UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA UNAN-CUR MATAGALPA. VI Ingeniería Agronómica. IX JORNADA UNIVERSITARIA DE DESARROLLO CIENTIFICO.

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1 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA UNAN-CUR MATAGALPA. VI Ingeniería Agronómica. IX JORNADA UNIVERSITARIA DE DESARROLLO CIENTIFICO Ensayo TEMA: LA TILAPIA COMO MATERIA PRIMA EN LA PRODUCCION DE BIODISEL. AUTORA: Yahaira del Carmen Centeno Centeno Tutor: Msc Franklin Rivera Pineda. Asesor; Ing. Evelyn Calvo Reyes. Matagalpa 11 de Octubre 2007

2 PALABRAS CLAVES: Tilapia, biocombustible, petróleo, alimentación, biodiesel Los biocombustibles más utilizados son de origen biológico, que un futuro cercano podrán sustituir gran parte del consumo en combustibles fósiles tradicionales (petróleo y carbón). El biodiésel, es un biocombustible sintético líquido que se obtienen a partir de lípidos naturales como aceites vegetales (raps o canola) o grasas de animales mediante el proceso industriales de esterificación y transesterificación, y que se aplica en la preparación de sustitutos totales o parciales del petrodiésel o gasóleo obtenido del petróleo. Como sustituto total se denomina B100, mientras que otras denominaciones como B5 o B30 hacen referencia a la proporción o porcentaje de biodiésel utilizado en la mezcla. El diesel vegetal, cuyas propiedades son conocidas desde mediados del siglo XIX se destinaba a la combustión en motores de ciclo diésel convencionales o adaptados, según el fabricante y por ello a principios del siglo XXI, en el contexto de la búsqueda de nuevas fuentes de energía y la creciente preocupación por el calentamiento global del planeta, se impulsa su desarrollo como combustible para automóviles alternativo a los derivados del petróleo.(rudolf 1999) Países de la Unión Europea, Canadá, los Estados Unidos, Centro América y Brasil entre otros, están buscando fuentes vegetales alternativas de energía renovable entre las que destacan el biodiésel (a partir de soya, girasol, colza, algodón) y el bioetanol (sorgo, caña de azúcar, maíz). Sin embargo, son plantas con uso comestible provocando en la mayoría de los casos, el incremento en su precio y el desbastó consecuente como ocurrió en meses pasados con el maíz en todo México. La Unión Europea (UE) es el mayor productor mundial de este combustible Verde (El principal productor en el mundo es Alemania, con el 63% de la producción, seguido de Francia con el 17% e Italia con el 5% y el resto de países de la comunidad con el 2%), porque la Junta Europea del Biodiésel (EBB, en ingles) fomenta su uso y desarrollo en toda la comunidad europea, cuya meta es disminuir la contaminación ambiental para el La UE tiene 185 plantas de producción de biodiésel y 58 en construcción en diferentes países europeos, se espera que próximamente España, Polonia e Italia, apliquen políticas ambientales más radicales para el uso del biodiésel. En la UE es donde se han perfeccionado y mejorado los automóviles de biodiésel, principalmente en Alemania y Francia. Estados Unidos solo produce el 10%, y Austria el 3%. Antes sólo se dedicaba a procesar y exportar filetes de tilapía, pero ahora, la empresa Agua Finca Saint Peter Fish (en Honduras) produce 300 mil galones de biodiésel al año con el aceite de este pescado, una alternativa real y más barata que el petróleo. Situada en la aldea El Borbotón, a 200 km al norte de Tegucigalpa, en un paraíso de lagunas artificiales infestadas de peces rojos y negros, la empresa comenzó hace cinco años como procesadora y exportadora de filetes de tilapía y ahora se ha convertido líder mundial de generación de biodiésel de origen animal. Lo que queda del pescado (el espinazo con el estómago, la cola y la cabeza) lo trasladan a una cocina donde lo pasan por una prensa donde le extraen el aceite. Los demás restos son convertidos en harina para alimentar pollos y camarones. El aceite cae en unos estanques donde un grupo de trabajadores lo convierte en biodiésel. Actualmente esta empresa produce 300 mil galones (3.78 litros el galón) de biodiésel al año, que cuesta menos que los combustibles fósiles. Con el biodiésel se genera la electricidad que se consume en toda la planta y se mueven todos los vehículos, incluso diez camiones y ocho autobuses que transportan a los 1,500 empleados que laboran en la empresa y que proceden de comunidades vecinas. Según el Banco Mundial, en Honduras el 70 por ciento de la población (7 millones) vive con menos de dos dólares al día. Esto es una vergüenza para Latinoamérica y en medio de esta

