José Fernando Tang Ploog, Annelisse Rodríguez Romero *** Resumen

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1 Evaluación de Eficacia de una Suspensión Intramamaria sobre la base de Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Cefa-Sec ) * en el Control de Infecciones Intramamarias en el Período de Secado de Vacas Lecheras ** José Fernando Tang Ploog, Annelisse Rodríguez Romero *** Resumen Seis (06) vacas lecheras de alta producción, raza Holstein, las cuales entraban en período de seca, fueron tratadas con una suspensión antibiótica intramamaria sobre la base de Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Cefa-Sec ) para evaluar la eficacia del producto en el control de infecciones intramamarias durante el periodo de secado. Previo al secado se obtuvieron muestras de leche de cada cuarto mamario, a las cuales se les realizó un cultivo bacteriológico para determinar la carga bacteriana así como su respectivo antibiograma. Sesenta (60) días post tratamiento, no se logró aislar ningún germen bacteriano de 10 de los 12 cuartos tratados, representando un 83.33% de eficacia de Cefa-Sec en el control de infecciones intramamarias en el periodo de secado de vacas lecheras. Abstract Six (06) Holstein high production dairy cows entering the dry period, were treated with an intramammary antibiotic suspension based on cefalexine, neomycin, cloxacillin and vitamin A (Cefa-Sec ), in order to evaluate the efficacy of the product in the control of intramammary infections during the dry period. Milk samples of every quarter were taken before the dry period, and determination of the bacterial load on each of them was made by bacteriological culture, as well as the corresponding antibiogram. Sixty (60) days after the treatment, no bacterial germ could be isolated from 10 of the 12 quarters treated, which represents 83.33% efficacy of Cefa-Sec in the control of intramammary infections in the dry period of dairy cows. 1. INTRODUCCION La mastitis es una inflamación o irritación de la glándula mamaria producida por diversos agentes, principalmente de tipo infeccioso, caracterizándose por cambios físicos y químicos en la composición de la leche y ocasionando alteraciones patológicas localizadas en la mama. La enfermedad puede desarrollarse en diferentes formas: aguda, sub-aguda o crónica. En el desarrollo de la mastitis pueden intervenir numerosos microorganismos como bacterias, levaduras, mohos, virus y otros agentes. Resultaría muy extenso mencionar todos los gérmenes que pueden intervenir en la infección, por lo que sólo se citarán aquellos que participan con mayor frecuencia y que son los siguientes: Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae y Streptococcus uberis; Corynebacterium pyogenes y Pseudomona aeruginosa. Los diferentes microorganismos pueden invadir el tejido de la glándula mamaria por diferentes vías: la piel, la linfa y la sangre, pero normalmente la vía más común es externa, penetrando por el canal del pezón.

