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1 Generando resultados técnicamente válidos SEGUNDAS JORNADAS DE ACTUALIZACIÓN ANALÍTICA Rafaela 12 de junio de 2015 Pablo Álvarez

2 Pilares del aseguramiento de la calidad en laboratorios 1. Validación de métodos analíticos 2. Evaluación de la incertidumbre de medición 3. Control de calidad de los resultados

3 Validación de métodos Definición Confirmación, mediante el examen y el aporte de evidencias objetivas, de que se cumplen los requisitos particulares para un uso específico previsto. ISO/IEC 17025:2005

4 Validación de métodos Por qué es necesario validar un método analítico? Millones de mediciones son llevadas a cabo en miles de laboratorios de todo el mundo por diferentes motivos. Mediciones con fines comerciales, relacionadas con la salud, ambientales, forenses, etc. El costo de realizar tales mediciones es alto y costos adicionales pueden aparecer a partir de la toma de decisiones incorrectas basadas en los resultados de esas mediciones. Por lo tanto es muy importante determinar el resultado correcto de una medición y ser capaz de demostrar que ese resultado es correcto.

5 Validación de métodos Por qué es necesario validar un método analítico?

6 Validación de métodos Cómo se valida un método analítico? Ensayo colaborativo Collaborative Testing Un solo laboratorio In-house validation Single-laboratory validation

7 Validación de métodos Cómo se valida un método analítico? establecer requisitos elaborar protocolo ajustar el método validar el método NO apto para el propósito? SI FIN

8 Validación de métodos Acreditación de laboratorios ISO/IEC 17025:2005 Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y de calibración Validación de los métodos El laboratorio debe validar los métodos no normalizados, los métodos que diseña o desarrolla, métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto, así como las ampliaciones y modificaciones de los métodos normalizados, para confirmar que los métodos son aptos para el fin previsto.

9 Validación de métodos Acreditación de laboratorios Qué métodos se consideran normalizados? Publicados por organismos de normalización internacionales, regionales o nacionales (normas), ej.: ISO, EN, NM, ASTM, DIN, BS, IRAM, etc. Publicados por organizaciones reconocidas en diferentes ámbitos (métodos oficiales), ej: AOAC, EPA, SMW&W, USP, FIL, etc.

10 Validación de métodos Acreditación de laboratorios ISO/IEC 17025: Selección de los métodos... El laboratorio debe confirmar que puede aplicar correctamente los métodos normalizados antes de utilizarlos para los ensayos. Si el método normalizado cambia, se debe repetir la confirmación... verificación del método

11 Validación de métodos Acreditación de laboratorios Qué es la verificación de un método? La verificación de un método es el proceso de asegurar que las características de desempeño de un método, establecidas en el documento de referencia, pueden ser alcanzadas por el laboratorio. Las características que suelen ser verificadas son la precisión y la veracidad del método y, en algunos casos particulares, el límite de detección.

12 Validación de métodos Características de desempeño de un método Selectividad (Especificidad) Rango de trabajo instrumental (Linealidad) Límite de Detección Límite de Cuantificación Precisión Veracidad (Exactitud) Robustez Rango de trabajo del método Incertidumbre de medición

13 Validación de métodos Qué características evaluar según el método? Característica de desempeño Métodos cualitativos Análisis de trazas o ultra-trazas Componentes mayoritarios Métodos Físico-Químicos Selectividad - Rango de trabajo instrumental -?? L D - - L Q Precisión - Veracidad - Robustez Rango de trabajo del método - Incertidumbre de medición -

14 Evaluación de la incertidumbre de medición Definición Parámetro, asociado con el resultado de una medición, que caracteriza la dispersión de los valores que podrían ser razonablemente atribuidos al mesurando JCGM 100:2008

15 Evaluación de la incertidumbre de medición Es un indicador de la calidad de una medición. Pero esto no significa que una medición con una menor incertidumbre vaya a tener una valor del mesurando con mayor exactitud: lab. 1 lab. 2 valor verdadero

16 Evaluación de la incertidumbre de medición Por qué es importante evaluar la incertidumbre? Comparación de resultados entre laboratorios Comparación de resultados contra especificaciones o límites regulatorios Evaluación del fitness for purpose de un método de ensayo en una validación

17 Evaluación de la incertidumbre de medición Requerimiento normativo ISO/IEC 17025: Los laboratorios de ensayo deben tener y deben aplicar procedimientos para estimar la incertidumbre de la medición.