3 dando este proyecto de desarrollo sostenible, a través del biodiésel. El desastre ecológico que se está dando en Honduras, especialmente en la zona donde opera esta compañía, por la destrucción de los bosques por madereros y los incendios forestales, todos los años, que deterioran las fuentes de agua. DESARROLLO El biodiésel se produce a partir de aceites vegetales de diferentes orígenes, como soja, maní, maíz, la avena, aceite para cocinar usado o incluso los excrementos animales. Además de estos, en los últimos años se ha producido biodiesel a partir de la colza, el girasol, la palma y de las algas, siendo la palma la principal fuente vegetal utilizada en Malasia para la producción de biodiesel PME y PEE (Palm Methyl Ester y Palm Ethyl Ester). Los expertos en temas energéticos conocen a este tipo de biocombustibles como combustibles líquidos derivados de las plantas u otros elementos de la biomasa. La tilapía es un pez teleósteo del orden perciforme, perteneciente a la familia Cichlidae, originario de África, habita en la mayor parte de las regiones tropicales del mundo, donde las condiciones son favorables para su reproducción y crecimiento. Estos peces viven en aguas cálidas y su óptimo desarrollo se logra en temperaturas superiores a los 20 C. La temperatura critica inferior esta alrededor de los C. Otra característica por la que es fácil su cultivo es que viven tanto en aguas dulces como salobres e incluso pueden acostumbrarse a las aguas poco oxigenadas. Según Huet, (1978), la ubicación taxonómica de la especie es la siguiente: Phylum chordata Subphilum vertebrata Superclase gnatostomata Serie pises Clase actinopterygil Orden perciformes Suborden ciclidae Familia tilapias y Oreochromis. La tilapía es un pez de buen sabor y rápido crecimiento, se puede cultivar en estanques o en jaulas, soporta altas densidades, resiste condiciones ambientales adversas, tolera bajas concentraciones de oxígeno, es capaz de utilizar la potencialidad alimenticia de los estanques y puede ser manipulada genéticamente. (Wolhfarth et al., 1990). Características y perspectivas del cultivo de la tilapía Las tilaspías, son peces de origen africanos, constituye fuente de alimento proteico de gran valor biológico, comercialización. En los últimos veinte años, las tilapías han despertado un importante y creciente interés como especie acuícola para fines comerciales.

