PLIEGO DE PRESCRIPCIONES TÉCNICAS PARA LA ASISTENCIA TÉCNICA PARA EL PROCESO DE PRODUCCION MASIVA DE CÉLULAS
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- Ana María María Rosa Alcaraz Naranjo
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1 PLIEGO DE PRESCRIPCIONES TÉCNICAS PARA LA ASISTENCIA TÉCNICA PARA EL PROCESO DE PRODUCCION MASIVA DE CÉLULAS MADRE ADULTAS CARDIACAS, (Nº EXP. 2012/ES/12) 1
2 1. OBJETO DEL CONTRATO El objeto de este Pliego responde a la necesidad de contratar un proceso de producción masiva de células madre cardiacas humanas (hcmcs) para su uso en estudios pre-clínicos y como producto terapéutico alogénico en ensayos clínicos, partiendo de un proceso previamente establecido y definido dentro del proyecto Europeo CARE-MI del cual el CNIC es coordinador. El adjudicatario deberá adaptar, desarrollar y documentar el proceso de expansión celular definido por los socios del consorcio que participan en el paquete de trabajo relevante de CARE-MI, según las condiciones de fabricación requeridas por las autoridades regulatorias Europeas (en particular la Agencia Española del Medicamento y Productos Sanitarios - AEMPS) con el objetivo de obtener la acreditación GMP (Good Manufacturing Practice) y proceder a la fabricación del material celular bajo estas condiciones GMP para su uso como medicamento en fase de investigación. Adicionalmente, el adjudicatario será el encargado de producir células suficientes mediante este proceso para poder desarrollar los estudios preclínicos contemplados en el proyecto CARE-MI. El objeto final del contrato es por lo tanto: Producir de manera estable y controlada el material necesario para establecer 3 bancos de trabajo de hcmcs y 3 lotes de producto final con tamaño suficiente para confirmar que el proceso puede escalarse a las necesidades del ensayo clínico posterior Asegurar que este proceso está debidamente documentado según las normas GMP. que el proceso es susceptible de obtener la acreditación regulatoria en base a la documentación generada según las normas de calidad GMPs y la generación de los lotes necesarios de validación 2
3 que de ser necesario, el proceso demostrado es susceptible de transferencia a cualquier instalación con las capacidades necesarias para la fabricación de productos celulares en base a la documentación generada. A. Alcance de los trabajos solicitados El alcance del proyecto descrito en este pliego se ciñe a las siguientes actividades: A. Producción industrial en las instalaciones del adjudicatario de tres bancos celulares de trabajo y tres lotes de producto final en condiciones cuasi-gmp de células madre cardiacas para su uso en los estudios preclínicos que se llevarán a cabo dentro del proyecto CARE-MI. B. Implementación de un proceso de congelación controlado para la criopreservación de hcmcs, según las indicaciones de los socios de CAREMI implicados. C. Análisis de la estabilidad de los bancos celulares y de los lotes de producto final tras la congelación y su almacenamiento en las condiciones fijadas por los socios del CARE-MI implicados. D. Generación de la documentación del proceso según las normas GMP para su implementación final, validación, acreditación y producción del medicamento celular en investigación para su uso en ensayos clínicos. Por cuasi-gmp se entiende que el proceso estará debidamente documentado utilizando materiales y métodos aprobados en la normativa GMP con la intención de generar los lotes de validación y procesos que permitan la acreditación del proceso. 2. LUGAR DE EJECUCIÓN El lugar de ejecución de estos trabajos serán las instalaciones del adjudicatario. Estas deberán estar acreditadas para la producción de medicamentos biológicos y disponer de la acreditación necesaria para la fabricación de productos de terapia avanzada en 3
4 condiciones GMP. Deberán disponer de zonas habilitadas y los equipos imprescindibles para la puesta a punto de un proceso de desarrollo de terapia celular. Para permitir la implementación del proceso será necesario que la CMO gestione la obtención de biopsias cardiacas humanas que le permita aislar y producir las CMC. 3. METODOLOGÍA EN LA ELABORACIÓN DE LOS TRABAJOS La empresa deberá presentar una metodología para la ejecución de los trabajos, al mayor detalle posible, siguiendo las siguientes fases: 1. Producción de los bancos celulares de trabajo El CNIC y el socio de CARE-MI responsable de la definición del proceso de producción, facilitará los protocolos y la metodología utilizada para la producción celular. Durante esta etapa la empresa acometerá las siguientes actividades: a. Se pondrán a punto los protocolos de solicitud, transporte y recepción de las biopsias cardiacas con los hospitales seleccionados, asegurándose la idoneidad de las muestras mediante pruebas serológicas, ADN fingerprint, control de la temperatura del transporte, tamaño y apariencia de la biopsia, etc. b. A partir de las muestras recibidas se aislarán las células madre cardiacas (hcmc) y se expandirán hasta generar 3 bancos celulares de trabajo (BCT) con calidad cuasi-gmp que se almacenarán congelados. El tamaño mínimo de estos bancos será de 750 millones de células (50 viales con 15 millones de células por vial). Estos bancos celulares deberán tener las características fenotípicas y funcionales previamente establecidas por el CNIC y el socio del CARE-MI responsable de la producción. 4
