Evaluación de los efectos producidos por VOCs sobre embriones humanos Viviana Vásquez España

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David Quintero Arroyo
hace 6 años
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1 Evaluación de los efectos producidos por VOCs sobre embriones humanos Viviana Vásquez España Mariano Pérez FECUNDART Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción Congreso ESHRE 2016

2 Introducción VOCs Materiales de construcción, ventilación, Combustión etc. Actividades de rutina en la clínica Perfumes, desodorantes, ropa Materiales plásticos de cultivo Incubadoras

3 Comparar desarrollo embrionario hasta D6 en diferentes diluciones de VOCs Blastocisto scoring Sobrevida D6. Objetivos Biopsia trofoectodermo D6 futuros análisis cromosómicos

4 Metodología Embriones humanos D3 vitrificados donados para ciencia células < 25% fragmentos Exclusión: Endometriosis, >40 años y factor masc. severo

5 Metodología Cultivo embrionario desde D3 hasta D6. Contaminación de medios con 3 diluciones Contacto directo con 5 VOCs: _Benceno, _Limoneno _Estireno _1,1,2,2 tetracloro etano _hexacloro 1,3 butanodieno. Espectrometría para asegurar VOCs en medio de cultivo Todos con concentraciones <1% OLV

6 Estudio prospectivo 163 embriones 13 grupo control Metodología 75 grupo experimental ( 3 Grupos) Exterior ⁵ ppm Laboratorio ⁵ppm Doble laboratorio ⁵ ppm

7 Resultados Desarrollo Benzeno ,6 46, control benzeno ext. benzeno lab. benzeno doble % blastos % blastos expandidos % blastos de buena calidad Benzeno lab. Significativa menor cantidad de blastos. expandidos, blastos de buena calidad y detenidos.

8 ,6 46,2 control Resultados Desarrollo Limoneno limoneno ext limoneno lab. limoneno doble % blastos % blastos expandidos % blastos de buena calidad Limoneno Lab. Y doble Lab. menor cantidad significativa de blastos. expandidos, blastos de buena calidad y detenidos.

9 Conclusiones Efectos negativos en el desarrollo embrionario. > [VOCs] > detención de crecimiento y < blastocistos de buena calidad.

10 Envejecimiento in vivo del ovocito e ICSI Aida Pujol Masana España Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción Congreso ESHRE 2016

11 Introducción Maduración citoplasmática y nuclear del ovocito sistema complejo y debe ser completo para óptimas condiciones de fertilización 2-4 hs pre incubación entre OPU e ICSI es lo óptimo Una excesiva pre incubación provocaría alteraciones en ultraestructura ovocitaria

12 Ver si el tiempo entre OPU-ICSI afecta: Tasa de Fertilización Embarazo Bioquímico Embarazo Clínico Embarazo en Curso Nacidos Vivos. Objetivos

13 Diseño Estudio retrospectivo 1478 ICSI ICSI+ET Fresco Tiempo OPU-DN Tiempo DN-ICSI Tiempo OPU-ICSI

14 Materiales Resultados Promedio Edad 38.4 ( ) Semen Concentración 56.7% p 43.3% d /ml Movilidad progresiva 24.8%

15 Laboratorio Resultados N ovocitos 8,4 N Mll 6 Fertilización % 70% Resultados promedio Clínica Resultados promedio Embarazo bioquímico 38,2 % Embarazo clínico 28,8 % Embarazo en curso 21,8 % Nacidos vivos 17,5 %

16 Resultados

17 Resultados

18 Resultados

19 Resultados Por cada hora de mas esperada OPU-ICSI se reduce en 7,9% y 8% la probabilidad de embarazo bioquímico y clínico. Disminución a través del tiempo en embarazo evolutivo y niños nacidos vivos pero no significativo. Efecto similar en DN-ICSI Tiempo OPU-DN no hubo diferencias en PR Aumento de OPU-ICSI redujo tasa de fertilización

20 Icsi en casos que no son factor masculino en pacientes de 40 o mas Samer Tannus Canadá Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción Congreso ESHRE 2016

21 Introducción Defectos estructurales de la pelúcida y citoplasma disminuirían la fertilización? Icsi efectivo en casos factor masculino Incremento de su uso para casos que no son indicación de ICSI Pacientes de edad avanzada tienen reserva ovárica baja, temor a falla de fertilización FIV Icsi mejora tasas de embarazo y niños nacidos vivos en pacientes de 40 o mas? Comité de practica de la ASRM 2012 : existe insuficiente evidencia para ICSI sin factor masculino

22 Metodología 745 mujeres entre 40 y 43 años No factor masculino 255 FIV 490 ICSI Decisión del médico (no randomizado) Pacientes < 50% fertilización fueron excluidas No hubo diferencias de edad BMI, FSH basal, años de esterilidad, tipo de fertilidad, N ciclos previos

23 Metodología Transferencia en D2 D3 o D5 > de 2 embriones fueron transferidos Si > o = 3 embriones D3 D5

24 Resultados Ovocitos Recolectados FIV ICSI P 7.8±5.6 7±4.7 NS MII 6.6± ±3.5 < Fertilización 64% 67% NS Falla Fertilización 9% 9.7% NS N Embriones Transferidos 1.48± ±0, SET 51.1% 42.5% 0.03 Transf. Blasto. 36% 26% 0.005