2 La información estadística de varios países señala que la mastitis no ha disminuido en los últimos 30 años y que el 50% del ganado lechero se encuentra afectado por esta enfermedad, como promedio, en dos de sus cuartos. De acuerdo a la definición de mastitis clínica, sabemos que ésta puede ser detectada fácilmente por sus manifestaciones aparentes y cualquier ordeñador con algo de experiencia puede reconocerla. No sucede lo mismo con la mastitis de carácter subclínico y es por esto que la gravedad del problema es mayor; en primer lugar, porque son pocos los que conocen, en su real magnitud, la gran difusión de este tipo de mastitis y su incidencia en la salud y la economía. Debido a esto, se hace necesario insistir sobre la importancia de este tipo de mastitis, teniendo en cuenta que se presentan entre 15 a 40 veces más que las mastitis clínicas, a las que normalmente preceden. Por otra parte, las mastitis subclínicas son de duraciones largas y difíciles de diagnosticar, merman el volumen de producción y provocan nocivos efectos en la calidad. El periodo de vaca seca es un momento oportuno para chequear la existencia de enfermedades subclínicas como mastitis. Las vacas infectadas en forma subclínica con patógenos de mastitis tales como Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae y Mycoplasma bovis pueden ser identificados fácilmente antes del secado. Un recuento de células somáticas (RCS) individual superior a las células/ml (puntaje linear de 4.0) indica que el animal tiene mastitis subclínica. El cultivo bacteriológico de la leche puede emplearse para identificar patógenos específicos a los fines de efectuar el tratamiento apropiado de estos animales. Las vacas infectadas con Streptococcus agalactiae responden bien al tratamiento de secado y en general se curan. La tasa de curación para las vacas infectadas con Staphylococcus aureus es, en el caso del ganado infectado en forma crónica, menor a un 40%. El uso efectivo de un antibiótico a largo plazo colocado en cada cuarto de la ubre en el último ordeño de la lactancia, reduce la incidencia de nuevas infecciones durante el período de seca. Además, la terapia de secado de las vacas es la mejor forma de curar las mastitis crónicas y subclínicas que durante la lactancia son tratadas muy rara vez. La infusión intramamaria de antibióticos de liberación lenta en el momento del secado (tratamiento de secado) es un componente esencial del programa de control de mastitis en el establecimiento. El tratamiento de secado ayuda a curar cerca del 50% de las mastitis causadas por Staphylococcus aureus y 80% de los estreptococos ambientales (Streptococcus uberis, dysgalactiae, etc.). Un cuarto infectado que es tratado y curado al secado, producirá cerca del 90% de su potencial durante la nueva lactancia. Aún así, si un cuarto permanece infectado o es infectado durante el período de seca, ese cuarto producirá solamente el 60 a 70% de su potencial. El tratamiento con antibióticos de la mastitis durante la lactancia es en gran parte inefectivo. Generalmente, el tratamiento al secado es la forma más efectiva de curar las mastitis subclínicas existentes. Cefa-Sec es una suspensión antibiótica intramamaria para vacas en seca, indicada para el tratamiento de infecciones subclínicas y en la prevención rutinaria de las mastitis de bovinos al inicio del período de secado, causadas por gérmenes sensibles a alguno de los antibióticos de la fórmula. El tratamiento con en el período de seca, está indicado para aquellos animales que pudiesen ocultar los organismos infecciosos en la ubre. Su aplicación deberá hacerse cuando la

3 vaca cesa la producción láctea e ingresa al período de seca. La asociación de sus tres antibióticos le otorga una efectividad completa contra las bacterias causantes de problemas infecciosos en la ubre. La cefalexina es una cefalosporina de primera generación, antibiótico bactericida que ha demostrado ser eficaz en el tratamiento y prevención de la mastitis. Su efectividad es inmediata, ejerciendo su acción durante las primeras 24 horas de aplicado el producto. Es el antibiótico que posee el más alto coeficiente de penetración biodisponibilidad en la glándula mamaria. Esto debido a 3 razones fundamentales: 1) Posee el porcentaje más bajo de ionización en la glándula mamaria (Ziv;1980), 2) Su fracción no ionizada posee una elevada liposolubilidad por lo que atraviesa fácilmente las membranas celulares y 3) Tiene una unión muy baja con las proteínas de la leche (10%) lo que permite una disponibilidad del 90%.Además dicha unión es reversible, funcionando como reservorio del antibiótico. La cefalexina elimina la primera barrera bacteriana. Es activo contra la mayoría de bacterias Gram positivas; entre ellas variedades susceptibles de Streptococcus agalactiae y Staphylococcus aureus; incluyendo variedades resistentes a la penicilina (penicilinasas positivos) que son la principal causa de mastitis. Así mismo es eficaz contra algunas Gram negativas; incluyendo E.coli, Proteus spp., Klebsiella spp., Salmonella spp., Shigella spp. y Enterobacter spp. La neomicina sulfato, asociada al excipiente de larga duración presente en la fórmula, extiende su acción hasta por 4 semanas. La neomicina es el antibiótico más utilizado en combinaciones de drogas debido a su amplio espectro antibacteriano (Ziv, 1980a). Tiene una alta afinidad por las proteínas del tejido mamario y una baja tasa de absorción, lo que explica en parte su permanencia relativamente prolongada en la glándula (Ziv, 1980b). Se complementa con la cloxacilina; asociación sinérgica por excelencia muy utilizada en combinaciones intramamarias. La combinación mostró sinergismo al ser comparada con la aplicación individual de los antibióticos tanto en prevención como en seca (Ziv, 1977; Williams 1971). Su actividad bactericida abarca un gran número de bacterias Gram negativas, lo que aumenta el espectro de la suspensión por su actividad sobre coliformes responsables de mastitis agudas post parto. Entre estos se incluye: E.coli, Klebsiella pneumoniae, Haemophilus spp., Enterobacter spp., Pasteurella spp., Serratia spp., Neisseria spp., Proteus spp., Salmonella spp. y Shigella spp. La cloxacilina es un antibiótico semi sintético, bactericida, perteneciente al grupo de las penicilinas, actúa interfiriendo con el desarrollo de la pared de la célula bacteriana. La fracción benzatínica le otorga a la cloxacilina una acción duradera en la glándula por casi 6 semanas; tiempo suficiente para asegurar protección durante todo el período de secado. Es el antibiótico ideal para el tratamiento de las infecciones intramamarias (Smith, 1966). Su estabilidad en la leche es notable. Contrariamente a la neomicina, la cloxacilina es muy liposoluble. Posee un importante porcentaje de fijación en las secreciones intramamarias (86 6.5%) (Ziv, 1976). Su acción es contra bacterias Gram positivas tales como Estreptococos, Estafilococos, algunas Corynebacterias, Erysipelothrix rhusiopathiae, Bacillus anthracis; pero también contra algunos Gram negativos

4 como Leptospira canicola, Campylobacter foetus y Actinomyces spp. Además, Cefa-Sec contiene vitamina A, que funciona como regenerador epitelial de las capas internas de la glándula mamaria en animales con infecciones debidas a microorganismos patógenos. La adición de Vitamina A reduce las consecuencias del proceso infeccioso y participa manteniendo la integridad de los tejidos intramamarios. Cefa-Sec se administra mediante infusión intramamaria, únicamente en el período seco. Cada cuarto debe ser dosificado con una jeringa de 10 ml en dosis simple al final del último ordeño del período de lactación. El sistema DUO-CAP ofrece la posibilidad de realizar una aplicación profunda (retirando la totalidad de las tapas de la jeringa) o una administración cercana al esfínter del pezón (retirando sólo la primera tapa, la más pequeña). 2. OBJETIVO Determinar la eficacia de una Suspensión Intramamaria sobre la base de Cefalexina Monohidrato, Neomicina Sulfato y Cloxacilina Benzatínica (Cefa-Sec ) en el control de Infecciones Intramamarias durante el Período de Secado en Vacas Lecheras de Alta Producción. 3. MATERIALES Y METODOS Localización del estudio: El presente estudio se realizó en el Establo Lechero de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, ubicada en el Distrito de San Borja, Ciudad de Lima, a una altitud de 50 m.s.n.m. y con una temperatura ambiental promedio de 18º C. Materiales: Seis (06) vacas lecheras de alta producción, raza Holstein, las cuales entraban en período de seca. Suspensión Antibiótica Intramamaria sobre la base de Cefalexina monohidrato, Neomicina sulfato, Cloxacilina Benzatínica y Vitamina A (Cefa-Sec ) Tubos de ensayo estériles para muestras de leche para cultivos bacteriológicos y antibiogramas. Desarrollo del estudio: Se seleccionaron seis (06) vacas lecheras de alta producción, raza Holstein, las cuales entraban en período de seca. Los cuartos mamarios de los cuales se aislaron gérmenes bacterianos (12) fueron tratados con una suspensión antibiótica intramamaria sobre la base de Cefalexina, Neomicina, Cloxacilina y Vitamina A (Cefa- Sec ) para evaluar la eficacia del producto en el control de infecciones intramamarias durante el periodo de secado. Previo al secado se obtuvieron muestras de leche de cada cuarto mamario, a las cuales se les realizó un cultivo bacteriológico para determinar la carga bacteriana así como su respectivo antibiograma, a fin de determinar si los agentes aislados eran sensibles a al menos uno de los componentes de la fórmula. Se repitió este procedimiento al finalizar el periodo de secado (60 días) de dichos animales. Las muestras fueron remitidas al Laboratorio de Patología Clínica de la Facultad de Medicina Veterinaria de Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

