Fucsina ácida al 0,1%, escarlata de Biebrich al 0,9% y ácido acético al 1% en agua desionizada con Triton X-100 al 1%

Transcripción

1 Artisan Masson s Trichrome Stain Kit Nº de catálogo AR173 Uso previsto Para uso en diagnóstico in vitro. El Masson s Trichrome Stain Kit ha sido diseñado para su uso en laboratorio con objeto de identificar, por microscopía óptica, el tejido conjuntivo y muscular en las muestras de tejido. 1-3 Se pueden utilizar muestras (incluidas en parafina) procesadas de la manera habitual. El fijador preferido es formol tamponado neutro. La interpretación clínica de cualquier tinción positiva, o la ausencia de la misma, debe ser complementada por estudios morfológicos con los controles adecuados y debe ser evaluada por un patólogo cualificado dentro del contexto de la historia clínica del paciente y otras pruebas diagnósticas. Todos los reactivos del Masson s Trichrome Stain Kit se han preparado de forma óptima para su uso en el Dako Artisan Staining System y no precisan ni mezcla ni dilución. Resumen y explicación El Masson s Trichrome Stain Kit se utiliza para identificar el tejido muscular, fibras de colágeno y eritrocitos en muestras de tejido. 1-3 La tinción tricrómica de Masson se utiliza con frecuencia para demostrar una deposición aumentada de colágeno asociada a la sustitución de tejido funcional por tejido de cicatrización. Esto resulta útil para el diagnóstico de la esclerosis, en la cual un colágeno engrosado sustituye al tejido normal provocando la disfunción del hígado. La tinción tricrómica de Masson también es más adecuada para demostrar el tejido muscular que la tinción con hematoxilina y eosina. Principio del procedimiento Las fibras de colágeno y la fibrina no se tiñen con las tinciones de hematoxilina y eosina. El Masson s Trichrome Stain Kit se basa en el procedimiento original de Masson. 1-3 El tejido conjuntivo es una red tridimensional de proteínas. Estas redes pueden formarse a partir de distintas proteínas, que les imparten diferentes características físicas. La estructura y la densidad de la red de proteínas pueden estar directamente relacionadas con las reacciones de tinción de los componentes de tejido. 2 El Masson s Trichrome Stain Kit ha sido optimizado para uso con el Artisan Staining System. Tras la tinción, los portaobjetos secados al aire se retiran del instrumento, se aclaran con xileno o un sustituto de xileno y se montan utilizando un medio de montaje adecuado. Los resultados se interpretan con un microscopio óptico estándar. Tejido de control: Útero, intestino delgado, hígado, apéndice o trompa de falopio Reactivos suministrados El Masson s Trichrome Stain Kit está compuesto por ocho cartuchos de dispensador listos para su uso, cada uno con: Solución de Bouin Ácido pícrico al 0,9%, formaldehído al 23,8% y ácido acético al 4,8% en agua desionizada Hematoxilina A de Weigert Hematoxilina al 1%, alcohol al 95% Hematoxilina B de Weigert Cloruro férrico al 1,16% y ácido clorhídrico al 1% en agua desionizada Fucsina ácida escarlata de Biebrich Fucsina ácida al 0,1%, escarlata de Biebrich al 0,9% y ácido acético al 1% en agua desionizada con Triton X-100 al 1% Ácido fosfotúngstico fosfomolíbdico, 2 cartuchos Ácido fosfotúngstico al 2,5% y ácido fosfomolíbdico al 2,5% en agua desionizada ( ) P04012ES_01/AR173/ p. 1/5

