Guía de Práctica Clínica NORMATIZACIÓN DEL ALGORITMO DIAGNÓSTICO DEL LABORATORIO PARA HEMOGLOBINOPATÍAS

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1 2011 Guía de Práctica Clínica NORMATIZACIÓN DEL ALGORITMO DIAGNÓSTICO DEL LABORATORIO PARA HEMOGLOBINOPATÍAS Hospital Provincial Neuquén Dr. Eduardo Castro Rendón Provincia de Neuquén Equipo de Trabajo: Vanina Guillermel. Bioquímica. Residente de 3º año. Laura Gonzalez. Bioquímica, Sector de Proteínas Servicio de Laboratorio Redactor: Vanina Guillermel Coordinación Dr. Molini Walter J. Médico Clínico - Metodología en elaboración de Guías de Práctica Clínica - Comité de Docencia e Investigación. HPN Servicio de Laboratorio. HPN Residencia de Bioquímica. HPN

2 ÍNDICE DE CONTENIDOS: Introducción 2 Justificación 3 Metodología 4 Alcance 4 Planteamiento del problema 5 Beneficios esperados 5 Anexo 6 Referencia Bibliográficas 7 1

3 INTRODUCCIÓN: Las Hemoglobinopatías son desordenes hereditarios de la proteína globina. Estas pueden ser alteraciones cualitativas o cuantitativas de la globina, secundarias a mutaciones genéticas, cuya consecuencia puede ser una modificación estructural (hemoglobinopatías estructurales) o una disminución de la síntesis de una cadena de globínica estructuralmente normal ( Talasemias). Las Hemoglobinopatías son los defectos genéticos más comunes en el mundo. Según un informe de la Secretaria de la OMS de mayo un 5% de la población mundial es portadora, es decir personas sanas que han heredado sólo un gen mutante de uno de los progenitores. Cada año nacen en el mundo aproximadamente niños con síndrome talasémicos (30%) o drepanocítico (70%), y si bien su frecuencia es elevada en las regiones tropicales y subtropicales, las migraciones han ocasionado que se distribuyan en todo el mundo. Estudios realizados en nuestro país demostraron que un 0.8% de la población es portadora de β-talasemia y la prevalencia de Hb S es prácticamente nula, 0.23% 2. En nuestra provincia la prevalencia es < 1 %, mayoritariamente β-talasemia menor 3. 2

4 JUSTIFICACIÓN: En el Sector de Proteínas del Servicio de Laboratorio se reciben muestras de sangre entera, mayoritariamente del Servicio de hematología y se realiza, actualmente, como única prueba de laboratorio la corrida electroforética de Hb. La cuantificación de las fracciones es llevada a cabo por densitometría por escaneo. Sin embargo, la cuantificación de Hb A 2 por densitometría-escaneo tiene la desventaja de sobreestimar los niveles de dicha Hb. Es por esto que, ya hace algunos años, el Comité Internacional para la Estandarización en Hematología recomienda el método cromatográfico para A 2 /S, a través de columnas de intercambio aniónico, como método de referencia. De esta manera se justifica la implementación de la incorporación de columnas de intercambio aniónico para la cuantificación de Hb A 2 y Hb S, como así también la incorporación de otras pruebas como la prueba de Falciformación, cuando existe una banda anormal a la altura de la Hb S en la corrida electroforética ó la cuantificación de Hb F por desnaturalización alcalina ó por Inmunodifusión radial (IDR) cuando los valores de Hb F determinados por desnaturalización son mayores al 20%. Además cuando, en la electroforesis alcalina, se sospecha de una banda que corre a la misma altura que otras, la electroforesis de Hb a ph ácido las puede diferenciar, como es el caso de las Hb C y S. Esto conllevaría a un mayor aporte, desde el laboratorio, para la ayuda diagnóstica a los pacientes y por consiguiente mejorar nuestros resultados. 3