5 Los resultados fueron evaluados estableciendo la Tasa de Recuperación (por cuartos por vaca) en los animales, el cual se definió por: Nº de cuartos recuperados T.R.= x 100 Nº de cuartos tratados 4. RESULTADOS Y CONCLUSIONES Los resultados del primer examen bacteriológico arrojaron aislamientos bacterianos en el 50% de los cuartos muestreados. Las bacterias aisladas en dichos cuartos fueron Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae y Staphylococcus spp. Los resultados al antibiograma establecido con las drogas presentes en la fórmula de Cefa- Sec, determinaron que dichas bacterias eran sensibles a al menos un componente de la fórmula. Sesenta (60) días post tratamiento, no se logró aislar ningún germen bacteriano en 10 de los 12 cuartos tratados, representando un 83.33% de eficacia de Cefa-Sec en el control de infecciones intramamarias en el periodo de secado de vacas lecheras. La Tasa de Recuperación establecida fue la siguiente: 10 T.R. = x 100 = 83.33% 12 El uso una suspensión intramamaria durante el secado esta plenamente justificada, teniendo como referencia el espectro de acción de cada droga utilizada. El uso de una suspensión sobre la base de Cefalexina, Cloxacilina y Neomicina, proporciona amplio espectro sobre los principales microorganismos presentes en la ubre tanto en la lactación como en el secado. 5. BIBLIOGRAFIA 1. El Manual Merck de Veterinaria. 5ª Edición. Barcelona España G. Ziv. Practical Pharmacokinetic Aspects of Mastitis Therapy 3: Intramammary Veterinary Medicine/Small Clinical P Wattiaux, Michel A. Mastitis: Prevención y Detección. Instituto Babcock para la Investigación y Desarrollo Internacional de la Industria Lechera. Universidad de Wisconsin-Madison. Pp En: 24.es.pdf 4. Magariños, Haroldo. Producción Higiénica de la Leche Cruda. Una guía para la pequeña y mediana empresa. Capítulo 5: Mastitis En: OS/LA_LECHE/leche_all.pdf 5. Ruegg, Pamela. Calidad de leche y manejo sanitario de la vaca seca. University of Wisconsin, Madison. En: ow_en_enspanol.pdf

6 Cuadro 01. Resultados de los exámenes bacteriológicos realizados antes y 60 días posteriores al secado Nº de Animal Cultivo 1ª muestra Antibiograma (Día 0) Cefalexina Neomicina Cloxacilina AD Streptococcus agalactiae Sensible Intermedio Sensible --- Cuarto afectado Cultivo 2ª muestra (Día 60) AI Streptococcus agalactiae Sensible Intermedio Sensible --- PD PI Streptococcus dysgalactiae Sensible Sensible Sensible --- AD Sthaphylococcus sp. Sensible Intermedio Intermedio --- AI PD PI AD AI Levaduras sp PD PI AD Streptococcus dysgalactiae Sensible Intermedio Intermedio --- AI PD PI Streptococcus dysgalactiae Sensible Intermedio Intermedio --- AD Staphylococcus sp. Sensible Sensible Intermedio Staphylococcus sp. AI Staphylococcus sp. Sensible Sensible Intermedio --- PD Staphylococcus sp. Sensible Sensible Intermedio Staphylococcus sp. PI Streptococcus dysgalactiae Sensible Sensible Intermedio --- AD AI Streptococcus dysgalactiae Sensible Sensible Resistente --- PD PI Streptococcus dysgalactiae Sensible Sensible Resistente --- Total de Cuartos afectados 12 Total de Animales afectados 06

7 Gráfico 01. Presencia Bacteriológica de las muestras iniciales (Día de Secado) 33% 17% 50% Streptococcus agalactiae Streptococcus dysgalactiae Sthapylococcus spp. Cuartos afectados: 12 Gráfico 02. Presencia Bacteriológica de las muestras finalizado el periodo de secado (60 días) 16,67% 83,33% Sthapylococcus spp. Sin presencia bacteriana Cuartos afectados: 12

8 FOTOS ANEXAS Foto 01. Vaca con mastitis clínica Foto 02. Muestra de leche para cultivo Foto 03. Aplicación de Cefa-Sec

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