18 Evaluación de la incertidumbre de medición Requerimiento normativo Cuándo se debe informar la incertidumbre? ISO/IEC 17025:2005 párrafo c) cuando lo solicite el cliente cuando la incertidumbre afecte el cumplimiento con los límites de una especificación cuando sea pertinente para la validez o aplicación de los resultados de los ensayos

19 Evaluación de la incertidumbre de medición Error vs. incertidumbre ERROR INCERTIDUMBRE Diferencia entre un valor individual y uno de referencia Puede ser un valor >, < ó = 0 Se puede corregir Se estima como valor medio Se combinan linealmente parámetro que caracteriza un intervalo de valores Se calcula como un valor positivo No se puede corregir Se estima como desviación estándar Se combinan cuadráticamente

20 Evaluación de la incertidumbre de medición Error vs. incertidumbre valor medio determinado error incertidumbre x valor verdadero

21 Evaluación de la incertidumbre de medición Principales fuentes de incertidumbre en el análisis químico Definición incompleta del mesurando Muestreo Pureza de los reactivos Calibración del instrumental Efectos de matriz e interferencias Extracción incompleta Efecto de las condiciones ambientales Error de apreciación en la lectura de instrumentos analógicos Error de apreciación en la lectura de un menisco Resolución de instrumentos Materiales de referencia

22 Control de calidad de los resultados Un aspecto importante del sistema de gestión de la calidad de un laboratorio es la planificación y ejecución de actividades de control de calidad con el objetivo de asegurar que los resultados producidos por el laboratorio son de la calidad requerida y aptos para el propósito. Estas actividades se dividen en Control de Calidad Interno (CCI) y Evaluación Externa de la Calidad (EEC). El CCI consiste en una serie de operaciones llevadas a cabo por el personal del laboratorio como parte del proceso de medición.

23 Control de calidad de los resultados Los resultados del CCI son utilizados para determinar si el método de ensayo está operando correctamente y, por lo tanto, si los resultados obtenidos a partir de las muestras de ensayo pueden ser enviados al cliente. LA EEC, en cambio, es llevada a cabo por una organización independiente del laboratorio y es usada para evaluar el desempeño del mismo. Mientras que el CCI se realiza diariamente para aceptar o rechazar resultados de ensayo individuales, la EEC provee una foto periódica del desempeño del laboratorio.

24 Control de calidad de los resultados Requisitos normativos ISO/IEC 17025:2005 Párrafo 5.9.1: El laboratorio debe tener procedimientos de control de la calidad para realizar el seguimiento de la validez de los ensayos llevados a cabo. Los datos resultantes deben ser registrados en forma tal que se puedan detectar las tendencias y, cuando sea posible, se deben aplicar técnicas estadísticas para la revisión de los resultados.

25 Control de calidad de los resultados Requisitos normativos ISO/IEC 17025:2005 Párrafo 5.9.2: Los datos de control de la calidad deben ser analizados y, si no satisfacen los criterios predefinidos, se deben tomar las acciones planificadas para corregir el problema y evitar consignar resultados incorrectos.

26 Control de calidad de los resultados Actividades de Control de Calidad Interno Entre las actividades más importantes del Control de Calidad Interno se encuentran: Análisis de blancos: blancos de reactivos ( reagent blanks ) o muestras blanco ( blank samples ) Análisis repetido de muestras de ensayo Análisis de muestras de control

27 Control de calidad de los resultados Tipos de muestras de control Materiales de Referencia Certificados (MRC) Materiales formulados Muestras reales Muestras reales fortificadas Materiales de interlaboratorios

28 Control de calidad de los resultados Uso de gráficos de control Gráficos de Shewhart Gráficos de resultados individuales (X-chart) Gráficos de medias (X-bar chart) Gráficos de Rangos (R-chart)

29 Control de calidad de los resultados Uso de gráficos de control GRÁFICO DE RESULTADOS INDIVIDUALES Nº de muestra

30 Control de calidad de los resultados Uso de gráficos de control 10 GRÁFICO DE RANGOS Nº de muest ra

31 Control de calidad de los resultados Evaluación Externa de la Calidad La Evaluación Externa de la Calidad (EEC) se lleva a cabo a través de la participación en Ensayos de Aptitud ( Proficiency Testing ), los cuales tienen como objetivo proveer a un laboratorio un monitoreo continuo e independiente de su desempeño. La Organización que lleva a cabo un Ensayo de Aptitud debe proveer un valor de referencia (valor asignado) y un parámetro estadístico que represente la variabilidad de los resultados (desviación estándar). A partir de estos datos se determina un valor de desempeño (por ejemplo, z-score) a través del cual se evalúa a los laboratorios participantes.

32 Documentos de Referencia The Fitness for Purpose of Analytical Methods A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics - EURACHEM 2 nd Edition (2014) Harmonized Guidelines for Single-Laboratory Validation of Methods of Analysis IUPAC (2002) JCGM 100:2008 Evaluation of Measurement Data Guide to the expression of uncertainty in measurement - BIPM Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement - EURACHEM 3 rd Edition (2012) Internal Quality Control - Handbook for Chemical Laboratories - Report TR 569 NORDTEST 4 th Edition (2011) ISO/IEC 17025:2005 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories

33 Muchas Gracias! Colectora de Av. Gral. Paz 5445 San Martín, Buenos Aires Argentina (54 11)

34 error sistemático veracidad Exactitud = veracidad + precisión requisito 1 requisito 2 precisión error aleatorio

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