5 METODOLOGÍA: Esta norma se elaboró teniendo en cuenta las recomendaciones de la guía realizada por el Comité Británico de Estandarización en Hematología, como también de las guías del algoritmo de trabajo que se lleva a cabo en el Laboratorio de Anemias del Hospital Garrahan, adaptado a las condiciones actuales del Servicio de Laboratorio del HPN. ALCANCE: PROPÓSITO Y OBJETIVO GENERAL DE LA GUÍA: Esta norma tiene como propósito sistematizar y unificar las pruebas de laboratorio de las muestras de sangre entera que ingresan al Sector de Proteínas, para realizar corrida electroforética de Hb a ph alcalino y pruebas complementarias que correspondan. El objetivo general es que a partir de la incorporación de nuevas técnicas de laboratorio, se pueda optimizar y dar la mejor ayuda diagnóstica a los pacientes provenientes del Servicio de Hematología, para evitar la derivación de muestras y/o pacientes a otros centros de mayor complejidad para llegar al diagnóstico. POBLACIÓN DIANA: La población diana esta constituida por todas las muestras de sangre entera recolectadas con el anticoagulante EDTA, para la realización de electroforesis de Hb a ph alcalino, que se reciben en el Sector de Proteínas del Servicio de laboratorio del HPN. POBLACIÓN DE USUARIOS: El cumplimiento de esta normativa esta dirigida a los profesionales bioquímicos y técnicos del Sector de Proteínas del Servicio de laboratorio del HPN. 4

6 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: Por qué normatizar el algoritmo diagnóstico de hemoglobinopatías? El algoritmo diagnóstico se construyó con el objeto de sistematizar el procedimiento a seguir a partir del pedido del médico hematólogo y de esta manera, primero realizar las pruebas de screening, electroforesis a ph alcalino de Hb y cuantificación, para luego derivar en pruebas que ayuden al diagnóstico, evitando realizar pruebas innecesarias. BENEFICIOS ESPERADOS: Esta normativa tiene el propósito de beneficiar tanto a los profesionales de laboratorio como al médico hematólogo y principalmente al paciente. La utilización de la misma da lugar a: mejorar la calidad de los resultados y lo más importante, brindar el mejor diagnóstico posible al alcance del laboratorio. 5

7 ALGORITMO DE HEMOGLOBINOPATÍAS: Solicitud de corrida electroforética a ph alcalino de Hb MHC<27 pg VCM<78 fl Frotis sanguíneo Corrida electroforética de Hb Inspección visual Densitometría A2 <3.5% F <0.5% A2>3.5% F: 0.1-7% A2 <3% F: 2-30% A2 >8% - variante de Hb A2<2,3% Fe N ó alta Ferritina N Sospecha clínica Fe Bajo Ferritina alta Anemia Ferropénica Anemia Sideroblástica Cromatografía por intercambio aniónico 1) Desnaturalización alcalina de la HbF: elevada 2) IDR/cuantificación de HbF HbS Prueba de Falciformación - + Sospecha de α Talasemia Rasgo β-talasémico Compatible con δβ-talasemia Electroforesis a ph ácido Cromatografía por intercambio Aniónico HbS Biología Molecular HbC, D, E y Lepore HbS El Sector de Proteínas no tiene incumbencia 6

8 AGRADECIMIENTOS: -Sector de Proteínas del Servicio de laboratorio: Bioquímica Laura Gonzalez REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA: 1-Talasemia y otras Hemoglobinopatía. Informe de la Secretaría.OMS mayo 2006 EB118/5 2-Bioqco Raquel Osatinsky, Claudio Valdata (Área Proteínas Hemoglobinas) MANLAB Diagnóstico Bioquímico (Dto. de Docencia e Investigación).Hemoglobinas por electroforesis capilar.mayo 2007-abril 2008.Revista Bioanálisis. año6. núm33.mayo-junio Servicio de laboratorio HPN y Hematología.Datos A Mosca, R Paleari, et al.the role of haemoglobin A2 testing in the diagnosis of thalassaemias and related haemoglobinopathies. JClin Pathol 2009;62: Kate Ryan, Barbara J. Bain,David Worthington.Significant haemoglobinopathies: guidelines for screening and diagnosis (2010).British Journal of Haematology, 149, Ronald JA Trent. Diagnosis of Haemoglobinopathies.Clin Biochem Rev Vol 27 February 2006/ J.M.Old. Screening and genetic diagnosis of haemoglobin disorders.blood Reviews(2003) 17, Comité Nacional de Hematología Pediátrica.Anemias en pediatrías (2005).Sociedad Argentina de Pediatría.FUNDASAP ediciones. 9- Hospital Garrahan.Servicio de Hematología-Oncología.Patología eritrocitaria.manual de Técnicas de laboratorio. 10-Sylvie Langlois, MD, et al.carrier Screening for Thalassemia and Hemoglobinopathies in Canada.Joint SOGC- CCMG Clinical Practice Guideline.No18, October Antonio Cao, MD, Renzo Galanello.Beta-thalasemia.Genetest Review.Genet Med 2010:12(2):

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