2 Azul de anilina Azul de anilina al 2,5% y ácido acético al 2% en agua desionizada con Triton X-100 al 1% Ácido acético al 3% Ácido acético en agua desionizada Dako suministra estos reactivos con una formulación óptima para su uso según las instrucciones facilitadas para la tinción en cortes de tejido preparados. Cualquier desviación de los procedimientos recomendados de las pruebas puede invalidar los resultados declarados esperados. Material necesario, pero no suministrado 1. Portaobjetos 2. Artisan Staining System 3. Wash Solution (nº de catálogo AR102) Precauciones 1. Para usuarios profesionales. 2. Si la solución de Bouin se seca, puede producirse una posible descomposición explosiva por vibración o aumento de la temperatura. 3. Minimice la contaminación microbiana de los reactivos, ya que es posible que se incrementen las tinciones inespecíficas. 4. Los cartuchos de reactivos pueden contener solución residual tras completar el número de pruebas especificado. 5. El uso de tiempos de incubación o temperaturas diferentes a los especificados puede producir resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio realizado sobre el procedimiento original. 6. Almacene los cartuchos de reactivos en posición vertical cuando no se estén utilizando en el instrumento. 7. Mantenga los cartuchos de reactivos alejados de la luz solar directa y de otras fuentes generadoras de calor. 8. Como norma general, no se permite a los menores de 18 años utilizar este producto. Los usuarios deben ser instruidos meticulosamente en los procedimientos laborales adecuados, las propiedades peligrosas del producto y las instrucciones de seguridad necesarias. Consulte la ficha de datos de seguridad para obtener más información. 9. Utilice el equipo de protección personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel. 10. La solución que no se utilice deberá desecharse con arreglo a las normativas locales, provinciales y nacionales. 11. Puede solicitar la hoja de datos de seguridad que se encuentra disponible para usuarios profesionales. Peligro Bouin s Solution: 10-30% Formaldehyde, 1-5% Acetic acid, 0.1-1% 2,4,6-Trinitrophenol H302 + H312 + Nocivo en caso de ingestión, en contacto con la piel o si se inhala. H332 H314 Provoca graves quemaduras en la piel y lesiones oculares. H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica. H350 Puede provocar cáncer. H341 Se sospecha que provoca defectos genéticos. H335 Puede irritar las vías respiratorias. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. P271 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. P261 Evitar respirar vapores. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P272 La ropa de trabajo contaminada no debe salir del lugar de trabajo. P308 + P313 EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico. P304 + P340 + EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al exterior y mantenerla en reposo en una posición confortable para respirar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. P P330 + P331 EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito. P303 + P361 + P353 + P363 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. P302 + P352 + P312 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Llamar un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico si la persona se encuentra mal. P333 + P313 + En caso de irritación cutánea o sarpullido: consultar a un médico. lentes de contacto, cuando estén presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. ( ) P04012ES_01/AR173/ p. 2/5

3 Peligro Weigert s Hematoxylin A: % Ethanol, 1-5% Methanol H225 Líquido y vapores muy inflamables. H360 Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. H371 Puede provocar daños en los órganos. H335 Puede irritar las vías respiratorias. H336 Puede provocar somnolencia o vértigo. H373 Puede provocar daños en los órganos tras exposiciones prolongadas o repetidas. P201 Procurarse las instrucciones antes del uso. P202 No manipular antes de haber leído y comprendido todas las precauciones de seguridad. P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio. P210 Mantener alejado del calor, superficies calientes, chispas llamas al descubierto y otras fuentes de ignición. No fumar. P241 Utilizar material [eléctrico/ P242 No utilizar herramientas que produzcan chispas. P243 Tomar medidas de precaución contra las descargas electrostáticas. P233 Mantener el recipiente herméticamente cerrado. P271 Utilizar sólo al aire libre o en un lugar bien ventilado. P260 No respirar vapores. P270 No comer, beber o fumar mientras se manipula este producto. P314 Consultar a un médico si la persona se encuentra mal. P309 + P311 EN CASO DE exposición o malestar: Llamar a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. P304 + P340 + P312 EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al exterior y mantenerla en reposo en una posición confortable para respirar. Llamar un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico si la persona se encuentra mal. P303 + P361 + P353 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo): Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua [o ducharse]. P403 Almacenar en un lugar bien ventilado. P235 Mantener fresco. Weigert s Hematoxylin B: 1-3% Iron chloride (FeCl3), hexahydrate, 0.1-1% Hydrochloric acid H315 Provoca irritación cutánea. P302 + P352 + P P363 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua y jabón abundantes. Quitar la ropa contaminada. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. P332 + P313 En caso de irritación cutánea: consultar a un médico. Biebrich Scarlet Acid Fuchsin: 0.1-1% Poly(oxy-1,2-ethanediyl),.alpha.-[4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl]-.omega.-hydroxy- ( ) P04012ES_01/AR173/ p. 3/5

