Sanidad animal NOSEMOSIS, NIVELES ESPORULARES EN APIARIOS DE PRODUCTORES DEL NORTE Y NOR-ESTE DE CÓRDOBA.

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1 NOSEMOSIS, NIVELES ESPORULARES EN APIARIOS DE PRODUCTORES DEL NORTE Y NOR-ESTE DE CÓRDOBA. Sosa¹, E. E.; Spadoni¹, J. A.; Osés¹ D. H.; Cavenio¹, M. R. y Cisternas¹ A. P. ¹ Facultad de Ciencias Agropecuarias SECyT Universidad Nacional de Córdoba. enrisosa@agro.unc.edu.ar RESUMEN Considerando la actual problemática del país en sanidad apícola, con la presencia de nuevas patologías, la exacerbación de las ya existentes y la severa incidencia del fenómeno de la agriculturización, se planteó el objetivo de estudiar el grado de infección por Nosema sp. en apiaros productivos de los departamentos Ischilín, San Justo y Tulumba - Córdoba, Argentina. Los apiarios mantuvieron un planteo fijista, respetando el manejo realizado por cada productor, quien aportó el material para analizar, conforme a las instrucciones y el protocolo de muestreo entregado. El número de esporas por abeja, se mostró superior en aquellos departamentos y regiones dentro de los mismos, donde la actividad del hombre es más intensa y la flora nativa se encuentra disminuida o desaparecida, lo cual a su vez llevaría a que las colmenas tendrían un estado nutricional deficiente. Los niveles esporulares de apiarios que disponen de variados y abundantes recursos florísticos, se mantuvieron por debajo de las esporas por abeja, valor considerado como umbral de daño. La aplicación de Fumagilina en colmenas no desabejadas y aún recuperables, realizada por productores en algunos apiarios en repuesta al elevado número de esporas detectado, logró disminuir los niveles esporulares y mantener las colmenas productivas. Palabras clave: Nosema, muestreo, flora, nutrición. SUMMARY Considering the current problems of the country in bee health, the presence of new diseases, exacerbation of the existing ones and severe incidence of the phenomenon of agriculturization, the objective was to study the degree of infection by Nosema sp. in productive apiaries of Ischilín San Justo and Tulumba departments (Cordoba, Argentina). Apiaries remained a fixist pose by respecting management performed by each producer, who provided the samples according to the instructions and given sampling protocol. The number of spores per bee was higher in those departments and regions within them, where human activity is more intense and the native flora are diminished or disappeared, circumstance that would lead to a poor nutritional status of the hives. Esporulares levels of apiaries that have varied and abundant flora, they remained below the 500,000 spores per bee, which is considered as a threshold for damage. The application of Fumagilina in hives desabejadas (wich still are able to be recovered) made by producers in response to the high number of spores detected in some apiaries, it made posible to decreased the esporular levels and to maintain productive the hives. Key words: Nosema, sampling, flora, nutrition INTRODUCCION Todo sistema productivo esta asentado en lo que son las pautas de gestión y manejo, y su incidencia sobre la nutrición, la genética y la sanidad. Estas interactúan entre sí en una relación dinámica y equilibrada para el desarrollo óptimo de la colmena. Cuando estas relaciones se ven afectadas por fallas en algunos de estos componentes, la colmena se manifiesta de forma inmediata y de las formas más diversas: caída de la producción, desabejado, migración, muerte. El grado de afección será de mayor o menor incidencia cuanto más sean los factores involucrados en desequilibrio (nutrición; nutrición + sanidad; nutrición + sanidad + genética). AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA

2 Analizando la complejidad de un sistema de equilibrio en la colmena y ante la actual problemática productiva (aumento de la mortandad invernal, incidencia de nuevas patologías, disminución de los rindes), se enfoca el objetivo del proyecto, al estudio de la presencia y grado de infección por Nosema sp., Este tipo de investigación nos permite generar información local en apiarios ubicados en los departamentos del norte y noreste de la provincia de Córdoba. La nosemosis es una enfermedad considerada de activa presencia en todos los países del mundo. Esto se debe a que la forma de resistencia esporulada del parásito le permite permanecer viable, durante numerosos años y en diferentes medios, lo que justifica aseverar que no existe lugar donde haya abejas que se encuentren libres del parásito. Se asume que todas las colmenas tienen presencia de Nosema sp, que puede o no estar en niveles infectivos, afectando en mayor o menor grado la colmena. Se reconoce como una enfermedad de distribución mundial pues su presencia ha sido reportada por numerosos investigadores de diferentes países, principalmente en aquellos en los cuales la Apicultura es de importancia económica y la presencia de la enfermedad ocasiona grandes pérdidas. Los niveles de infección de los apiarios varían durante el año, estimándose que tal variación se debe a los cambios climáticos estaciónales, por haberse observado picos poblacionales en otoño y primavera (Cornejo y Rossi, 1975), (García Girou, 2002). La multiplicación de Nosema sp. se produce en el interior del ventrículo o estómago de las abejas, específicamente en sus células epiteliales a las cuales destruye. Estas poseen principios que actúan en la digestión y absorción de las proteínas, de tal manera, que se puede entender la importancia de esta destrucción y porque, en las abejas enfermas con Nosemosis, se encuentran gran cantidad de polen sin digerir (Cornejo y Rossi, 1975). La forma de resistencia y transmisión de la Nosemosis es a través de sus esporas maduras, cuya viabilidad en el medio externo de la abeja se aproxima a los 2 años. Estas esporas se eliminan con las deyecciones y contaminan no solo a las colmenas, material de trabajo e insumos, sino también todo el medio externo circundante, debido al hábito de limpieza de la abeja. Específicamente el presente proyecto se planteo conocer cómo varia la carga de esporos en el tracto intestinal de las abejas a lo largo del tiempo y la dinámica poblacional de Nosema sp. a la par de trabajar en forma integrada con productores de la COAPIS (Coop. Apícola Ischilín), el grupo Cambio Rural Las Criollitas (Dpto. San Justo), y productores independientes (Dpto. Tulumba), como una metodología para buscar respuestas y elaborar estrategias para este problema sanitario. MATERIAL Y METODO Se realizó un muestreo representativo de cada uno de los apiarios, el que consistió en la toma de muestras del 10 % de las colmenas del apiario determinadas al azar, evitando las colmenas de los extremos. Los apiarios son fijos (no están en un planteo de trashumancia), y mantienen las practicas productivas que planifica e implementa el productor. Con las muestras obtenidas se procedió al análisis microscópico del aparato digestivo (ventrículo o mesenterón) de las abejas para determinar el contenido de esporas con la técnica del hemocitómetro, método reconocido para determinar el grado de infección de la colmena y su comportamiento evolutivo en el tiempo. En el proyecto se contemplan tareas de: campo, laboratorio y gabinete. Trabajo de campo: Las tareas se realizaron en forma combinada con productores cuyos apiarios se encuentran ubicados en los Departamentos involucrados en el proyecto: COOAPIS en Ischilín y Las Criollitas en San Justo. Previo a su inicio se realizaron reuniones informativas, instructivas y de capacitación respecto a los objetivos planteados y al protocolo de trabajo que involucra la toma de muestras, su conservación y el relevamiento de información en planillas diseñadas para dicho fin a efectos de estandarizar las tareas. Las muestras recolectadas y acondicionadas se recogieron periódicamente, tomándose nota de los problemas e inconvenientes que a medida del transcurso del tiempo se presentaron para su ejecución. AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA

3 Se proveyó a los apicultores participantes además de los instructivos, los frascos, el formol al 4% como conservante, rótulos y planillas. Trabajo de laboratorio: A medida que las muestras ingresaban al laboratorio de la FCA, se procesaban a fin de realizar los recuentos esporulares. Se utilizó para ello el método de Cantwell modificado, que en forma sintética consiste en la maceración de 60 abdómenes de abejas, su dilución y recuento esporular en un hemocitómetro o cámara de Newbauer, mediante el cual se determinó la cantidad de esporos por abeja, que se obtienen de una muestra estadísticamente representativa de cada colmena. Trabajo de gabinete: Se ordenó y sistematizó la información de campo detallada en las planillas adjuntas a las muestras, para correlacionarlos con los resultados obtenidos en el laboratorio. Luego se compararon con las observaciones realizadas en otros trabajos publicados y relacionados con esta enfermedad. RESULTADOS Y DISCUSIÓN: La elección de los departamentos Ischilín, San Justo y Tulumba, para realizar los ensayos fue premeditada por tratarse de áreas con notables diferencias, tanto orográficas, como climáticas, y con actividades antrópicas de notable influencia en los procesos de desarrollo vegetativo y pecuario. Con esto se intentó observar si las variables citadas se manifestaban a nivel colmena en el desarrollo de la enfermedad. Con los datos preliminares obtenidos se puede inferir que existen elementos que darían una tendencia hacia la hipótesis propuesta, como por ejemplo: Se determinó que prácticamente el 100% de las colmenas analizadas, en mayor o menor cantidad, tenia presencia de esporas de Nosema sp., concordando con lo que autores con distintos trabajos publicados y que se toma en general como norma de que en todas las colmenas hay presencia de esporos de Nosema sp. Los niveles de esporas por abeja son marcadamente superiores en el departamento San justo respecto al departamento Ischilín. Esto es atribuible en principio a la mayor disponibilidad natural de alimento y por consiguiente una dieta más equilibrada de la colmena en este último sitio (área de monte); de todas maneras el dato no es definitivo dado que en el año relevado el periodo de lluvia se presentó con bajas precipitaciones y con invierno extremadamente seco. Se notó que mientras en el Dpto. Ischilín disponían de flora natural variada que brinda calidad y cantidad de alimento, en San Justo, se pudo observar obreras pecoreando silos abiertos de granos de sorgo partido húmedo, a lo que consideramos como un síntoma de carencia nutricional. El segundo año de ensayos (2009) se presentó con características climáticas más severas al ya relevado, un invierno muy seco, con baja humedad relativa y con una perspectiva de lluvias tardías. En el Dpto. Tulumba, donde se relevaron apiarios de productores independientes, las curvas poblacionales se comportaron de forma similar a las registradas en los Dptos. previamente citados, en lo que concierne a la relación zona de monte natural versus zona con mayor actividad agrícola y desmontada. En las zonas donde los apiarios disponen de un monte natural poco degradado y con un aporte regular de polen y néctar, los niveles esporulares son bajos y por el contrario en donde los aportes son limitados e irregulares, el recuento se manifestó con mayores niveles de esporas. Si se considera como el nivel de daño económico las lecturas superiores a esporas por abeja, medida de referencia para recomendar tratamiento, se podría inferir que las colmenas analizadas en el Dpto. San Justo se encuentran más expuestas que las del Dpto. Ischilín. Esta inferencia se hace conforme a los resultados obtenidos en apiarios de dicha zona en los cuales los valores observados presentan una dispersión próxima o superior al nivel mencionado. Como se observa en el grafico N 1 de un apiario próximo a la localidad Balnearia. AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA

4 Gráfico Nº 1. Muestreo en un apiario del departamento San Justo En el seguimiento de este apiario, el gráfico Nº 1 muestra que durante 11 meses de muestreo los niveles esporulares estuvieron por encima de , llegando en junio del 2008 a los , momento a partir del cual los niveles disminuyen. Interpretando esta información se infiere que los próximos picos serian superiores y dañinos o letales para las colmenas. En Agosto el estado poblacional de las colmenas, era adecuado, presentando en promedio 7 marcos de cría, todos cubiertos con abejas, bajo un plan nutricional en donde no faltó alimento energético acumulado en el panal como así tampoco el aporte de tortas como complemento de polen. Ante tal situación se concluye que aun no se había producido desabejado y seria muy criterioso proceder a un tratamiento para bajar el nivel esporular. Esta medida se ve reflejada en la gráfica con la disminución de esporas luego del tratamiento, obteniendo en noviembre un valor de compatible con lo productivo y mostrando lo acertado de esta práctica y la eficiencia del principio activo. Se utilizó un producto comercial a base de Fumagilina siguiendo las instrucciones del marbete para su aplicación. En el gráfico Nº 2, representativo del Departamento Ischilín, muestra niveles esporulares inferiores al nivel que consideramos como de daño económico con un comportamiento infectivo diferente al de San Justo. Como se aprecia en el gráfico de barras, no obstante la falta de toma de muestras durante abril y mayo, se observa un pico sobre el final del verano, esporas por abeja, con tendencia a disminuir y a mantenerse en valores bajos durante el invierno (media de para junio, julio y agosto). Comportamiento similar se observó en otros apiarios relevados. AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA

5 Muestreos del Apiario A. Departamento Ischilín feb-08 mar-08 abr-08 Promedio de esporas / abeja may-08 jun-08 jul-08 ago-08 Meses Gráfico Nº 2: Muestreo en un apiario del departamento Ischilín Se debe rescatar de los informes suministrados por los productores involucrados, que durante los meses de febrero, marzo y abril hay un aporte natural de polen, ingreso proveniente de especies como: Chilca, Malva, Suico, Palo Amarillo, Jarilla. A la salida del invierno, ya en Agosto, acusan la floración de las siguientes especies, garabato, espinillo y chañar como principales. Esto lleva a un análisis diferencial para cada apiario respecto a los niveles esporulares y considerar a los apiarios de Ischilín, cuyas posibilidades nutricionales se muestran suficientes para la invernada y la salida del invierno, como mejor dotados para afrontar las crisis y mantener, aun en los meses que se manifiestan los picos, un número de esporas por debajo de lo considerado como nivel infectivo. En los apiarios del Departamento Tulumba los de la zona este del mismo próximos a la mar de Ansenuza se muestran como mejor nutridos, de acuerdo a los registros de campo, hay mayor diversidad floral, que se manifiesta a lo largo del año con mayor continuidad y oportunidad en la oferta de alimentos para la colmena y con menores niveles esporulares, no superando en ningún mes valores superiores a los esporas promedio por abeja. (Gráfico N 3 ). AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA

6 Dpto. Tulumba. Niveles esporulares de Nosema sp. Apiario A. 2010/ jul-10 ago-10 sep-10 oct-10 Numero de esporas promedio / abeja nov-10 dic-10 ene-11 Fechas de muestreo Gráfico Nº 3: Muestreo en un apiario del departamento Tulumba (Apiario A) En la zona Oeste del departamento el comportamiento es distinto, observando mayor actividad agrícola y pequeñas isletas de vegetación autóctona, lo que indudablemente repercutiría desfavorablemente en el nivel nutricional de las abejas y consecuentemente es de esperar que en algún momento se incremente los valores esporulares como lo muestra el gráfico N 4, observando a la salida del invierno valores superiores a los esporas promedio por abeja, cifra considerada como de daño económico. Dpto. Tulumba. Niveles esporulares de Nosema sp. Apiario B / 2011 N de esporas promedio / abeja jun-10 jul-10 ago-10 sep-10 oct-10 AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA nov-10 dic-10 Fechas de muestreo Gráfico Nº 4: Muestreo en un apiario del departamento Tulumba (Apiario B) Investigadores uruguayos (Santos et al, 2005) concluyeron, que colonias que entraron a la invernada, luego de estar en floraciones de eucalipto, veían disminuidas la proteína corporal, aumentando la incidencia de Nosema y consecuentemente incrementando la mortandad invernal. CONCLUSIONES Sin lugar a dudas, la toma de muestras, el recuento esporular, el registro del estado poblacional de las colmenas y la observación de los estados fenológicos de las especies vegetales de interés apícola, ene-11 feb-11 mar-11 abr-11