5 La biopsia de partida se procesará mediante digestión enzimática con colagenasa. De la suspensión celular resultante se seleccionará la población celular de CMCs mediante inmunoselección magnética según protocolos validados por los miembros del consorcio responsables de este trabajo. El producto de este paso se sembrará en un medio específico para la expansión in vitro de las células hcmcs. Tras un período de 14 días aproximadamente se obtendrá una población de hcmcs que se subcultivarán en factorías celulares, de aproximadamente 3000cm 2, y a una concentración de oxígeno atmosférico del 3%. La proliferación celular se monitorizará mediante análisis de los niveles de glucosa y lactato en el medio de cultivo. Una vez alcanzado el número de divisiones establecidas se levantarán las células y se congelarán en viales para formar el BCT según protocolos previamente establecidos dentro del CARE-MI. c. La empresa llevará a cabo los estudios de estabilidad de los bancos celulares tras la congelación celular, mediante técnicas establecidas por el CNIC y el socio del CARE-MI responsable de la producción celular. Para los estudios de estabilidad de los bancos celulares se analizará tanto la viabilidad celular tras la descongelación, que deberá ser superior al 75%, como el fenotipo celular. La empresa adquirirá los equipos y materiales específicos que se precisen con el objeto de lograr las especificaciones del producto que se definan. 2. Protocolos de congelación del producto final En estrecha colaboración con CNIC y el miembro del consorcio responsable del proceso de producción, la adjudicataria pondrá a punto en sus instalaciones las técnicas de congelación de las CMC en producto final. Se validarán en las instalaciones de la empresa los protocolos de congelación basados en el establecimiento de rampas de congelación controladas. Estos protocolos deberán contar con los registros de temperatura correspondientes que permitan verificar el proceso de congelación. Esta puesta a punto incluirá la validación de la solución de congelación, el recipiente de congelación, y el protocolo de congelación. 5
6 Las células se congelaran en una solución que no contenga suero humano o animal a una concentración celular superior a 30x10 6 células/ml y en presencia de una concentración de DMSO no superior al 5%. Tanto la solución de congelación como el recipiente de congelación tendrán que tener calidad GMP. Una vez congeladas, las células serán almacenadas en tanques criogénicos, en nitrógeno gaseoso a -170ºC. 3. Producción cuasi-gmp de lotes de hcmc (producto final) para uso en ensayos preclínicos. Generación de la documentación del proceso de producción. En esta etapa, la empresa adjudicataria deberá generar un banco de hcmc que permita realizar los experimentos pre-clínicos establecidos en CARE-MI, con la calidad y documentación necesaria de modo que sea posible reproducir el proceso en condiciones adecuadas para poder solicitar la acreditación GMP del proceso y del producto generado. Durante esta etapa la empresa acometerá las siguientes actividades a. Generación del producto final Se descongelarán CMCs del BCT para la expansión in vitro del suficiente número celular, mediante un proceso que incluya 2 pases adicionales, para la elaboración del producto en su formato final. Durante este proceso se emplearán factorías celulares de aproximadamente 3000 cm 2 cada una. Uno de los puntos críticos que supone trabajar con un número elevado de factorías es la concentración de las células después de su recogida mediante tripsinización. La empresa licitante deberá presentar un plan de producción que permita el manejo de un número elevado de factorías de manera simultánea en un corto espacio de tiempo. Las células recogidas se dispensarán en viales con el medio indicado para su congelación mediante el protocolo de congelación previamente establecido (ver 2a). b. Análisis fenotípico de las células producidas 6
7 Será responsabilidad de la empresa licitada realizar los análisis establecidos por el CNIC y el miembro del consorcio responsable de la producción celular, que garanticen la identidad, pureza y potencia de los bancos producidos. Estos análisis incluirán estudios mediante técnicas de citometría de flujo, PCR cuantitativa y ELISA. Se realizarán también estudios con el fin de confirmar la estabilidad genética de las células producidas y la esterilidad del producto celular. c. Estudio de estabilidad La empresa adjudicataria llevará a cabo estudios de recuperabilidad y viabilidad sobre viales de células congelados. La viabilidad celular tras descongelación deberá ser superior al 75% en viales almacenados no más de siete días. El adjudicatario estará obligado además a evaluar además la viabilidad celular del producto criopreservado tras 3, 6, 12 y 24 meses de congelación. Esta