4 Peligro Phosphotungstic Phosphomolybdic Acid: 1-5% Phosphotungstic phosphomolybdic acid H314 Provoca graves quemaduras en la piel y lesiones oculares. P304 + P340 + EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a la víctima al exterior y mantenerla en reposo en una posición confortable para respirar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. P EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. P330 + P331 Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito. P303 + P361 + EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL Quitar inmediatamente toda la ropa contaminada. Enjuagar la piel con agua o P353 + P363 + ducharse. Lavar la ropa contaminada antes de volverla a usar. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. + lentes de contacto, cuando estén presentes y pueda hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado. Llamar inmediatamente a un CENTRO DE INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA o a un médico. Aniline Blue: 1-5% Acetic acid, 0.1-1% Polyoxyethylene octyl phenyl ether Almacenamiento Todos los componentes se deben conservar a la temperatura que se indica en la etiqueta. No utilizar después de la fecha de caducidad. Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas, el usuario debe comprobar dichas condiciones. No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto. Por consiguiente, se debe analizar el tejido adecuado como forma de control de dicha verificación. En caso de observarse una coloración inesperada que no pueda ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio o por un almacenamiento incorrecto, póngase en contacto con la Asistencia Técnica de Dako. Procedimiento del instrumento / Procedimiento de tinción Observaciones preliminares Consulte la Guía del usuario del Artisan para conocer las instrucciones detalladas. Cebado de los cartuchos de reactivos Antes de comenzar la tinción, es necesario cebar los cartuchos de reactivos y comprobar que no presenten fugas. Compruebe el cebado de cada cartucho de reactivo siempre que se utilice un nuevo kit y antes del primer ciclo de tinción de la jornada. 1. Sobre una toalla de papel, retire la tapa de envío de color rojo o negro, si existen, del conjunto de dispensación del cartucho de reactivos tirando suavemente del tapón hacia abajo. 2. Para cebar un cartucho de reactivos justo tras la recepción, mantenga el cartucho de reactivos con el conjunto de dispensación apuntando hacia abajo y golpee suavemente el lateral del cartucho de reactivos 2 3 veces a fin de expulsar cualquier burbuja de aire que pueda estar atrapada en el conjunto de dispensación. 3. Comprima y suelte completamente el émbolo 3 4 veces con rapidez, teniendo cuidado de absorber cualquier líquido expulsado con una toalla de papel, una gasa absorbente o un material similar, hasta que se consiga un flujo uniforme. 4. Evite dispensar cantidades de reactivo excesivas durante el cebado. Un cebado excesivo tendrá como resultado una pérdida de reactivo, que provocará que el cartucho de reactivos se agote antes de completar el número de pruebas indicado. 5. Antes de cada uso, los cartuchos de reactivos se han de cebar 1 2 veces, comprobando que se obtenga un flujo uniforme. 6. Manteniendo el cartucho de reactivos en una mano, deslice la guía de montaje de la parte trasera del cartucho de reactivos por las ranuras del tambor de reactivos hasta que el cartucho quede perfectamente colocado. Procedimiento Consulte la sección Informes del procedimiento del software del ordenador Artisan para conocer los procedimientos detallados recomendados. Una vez completada la tinción, los portaobjetos estarán secos. Sumerja los portaobjetos en xileno o sustituto de xileno y monte permanentemente. Interpretación de la tinción Fibras musculares:...rojo Fibrina:...Rosa Colágeno:...Azul Núcleos:...Azul o negro Eritrocitos:...Rojo ( ) P04012ES_01/AR173/ p. 4/5

5 Características de resultados Reproducibilidad Se determinó una reproducibilidad intraensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en un instrumento. Se determinó una reproducibilidad interensayo del 100% tiñendo 12 portaobjetos que contenían el mismo tejido de control en tres instrumentos distintos. Solución de problemas Consulte la sección Mantenimiento y solución de problemas de su Guía del usuario del Artisan o póngase en contacto con nuestra asistencia técnica. Referencias 1. Bancroft JD, Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques, 4th edition, Churchill Livingstone Inc., New York, New York, Luna LG. Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd edition. McGraw-Hill Book Company, New York, New York, Luna LG. Histopathological Methods and Color Atlas of Special Stains and Tissue Artifacts, 1st edition, American Histolabs, Inc., Gaithersburg, MD, 1992 Edición 04/15 ( ) P04012ES_01/AR173/ p. 5/5