NUEVOS METODOS PARA LA DETECCION DE BACTEREMIAS. Dra. Briceida López Martínez

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Elisa Gutiérrez Fernández
hace 6 años
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1 NUEVOS METODOS PARA LA DETECCION DE BACTEREMIAS Dra. Briceida López Martínez

3 1. Bacteriemia Se define como la presencia de bacterias en la sangre se pone de manifiesto por el aislamiento de éstas en los hemocultivos. Tiene importancia diagnóstica y pronóstica, ya que se asocia con una elevada mortalidad, que oscila entre el 20 y el 50%.

4 1. Bacteriemia El diagnóstico definitivo de la bacteriemia se establece al aislar el microorganismo causal en la sangre. Nos va a permitir: Conocer su sensibilidad a los antimicrobianos. Instaurar el tratamiento Realizar las modificaciones necesarias a la terapia empírica ya establecida.

5 SEPTIFAST

6 SEPTI- FAST Los objetivos Identificación Rápida de infecciones por PCR Resultado Rápido Proveer de un resultado que permita la toma de decisiones terapeuticas en horas Resultado Manejable Permite establecer una terapia inicial hasta que la identificación de especies concluya Sensibilidad Incremeta los resultados positivos aún bajo terapia antimicrobiana

SEPTI- FAST SeptiFast El impacto de Resultados Rápidos Detección e identificación a partir de sangre completa La detección e identificación se basa en Real-Time PCR Se

7 SEPTI- FAST SeptiFast El impacto de Resultados Rápidos Detección e identificación a partir de sangre completa La detección e identificación se basa en Real-Time PCR Se realiza directamente de sangre completa Resultados en 6 horas Los más importantes agentes microbianos son identificados Prueba validada empleando el equipo LightCycler 2.0

8 SEPTI- FAST Detección e identificación de microorganismos Los principales 25 microorganismos causantes de Bacteremias pueden ser detectados La identificación de 20 grupos relevantes para toma de decisiones Cubre aprox. 90 % las bacterias nosocomiales Harbarth S, et al., Am J Med. 2003, 115: Kollef M, et al., Chest 1999, 115:

9 Los principales 25 microorganismos causantes Gram ( - ) Gram ( + ) Fungi Escherichia coli Klebsiella (pneumoniae / oxytoca Serratia marcescens Enterobacter (cloacae / aerogenes) Proteus aeruginosa Acinetobacter baumanii Stenotrophomonas maltophilia Staphylococcus aureus CoNS ( Coagulase Negative Staphylococci) Streptococcus pneumoniae Streptococcus spp. Enterococcus faecium Enterococcus faecalis Candida albicans Candida tropicales Candida parapsilosis Candida krusei Candida glabrata Aspergilus fumigatus

10 NO INTERFERENCIAS DE SEPTIFAST ANTIBIOTICOS Piperacillin Ceftazidim GlaxoSmithKline mg/ml No Zienam Imipenem/Cilastatin MSD 0.27* 0.8* mg/ml Tazobac Piperacillin/ Tazobactam Wyeth Pharma mg/ml Ciprobay Ciprofloxacin Bayer μg/ml Vancomycin Vancomycin Lilly μg/ml Refobacin Gentamicin Merck μg/ml No Zyvoxid Linezolid Pharmacia mg/ml Sobelin Clindamycin Pharmacia mg/l InfectoClont Metronidazol Infectopharm g/ml Diflucan Fluconazol Pfizer mg/ml Antimicóticos Cancidas Caspofugin MSD μg/ml No Amphothericin B Amphothericin B Bristol-Myers Squibb μg/ml Analgésicos Novalgin Metamizol Aventis Pharma mg/ml Anti-Inflamatorios Dexahexal Dexamethason Hexal μg/ml Citostáticos ARA-cell Cytarabin cell pharm μg/ml Anti-Hipotónicos Arterenol Norepinephrin(Noradrenalin ) Aventis Pharma μg/ml Anti-Hipertónicos Aquo-Trinitrosan Glycerolnitrat Merck μg/ml 10 Anti-Coagulantes Heparin Heparin ratiopharm I.U./mL

11 Más resultados positivos en menor TIEMPO 468 muestras de 355 pacientes, 5 sitios de investigación 69 patógenos identificados por cultivo, 174 identificados por PCR Índice de positivos: Cultivo de Sangre 18.2 % SeptiFast 29.5 % Tiempo para un positivo por cultivo en promedio 2.8 días Tiempo de ensayo con SeptiFast 6 horas Rapid D Ultrasensitive Multiplex PCR for Same Day Identification of Blood Stream Pathogens in Suspected Sepsis - Westh et al.

12 Espectrometría de masas (MALDI-TOF).

13 La espectrometría de masas Es un método que permite la identificación de una molécula mediante la medición de su masa en relación a su carga (relación masa/carga), así como la de los fragmentos generados a partir de ella.

14 La espectrometría de masas El primer espectrómetro de masas fue desarrollado en 1912 por J. J. Thomson para el análisis de espectros de elementos como O 2, N 2 y CO.

15 La espectrometría de masas BACTERIOLOGIA La identificación microbiana por MALDI-TOF MS La identificación se realiza a partir de una colonia aislada del microorganismo en estudio, la que es aplicada sobre una placa de metal pulido re-utilizable. Seng P, Drancourt M, Gouriet F, La Scola B, Fournier PE, Rolain J M, et al. Ongoing revolution in bacteriology: Routine identification of bacteria by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry. Clin Infect Dis 2009; 49:

16 EQUIPOS CON ESPECTROMETRIA DE MASAS

17 METODOLOGÍA La espectrometría de masas La identificación microbiana por MALDI-TOF MS La identificación se realiza a partir de una colonia aislada del microorganismo en estudio, la que es aplicada sobre una placa de metal pulido re-utilizable.

18 METODOLOGÍA La espectrometría de masas La realización de un espectro de masas, La comparación con la base de datos La entrega de resultados.

19 METODOLOGÍA La espectrometría de masas

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