frecuencia se ha adoptado de acuerdo a las indicaciones que se recogen en la Guía ICH Q5C Quality of Biotechnological Products: Stability Testing of Biotechnological/Biological Products. d. Validación del método de transporte La empresa adjudicataria deberá estudiar el acondicionamiento final más adecuado para poder transportar el producto final terminado a cualquier centro receptor con las máximas garantías. En esta etapa, el adjudicatario, CNIC y los socios responsables de la producción celular definirán de forma conjunta condiciones óptimas de transporte mediante un kit que permita preservar las condiciones de temperatura. Adicionalmente, se realizará una simulación de transporte para comprobar si el producto cumple con las especificaciones técnicas requeridas tras la simulación. Todos estos aspectos serán evaluados y precisados en las reuniones de seguimiento con los miembros del consorcio encargados de diseñar el proceso de producción, y acordados antes de seguir con fases posteriores. En base a los resultados obtenidos de estas actividades, se acordará el proceso final de producción, aplicando criterios de máxima calidad en las sucesivas fases del 7
8 proyecto de acuerdo siempre con la normativa GMP. Para implementar con garantías el proceso de producción, será necesario realizar 3 procesos de producción en esta fase, es decir 3 BCTs y sus correspondientes lotes de producto final. Al final de esta fase se presentará un informe detallando el cumplimiento de las tareas anteriormente descritas y se facilitarán muestras de producto celular a nivel de banco celular de trabajo y de producto final para su comprobación por los socios relevantes del consorcio además de retener las muestras necesarias para los ensayos de estabilidad. 3. ENTREGABLES FINALES Al final del proyecto, la empresa se compromete a la entrega de los siguientes materiales y documentación a CNIC y a los miembros del consorcio involucrados en el proyecto de producción: - Toda la cantidad de células CMCs de los bancos celulares generados durante el proyecto. - Aquellos productos no GMP que no se hayan empleado en el transcurso del proyecto. - Descripción detallada del método de fabricación y relación de los proveedores de los materiales, equipos y controles de calidad externos. - Documentación de las actividades realizadas, con los resultados obtenidos - Procedimientos Normalizados de Trabajo (PNTs) del proceso incluidos los de Producción y Control de Calidad. - Informes de hitos cumplidos e Informe final 4. PLANIFICACION DE LA PUESTA EN MARCHA Los licitadores deberán presentar una propuesta de cronograma de trabajo y de planificación inicial para la puesta en marcha de los trabajos. Esa planificación hará mención específica a las áreas de trabajo que se requieren. 8
9 El CNIC y el miembro relevantes del consorcio CARE-MI que tiene responsabilidad sobre el proceso de fabricación realizarán las correcciones y ajustes que se estime conveniente en esa planificación. Debe quedar claro que la planificación de las distintas fases de los trabajos y su cronograma deberán estar adaptados e integrados a un contexto de coordinación integral entre el CNIC, el adjudicatario de estos trabajos y el miembro relevante del consorcio CARE-MI. 5. PROTECIÓN DE DATOS Y CONFIDENCIALIDAD La empresa adjudicataria estará obligada a cumplir con las disposiciones normativas vigentes en cada momento en materia de protección de datos personales (Real Decreto 994/1999, de 11 de Junio y Ley Orgánica 15/1999, de 13 de Diciembre) Además, la empresa adjudicataria se comprometerá a guardar el secreto más absoluto sobre las informaciones y documentos del CNIC y el socio relevantes del consorcio CARE-MI, a los que haya tenido acceso con ocasión de la ejecución del presente contrato. Asimismo, el adjudicatario mantendrá la más absoluta confidencialidad de los trabajos e informes que se realicen en ejecución de este contrato, así como una vez finalizado el mismo, pasando éstos a propiedad exclusiva del CNIC. 6. CONTROL DE CALIDAD La empresa adjudicataria deberá garantizar la calidad de los trabajos contratados conforme a este Pliego, obligándose a realizar durante la vigencia del mismo cualquier cambio necesario para solventar las deficiencias detectadas imputables al 9
10 adjudicatario si así lo solicitara el CNIC y el miembro responsable de este trabajo dentro de CARE-MI. La documentación generada durante la ejecución del contrato será propiedad exclusiva de los socios de CARE-MI responsables de la definición del proceso sin que la empresa adjudicataria pueda conservarla, ni obtener copia de la misma o facilitarla a terceros sin expresa autorización del CNIC y los socios relevantes de CARE-MI. A la finalización de los trabajos, el adjudicatario deberá entregar toda la documentación, tanto en soporte informático como en papel, que posea en virtud de la relación contractual con el CNIC. POR EL CNIC, Madrid a 13 de Marzo de 2012 El Jefe del Departamento de Investigación Traslacional El Director-Gerente Dr. Antonio Bernad Miana Alberto Sanz Belmar 10
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