25 Resultados- Conclusiones FIV ICSI P Ciclos con embriones sobrantes vitrif. 26,4% 19.7% 0.04 N embriones vitrif 2.5± ± Tasa embarazo 29.5% 22.8% 0.7 Tasa de nacidos vivos 11.9% 9,6% 0.7 No hay diferencias en tasa de fertilización, tasa de nacidos vivos. > Cantidad de MII y embriones disponibles, > Formación y transferencia de blastocistos en grupo FIV. > Cantidad de embriones congelados y podría aumentar tasa acumulativa de embarazo

26 Resultado con 3 ovocitos recolectados FIV ICSI P MII 1.8± ±0.78 NS Tasa Fertil. 62% 66% NS Tasa de Falla fertil. 26% 22% NS Tasa Embarazo clínico Tasa Nacidos Vivos 11.8% 7.7% NS 7.8% 4.3% NS 236 pacientes 164 FIV 72 ICSI

27 PZT transferencia de pre-zigotos en pacientes de mal diagnostico Dianna Payne Japón Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción Congreso ESHRE 2016

28 Introducción Estimulación ovárica-medios de cultivo-selección embrionaria A pesar de esto grupo de mal pronóstico Baja tasa de nacidos vivos Edad materna calidad ovocitaria y genética afecta resultados clínicos El cultivo de ovocitos podría reducir desarrollo de embriones?

29 Introducción Extrusión del segundo cuerpo polar: Predice fertilización normal Ovocitos con 3PN retienen 2 PB Time lapse sugiere que extrusión 2PB cerca de las 3 hs post ICSI da mejores embriones Útero desincronizado? Ambiente hostil? Transferencias en PN han dado embarazos

30 Metodología Edad promedio 38,5 años (31-46) Estimulación y OPU 35 hs post hcg Cultivo por 2-3 horas post ICSI en time lapse Ovocitos con 2PB dentro de las 2-3 horas fueron transferidos Transferencia dentro de los 60 min de extrusión 2PB Transferencia eco guiada

31 43 pacientes, EMA, ciclos previos con pobre resultado 191 ciclos previos con set( 4 embarazos 7 abortos) 69 ciclos de PZT, single transfer 574 ovocitos 419 MII Metodología 218 ovocitos fueron cultivos y vitrificados Hora de extrusión 2 PB 2.7 hs

32 Resultados-Conclusiones set Embarazos Live Birth Abortos PZT 69 5(7.2%) 5(7.2%) 0 Convencional ET (5.8%) 4(2.1%) 7(3.7%) _Un útero asincrónico puede soportar embriones y llegar a término. _Igual tasa de embarazo, mejor tasa de nacidos vivos. _No hubo abortos. _Ventajas en cultivo reducido en pacientes de mal pronostico. _Método de bajo costo si no se vitrifica.

33 Vitrificación D3 VS D5/desvitrificación/Cultivo y Transferencia en blastocisto Mustecep Kavrut Turquía Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción Congreso ESHRE 2016

34 Buenas tasas sobrevida e implantación Resultados aceptables al comparar frozen embryo transfer vs fresh embrio transfer Muchas clínicas tienen política freeze all Diferentes métodos Introducción Diferentes estadios del embrión Tendencia de vitrificar en estadío de blasto No hay consenso de cual es el mejor estadío para congelar

35 Objetivo Evaluar posibles efectos de criopreservación en estadio de clivaje temprano ( D3) vs blastocisto, desvitrificación/cultivo y transferencia en estadío de blastocisto También comparar FET vs fresh ET

36 Método 1497 ciclos Pacientes buenas respondedoras < 38 años No factor masculino No malas respondedoras No fallas de implantación No pool de ovocitos No esp. testiculares Pacientes fueron incluidos solo 1 vez

37 Método GRUPO 1: E vitrificados en D3, descongelados y cultivados hasta D5/transferidos D5 GRUPO 2: E vitrificados D5, descongelados y transferidos D5 Grupo 3: E fueron cultivados y transferidos en D5 sin ningún tipo de criopreservación

38 FET D3-D5 FET D5-D5 FRESH D5 P ciclos Ovocitos totales Resultados < MII < PN < N E transf

39 Resultados FET D3-D5 ET FET D5-D5 ET FRESH D5 ET P TASA EMBARAZO EMBARAZO CLINICO EMBARAZO EVOLUTIVO TASA DE ABORTO 75,3 % 65,2 % 63,0% < 0,001 70,1 % 61,2 % 57,2 % < ,4 % 51,7 % 47.9 % % 20,7 % 24,0 % _Tasa embarazo bioquímico, embarazo clínico y embarazos evolutivos es superior en grupo D3-D5. _Igual tasa de aborto. _No se toma en cuenta tasa acumulativa en este estudio. _Resultados de acuerdo a embarazos no niños nacidos.

40 Resultados 80,00% 70,00% 60,00% 75,30% 70,10% 65,20% 61,20% 63,00% 57,20% 50,00% 40,00% 30,00% tasa embarazo embarazo clinico 20,00% 10,00% 0,00% FET D3-D5 ET FET D5-D5 ET FRESH D5 ET 0 0

41 Conclusión Criopreservación en D3, desvitrificación, cultivo y posterior transferencia en blastocisto es mas beneficioso que criopreservación de blastos y posterior desvitrificación.

42 MUCHAS GRACIAS

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