7 constituyen herramientas útiles y necesarias para la toma de decisiones respecto a la estrategia futura de producción. La nosemosis, como ya fuese citado por otros autores, tiene la particularidad de manifestarse en algunos casos con características de picos de abundancia de esporas ocasionales, cuyas causas responden según las interpretaciones científicas, a factores muy diversos. Entre estos se citan: los climáticos, el manejo, sanitarios concomitantes y nutricionales; siendo este último el considerado en este estudio como el de primordial incidencia para la región estudiada. Si bien estos son datos de dos años sucesivos de ensayo en cada departamento, donde las observaciones realizadas no se pueden tomar como absolutas, se considera de significativa importancia los resultados obtenidos, ya que esto permite comprender y conocer la dinámica del parásito en estas regiones y en las condiciones descriptas. Se considera que el continuar con muestreos programados, llevará a generar información regional de vital importancia para el control de la enfermedad y obtener conclusiones que ayuden a comprender y conocer más sobre este problema sanitario. BIBLIOGRAFIA Bacci, M Estandarización de técnicas diagnósticas para las diferentes enfermedades de las abejas. Programa Nacional de enfermedades apícolas. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria. Argentina. Bruno, S. B Enfermedades de las abejas. Nociones prácticas. Ed. Ciencias y Abejas. Cap. IV, pag Argentina. Cornejo, L. G.; C. Rossi Enfermedades de las abejas su profilaxis y prevención. Editorial Hemisferio Sur. Argentina; p: Dadant, Ch La colmena y la abeja melífera. Ed. Hemisferio Sur. Argentina Del Hoyo, M. y G. Rodríguez Protocolos de Laboratorio de Sanidad Apícola. Boletín PROAPI. p Farrar, C. L Nosema disease contributes to winter losses and queen supersedure. Gleanings in bee culture. v. 70 p , 701. Fries, I and G. Ekborn Nosema apis, sampling techniques and honey yields. Journal of Apicultural Research. v. 23 p Fries, I. 1988a. Contribution to the study of Nosema disease (Nosema apis Z.) in honey bee (Apis mellífera L.) Swedish University of Agricultural Sciences, Uppsala, Fries, I. 1988b. Infectivity and multiplication of Nosema apis Z. in the ventriculus of the honey bee (Apis mellífera L.). Apidologie, 19: Garcia Girou, N Fundamentos de la producción apícola moderna. Ed. Encestando SRL. Bahía Blanca. Argentina. Lechman, L Herramientas de trabajo para la apicultura moderna. Ed. Cálamo SRL. Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Argentina. Malone, L.A.; C. A. McIvor and H.A. Giacon A visual test for Nosema apis infections in honey bees. Journal of Apicultural Research. v. 32(3/4) p Pensel, N.; C. Marconi y E. Bedascarrasbure Certificación de miel según protocolo INTA. Resumen pliego de condiciones INTA Nº 11 Santos, E; E. Garcia; R Diu Landro; G. Daners; A. Saadoun; C. Cabrera; C. Invernizzi Variación de la proteína corporal y presencia del protozoario Nosema apis en abejas melíferas de colonias emplazadas en forestaciones de Eucalyptus grandis. Facultad de Ciencias. Montevideo Uruguay. Sarlo, E.; S. Medici; D. Porrini y M. Eguaras. Variaciones en la toma de muestra destinada a la evaluación del grado de infección por Nosema apis z. en colonias de apis Mellífera l., del sudeste de la provincia de buenos aires. Fac. Cs. Ex. y Nat. Univ. Nac. Mar del Plata. Sarlo, E.. Nosemosis: Causas, diagnóstico y tratamiento. Revista Espacio Apícola. Año 2006 nº 73 p Sosa, E.; J. Spadoni; D. Osés; P. Cisternas. Nosemosis: Niveles esporulares en apiarios de productores de los departamentos Ischilín y san Justo. Revista Espacio Apícola. Año 2009 nº 89 p ISSN: AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA