EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE PROSTAGLANDINA AL MOMENTO DE LA IATF SOBRE LA TASA DE PREÑEZ EN VAQUILLONAS BRITÁNICAS

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PARA GRADUADOS INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC) EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE PROSTAGLANDINA AL MOMENTO DE LA IATF SOBRE LA TASA DE PREÑEZ EN VAQUILLONAS BRITÁNICAS Luciano German Correndo Trabajo Final Para optar al Grado Académico de Especialista en Reproducción Bovina Córdoba 2015

2 INDICE 1. RESUMEN INTRODUCCIÓN HIPÓTESIS DE TRABAJO OBJETIVO GENERAL OBJETIVOS ESPECÍFICOS MATERIALES Y MÉTODOS DESCRIPCIÓN GENERAL DEL ENSAYO DETERMINACIONES ANÁLISIS DE DATOS RESULTADOS DISCUSIÓN CONCLUSIONES BIBLIOGRAFÍA... 13

3 1. RESUMEN El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la aplicación de prostaglandina al momento de la IATF sobre el porcentaje de preñez de vaquillonas británicas. Se utilizaron vaquillonas británicas cíclicas de 22 meses de edad (n=255) que recibieron un dispositivo intravaginal con progesterona (DIB 0,5 g de P4, Syntex, Argentina) y 2 mg IM de benzoato de estradiol (Gonadiol, Syntex, Argentina). 8 días después se retiro el dispositivo, se aplicó una dosis de 500 µg de cloprostenol sódico (2 cm; Ciclase DL, Syntex, Argentina) y 0,5 mg de cipionato de estradiol (1 cm, Cipiosyn, Syntex, Argentina).Las vaquillonas fueron inseminadas a tiempo fijo entre las 50 y 54 hs. de retirado el dispositivo y fueron asignadas al azar para recibir 500 µg de cloprostenol sódico (2 cm Ciclase DL; n=128) o permanecer como controles no tratadas (n=127). El diagnóstico de preñez se realizó a los 30 días después de la IATF por ultrasonografía (Sonoscape, traductor,5 Mhz). El porcentaje de preñez del lote total fue del 52,2% (133/255) y no fue afectado por el tratamiento con PGF al momento de la IATF. No se encontraron diferencias significativas en la tasa de preñez en el momento de la inseminación.

4 2. INTRODUCCIÓN En los últimos años el gran crecimiento de la agricultura no solo llevo a reducir la superficie utilizada por la ganadería sino que también hizo que dicha actividad sea desplazada a zonas de pobre aptitud agrícola. Por lo tanto obligo a la cría bovina a mejorar su eficiencia para no disminuir su producción, esto hizo que se utilicen cada vez más tecnologías y la actividad paso a ser manejada como una empresa. Factores vinculados con la fertilidad sumados a un buen manejo nutricional y sanitario son muy importantes en los planteos de cría para obtener o intentar llegar al máximo objetivo esperado para una explotación ganadera que es de un ternero por vaca por año. Para lograr esto, considerando que la gestación de una vaca ronda los 280 días, se debe lograr que en los 85 días que quedan, se recupere del parto, comience a ciclar nuevamente y quede preñada. Factores como estos determinaran los resultados productivos y económicos de un sistema ganadero de cría. La inseminación artificial se ha impuesto en todo el mundo como un método de gran interés desde el punto de vista zootécnico y económico, incrementando los rendimientos productivos a través del mejoramiento genético en un corto periodo de tiempo. El desarrollo de protocolos de sincronización de la ovulación e inseminación a tiempo fijo (IATF) ha incrementado notablemente la cantidad de vientres de cría incluidos en estos programas (Bó et al, 2005).En este sentido, la IATF y los nuevos protocolos de sincronización de la ovulación, resultan en una opción interesante para aumentar la performance reproductiva sin la necesidad de la detección de celos y lograr preñar animales que aún no están ciclando. (Bó et al, 2006).Es importante, para la implementación de la técnica de IATF en rodeos comerciales, que estos protocolos sean de fácil aplicación y con tasas de preñez de alrededor del 50% (Johnson y Jones, 2005). El tratamiento para IATF más utilizado consta de tres manejos con los animales: 1) la aplicación intravaginal de un dispositivo intravaginal (DIV) impregnado con progesterona (P4) y benzoato de estradiol (BE); 2) retiro del DIV (se deja colocado por 7, 8 ó 9 días), administración de prostaglandina (PGF) y cipionato de estradiol (CPE); y 3) IATF (entre 48 y 56 h de retirado el DIV).

5 Estudios iniciales (Colazo et al., 1999; Cutaia et al., 2001), e incluso otros trabajos (Cutaia et al., 2009), indicaron que el mejor momento para realizar la IATF es entre las 52 a 56 hs posteriores al retiro del dispositivo. Sin embargo, otros trabajos (Huguenine et al., 2009, Ramos et al., 2009, Crepaldi et al., 2009) han demostrado que es posible realizar la IATF por un intervalo mayor de tiempo (48-58 h de removido el DIV) sin afectar las tasas de preñez. El resultado promedio de la IATF es aproximadamente del 50%, y es afectada por la raza, categoría, estado corporal, etc. (Cutaia et al., 2003). Se ha determinado que para lograr una buena fertilidad en un programa de IATF, el tratamiento debe controlar tres aspectos fisiológicos fundamentales: la fase luteal, el desarrollo folicular y la ovulación (Bó et al., 2002). Una de las hormonas más utilizadas, cuya utilización está ampliamente documentada, para el control del ciclo estral es la PGF. Es una sustancia biológicamente potente con muchas aplicaciones en el control de la reproducción (Weems et al., 2006). El uso más común en el bovino está relacionado a su actividad luteolítica, por ejemplo para la sincronización, regresión de un CL persistente, inducción de aborto o parto (Gabriel et al., 2011). Sin embargo, a pesar de que su principal uso está relacionado a la luteólisis, también ha sido reportado que tiene efecto en la ovulación, implantación del embrión, mantenimiento de la preñez y en el posparto (Weems et al., 2006). LaPGF puede estimular la ovulación en vaquillonas prepúberes (Pfeier et al., 2009; Leonardy et al., 2012). Este efecto se debería a que análogos de la prostaglandina aumentaron la capacidad de la pituitaria de responder a la GnRH, mejorando de este modo la liberación de LH (Randel et al., 2006).La prostaglandina producida por el folículo es necesaria para la ovulación de mamíferos (Bridges et al., 2006), sin embargo se desconoce el mecanismo por el cual actúa (Weems et al., 2006). En el presente estudio se intento determinar si la aplicación de cloprostenol al momento de la IATF mejoraba la tasa de concepción HIPÓTESIS DE TRABAJO La aplicación de prostaglandina el momento de la inseminación aumenta la tasa ovulatoria y consecuentemente la tasa de preñez.

6 2.2. OBJETIVO GENERAL Aumentar la tasa de preñez al momento de la IATF con protocolos de Benzoato y Cipionato de Estradiol OBJETIVOS ESPECÍFICOS Determinar si la utilización de un análogo sintético de la prostaglandina F2α como el cloprostenol sódico aplicado al momento de la IATF en vaquillonas británicas cíclicas de 22 meses mejora la tasa de preñez.

7 Mm. 3. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1. DESCRIPCIÓN GENERAL DEL ENSAYO La ganadería bovina de Río Negro ocupa el segundo lugar en el valor bruto de la producción provincial, luego de la producción frutícola. El clima en Río Negro es semiárido con temperaturas en verano entre 25 a 37 ºC durante el día. En invierno son frecuentes las heladas, con temperaturas mínimas de unos pocos grados bajo cero. Las precipitaciones promedio en el período en la provincia de Rio Negro y el sur del Partido de Patagones (Provincia de Buenos Aires) fueron de 358 mm al año (Bassi et al., 2009). Este bajo régimen de lluvias es el condicionante principal de los sistemas productivos. En la Figura 1 se presentan las precipitaciones en distintas localidades la Provincia de Río Negro y en el sur del Partido de Patagones (Provincia de Buenos Aires). Se incluye el Partido de Patagones porque funciona como un complemento, en términos productivos. Hay productores que poseen establecimientos en ambas Provincias, y es el área de mayor siembra de verdeos de invierno para engorde de la región (Kugler et al., 2009). Figura 1. Precipitaciones (mm.) del período , para distintas localidades de Río Negro y Buenos Aires (Bassi et al., 2009). La leyenda de las figuras va al pie de las mismas Precipitaciones y tendencias Viedma Conesa Río Colorado Roca Pomona Patagones Promedio

8 Partiendo de la base que los establecimientos de la región que se describen son de mediana a baja productividad, acarreando problemas de recría, subfertilidad y regulares índices productivos, con destetes que no superan el 58 % anual. El trabajo se realizó en dos establecimientos situados en la Región Patagonia Norte de la República Argentina. El primero, Establecimiento La Limonada ubicado en la provincia de Río Negro, departamento Adolfo Alsina, posee una superficie de 2500 has. de monte y pastizales autóctonos. El segundo, Establecimiento El Triangulo ubicado en la provincia de Buenos Aires, partido de Carmen de Patagones con una superficie de 330 has de pastizales naturales. En ambos casos, el total de la superficie es afectada a la ganadería y la alimentación de los animales y se realiza por pastoreo directo durante todo el año. Los dos establecimientos cuentan con potreros provistos de agua permitiendo hacer una rotación de pastoreo de manera tal que el consumo de alimento se realice en forma eficiente DETERMINACIONES Se revisaron por ultrasonografía 281 vaquillonas británicas (Aberdeen Angus, Hereford y sus cruzas) de 22 meses de edad para determinar la ciclicidad (presencia de cuerpo lúteo o folículos mayores a 8 mm de diámetro y tono). Se seleccionaron 255 vaquillonas cíclicas que fueron programadas en 2 lotes de IATF: el lote I se realizó la IATF el 30/05/2013, y el lote II el 1/06/2013. Se determinó la condición corporal en la escala de 1 a 5 (1=emaciada, 5= obesa), resultando el promedio en 3. Todas las vaquillonas recibieron un DIV con progesterona (DIB 0,5 g de P4, Syntex, Argentina) y 2 mg IM de benzoato de estradiol (Gonadiol, Syntex, Argentina). 8 días después se retiro el DIV, se aplicó una dosis de 500 µg de cloprostenol sódico (2 cm; Ciclase DL, Syntex, Argentina) y 0,5 mg de cipionato de estradiol (1 cm, Cipiosyn, Syntex, Argentina).Las vaquillonas fueron inseminadas a tiempo fijo entre las 50 y 54 hs. de retirado el DIV y fueron asignadas al azar para recibir 500 µg de cloprostenol sódico(2 cm Ciclase DL; n=128) o permanecer como controles no tratadas (n=127). El diagnóstico de preñez se realizó el 30 días después de la IATF por

9 ultrasonografía (Sonoscape, traductor,5 Mhz). El diseño experimental se detalla en la Figura 1. Figura 1. Diseño experimental. DIV= dispositivo intravaginal; P4= progesterona; BE= benzoato de estradiol; PGF= cloprostenol sódico; CE= cipionato de estradiol; IATF= inseminación a tiempo fijo ANÁLISIS DE DATOS Para evaluar si la aplicación de Prostaglandina al momento de la IATF afecta la tasa de preñez, se realizó un análisis de los datos mediante los programas Statview (Abacus Concepts, 1996) e InfoStat (InfoStat, 2011). El modelo estadístico incluyó porcentaje de preñez como variable de respuesta al tratamiento con PGF. Se ajustaron regresiones entre las variables, y los efectos de tratamientos y las medias fueron analizados mediante ANOVA.

10 4. RESULTADOS El porcentaje de preñez del lote total fue del 52,2% (133/255) y no fue afectado por el tratamiento con PGF al momento de la IATF [CONTROL= 53,6% (68/127), PGF= 50,0% (64/128); P=0,838]. Tabla 1. Porcentaje de preñez obtenido en vaquillonas tratadas o no con cloprostenol sódico al momento de la IATF Nivel Porcentaje de Preñez % (n/n) Valor P PGF 50,0% (64/128) 0,838 CONTROL 53,6% (68/127) PGF=vaquillonas tratadas con Cloprostenol sódico al momento de la IATF; CONTROL=vaquillonas no tratadas.

