículas Seminales Bicarbonato K +1 Fructosa (aporte energético para la movilidad) Seminogelin (proteína que coagula en la eyaculación) Prostaglandinas Acido Ascórbico (y otras sustancias reductoras son inhibidores de lipoperoxidación)

18 Utilidad de marcadores en plasma seminal

19 ESTRÉS OXIDATIVO Desequilibrio entre producción de radicales libres de oxígeno y agentes reductores. Consecuencia: lipoperoxidación de membranas (ácidos grasos insaturados), fragmentación de ADN, oxidación de sus bases. Origen frecuente de radicales libres: mitocondrias de espermatozoides anormales, con gota citoplasmática)

20 Semen en tracto genital femenino Semen en fondo de saco vaginal: coagulación y ph alcalino protegen contra acidez vaginal Aspiración de semen por acción de oxitocina Entrada a endocérvix: lisis del coágulo, eliminación de factores descapacitantes, acción de sustancias (albúmina) aceptoras de colesterol: CAPACITACIÓN

21 CAPACITACIÓN Aumento de fluidez de membrana plasmática del espermatozoide (salida de colesterol) Modificación de moléculas en superficie (receptores de manosa: posterior unión a ZP) Entrada de iones: activación de Adenilato Ciclasa Fosforilación de Prot. en Tyr en vaina fibrosa Hiperactivación

22 Fosforilación de proteínas en Tyr: Fluorescencia en flagelo con Ac marcados con Fluoresceína

23 Fosforilación de Proteínas en Tyr Inmunomarcación

24

25 CatSper (canal iónico)

26 CatSper y regulación de Ca +2 en la fosforilación de P-Tyr (Chung et al, Cell 2014) Flagelo de rata normal y sin CatSper: acumulación de p-tyr en flagelo

27 La capacitación origina el movimiento hiperactivo y prepara al espermatozoide para la reacción acrosomal Espermatozoide en oviducto: alcanza el cumulus ooforus y disuelve la matriz extracelular con hialuronidasa de acrosoma y de membrana plasmática Llegada a ZP, unión con ZP3 y Reacción Acrosomal

28

29 Reacción acrosomal

30

31 Marcks

32

33 Espermatozoide en espacio perivitelino: unión con ovocito (integrina de ovocito, fertilina del espermatozoide) Fusión de membranas en la zona ecuatorial del espermatozoide Entrada del espermatozoide, organización del huso mitótico desde el centríolo del espermatozoide. Aumento de Ca +2 en ovocito finalización de meiosis

34 Decondensación del núcleo espermático por agentes reductores del ovocito (ruptura de S-S pro-núcleo masculino Liberación de gránulos corticales desde ovocito a zona perivitelina alteración de ZP: evita polifertilización Singamia: unión de pro-núcleos masculinos y femeninos

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