11 5. DISCUSIÓN En el presente trabajo no se encontraron diferencias en la tasa de preñez de vaquillonas británicas cíclicas de 22 meses de edad tratadas o no con PGF el día de la IATF en un protocolo de sincronización basado en progesterona y estradiol. En la bibliografía hay resultados controversiales en el efecto de la PGF al momento de la inseminación artificial (IA). En vacas y vaquillonas de leche la administración de dinoprost no tuvo efecto significativo sobre la preñez cuando se aplicó intramuscular, pero parecería aumentar la preñez cuando se aplicó de manera intrauterina (Gabriel et al., 2011). Del mismo modo, la aplicación de cloprostenol endovenoso al momento de la IA/IATF no afectó la performance reproductiva en vacas en ordeñe, a pesar de aumentar la tasa ovulatoria y la cantidad de ovulaciones dobles (López-Gatius et al., 2004). Por el contrario, aumentó la tasa de preñez en vacas de carne (Morrison et al., 1988) y vacas de leche en ordeñe (Archbald et al., 1992; Kauffold et al., 2009). El uso de PGF aumentaría la capacidad de la pituitaria de responder a la GnRH, mejorando de este modo la liberación de LH (Randel et al., 2006) y mejoraría la tasa ovulatoria (López-Gatius et al., 2004). Sin embargo en este trabajo, se incluyeron únicamente vaquillonas cíclicas, que no tendrían problemas en ovular y esa podría ser la causa del no efecto de la prostaglandina. Futuros trabajos incluyendo vaquillonas pre-púberes hacen falta para evidenciar si la PGF tiene efecto al momento de la IATF.

12 6. CONCLUSIONES El tratamiento con PGF al momento de la IATF no incrementó el porcentaje de preñez en vaquillonas británicas cíclicas, las cuales no tendrían problemas en ovular y esa podría ser la causa del no efecto de la prostaglandina.

13 7. BIBLIOGRAFÍA Archbald L.F., Tran T., Massey R., Klapstein E Conception rates in dairy cows after timed-insemination and simultaneous treatment with gonadotrophin releasing hormone and/or prostaglandin F 2α. Theriogenology 37: Bassi T., Miñon D. y Giorgetti H.D Efectos de la sequía en la ganadería bovina en el noreste patagónico: análisis de la situación actual y perspectivas. Período Bó G. A., Cutaia L., Chesta P., Balla E., Picinato D., Peres L., Maraña D., AvilésM., Menchaca A., Veneranda G. y Baruslli P. S Implementación de Programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo en Rodeos de Cría de Argentina. VI Simposio Internacional de Reproducción Animal, Córdoba, Argentina: Bó G. A., Cutaia L. E., Moreno D. y Tríbulo H Sincronización de celos e inseminación artificial. IRAC, Córdoba, 275 pp. Bó G.A., Cutaia L, Tríbulo, R a. Tratamientos hormonales para inseminación artificial a tiempo fijo en bovinos para carne: algunas experiencias realizadas en Argentina. Primera Parte. Taurus 14: Bridget JP, Fortune JE Regulation, action and transport de la prostaglandins during the periovulatory period in cattle. Mol Cell Endocrinol 263(1-2): 1-9. Colazo M. G., Bó G.A., Illuminati H., Meglia G., Schimidt E. E., Bartolomé J Fixed-time artificial insemination in beef cattle using CIDR-B devices,progesterone and estradiol benzoate. Theriogenology 51:404 abstr. Crepaldi G. A Eficácia de diferentes protocolos de indução da ovulação de intervalos de inseminação em vacas de corte submetidas á IATF. Disertação(mestrado). Universidade de São Pablo. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Departamento de Reprodução Animal. Cutaia L., Moreno D., Villata M. L., Bó G. A Synchrony of ovulation in beef cows treated with progesterone vaginal devices and estradiol benzoate administered at device removal or 24 hours later. Theriogenology 55:408 abstr. Cutaia L., Ramos M., Chesta P. y Bó G. A Efecto del momento de la IATF en vaquillonas de carne cruza cebú tratadas con progesterona y ECP como inductor de la ovulación. VIII Simposio Internacional de Reproducción Bovina. IRAC. Cutaia L, Veneranda G, Tribulo, R, Baruselli, PS, Bó GA Programas de Inseminación Artificial a Tiempo Fijo en Rodeos de Cría: Factores que lo Afectan y Resultados Productivos. V Simposio de Reproducción Animal. Pp

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