4 Caracterización del género tilapia sp. La reproducción se alcanza a los dos o tres meses cuando llegan a un tamaño de 10 cm., después de un breve rito nupcial se reproducen, incubando la hembra los huevos en la boca, cuando han pasado las etapas de huevo y alevín las crías salen de la boca a tiempos cortos y siempre con el cuidado de la madre que los vuelve a engullir cuando presiente algún peligro, el tiempo que duran los organismos en la boca de la madre y que ésta no se alimenta, es según la temperatura de 7 a 14 días. (Bautista et al., 2004). La tila pía posee gran importancia en la producción de proteína animal en las aguas tropicales y subtropicales de todo el mundo, particularmente en los países en desarrollo (Halstead et al., 1992). Las especies (Sarotherodon sp. y Tilapia sp.) se alimentan de fito y zooplancton, plantas acuáticas, insectos, etc., y desovan naturalmente varias veces al año (Bentsen et al., 1996). Las tilapias en variadas regiones del planeta, son uno de los grupos de peces con mayor futuro económico en cultivos comerciales y para programas de subsistencia alimentaría en virtud a su adaptación a diferentes sistemas de cultivo, tanto en agua dulce, salobre e incluso en agua de mar. (Garduño et al., 2003) Según Castillo (1994) cada 100 gramos de carne de tilapía, contienen: 19,6 g de proteína, 172 calorías y 1,29 g de lípidos. Los pesos vivos de 350 y 500 g son los que poseen mayor aceptación en el mercado internacional.. Se considera además una especie ovípara, que se reproduce naturalmente, y aunque pone pocos huevos (de 1000 a 2000 por hembra como promedio por puesta) es muy prolifera y puede reproducirse en plena adultez una vez cada 45 días, por ser una desovadora parcial. En lo referente a su hábito alimenticio se considera omnívora, con preferencia por el fitoplancton. Las tilapias se dividen en tres géneros principales dependiendo de su comportamiento referido al cuidado parental (Trewavas, 1983): 1. Tilapia: los huevos fertilizados son cuidados en nidos excavados en el fondo del estanque. 2. Oreochromis: los huevos fertilizados son cuidados por la madre manteniéndolos en su boca 3. Sarotherodon: los huevos fertilizados son mantenidos en la boca de la progenitor macho o hembra indistintamente. De los tres géneros, Oreochromis es el más importante en acuicultura debido a que las principales tilapias más adecuadas para su explotación son de dicho género. El comportamiento reproductor de las especies de Oreochromis se describe a continuación: Cuando una hembra Oreochromis está lista para desovar, visita la zona de reproducción o lek. Esta zona consiste en una parte del fondo en la que varios machos han establecido nidos individuales bien defendidos. Después de un breve cortejo, la hembra deposita los huevos mientras que simultáneamente el macho los fertiliza. Entonces la hembra recoge los huevos fertilizados en su boca para incubarlos y abandona la zona de apareamiento. Después de un periodo de incubación de días, los alevines eclosionados son liberados en aguas poco profundas. Luego la hembra reanuda su actividad alimenticia y reacondiciona sus ovarios durante 2-4 semanas y de nuevo está lista para una nueva puesta.

5 La inversión de tiempo y energías por parte de las tilapias en practicar los cuidados parentales también es causa de una inferior productividad en los sistemas de producción de tilapia. Las hembras de Oreochromis normalmente incuban las larvas en su boca unos 10 días. Durante este periodo, están privadas de la mayoría de los alimentos. Como resultado, necesitan de un periodo de aproximadamente dos semanas para reacondicionarse antes de volver a desovar. Por tanto es necesaria cualquier reducción en el periodo de incubación bucal o de reacondicionamiento para aumentar la productividad de los reproductores. El biocombustible es el término con el cual se denomina a cualquier tipo de combustible que derive de la biomasa organismos recientemente vivos o sus desechos metabólicos, tales como el estiércol de la vaca. Los combustibles de origen biológico están sustituyendo, poco a poco, parte del consumo en combustibles fósiles tradicionales (petróleo y carbón), con la ventaja de que son renovables y tienen bajo impacto en el deterioro ambiental. Los biocombustibles más usados y desarrollados son el (bio) etanol y el biodiésel. *El etanol, se obtiene a partir de maíz, caña de azúcar o remolacha. El etanol puede utilizarse como combustible para automóviles por sí mismo o también puede mezclarse con gasolina en cantidades variables para reducir el consumo de derivados del petróleo. El combustible resultante se conoce como gasohol (en algunos países, "alconafta"). Dos mezclas comunes son E10 y E85, que contienen el etanol al 10% y al 85%, respectivamente. El etanol se utiliza en los autos híbridos (mitad gasolina y mitad etanol, usados mayormente en Brasil) para oxigenar la gasolina estándar. Esta última es la responsable de la considerable contaminación del suelo y del agua subterránea. El etanol también se utiliza como combustible de los automóviles de etanol que funcionan con las celdas de combustible. Estas modernas celdas de combustible ahora son mucha mas pequeñas y potentes que sus predecesoras, de hace 50 años atrás, aproximadamente. El etanol que proviene de los campos de cosechas (bioetanol) se esta convirtiendo en un

6 recurso energético potencialmente sostenible que ofrece ventajas medioambientales y económicas a largo plazo en contraposición a los combustibles fósiles (gasolina y petróleo). Se obtiene fácilmente del azúcar o del almidón en cosechas de maíz y caña de azúcar. Hace unas décadas atrás los métodos de producción de bioetanol utilizaban una gran cantidad de energía comparada al valor de la energía del combustible producido. Hoy, la necesidad y la urgencia de sustituir enteramente el consumo de combustibles fósiles por bioetanol, están obligando a los gobiernos como las empresas privadas en mejorar la tecnología de explotación y mejoramiento de este nuevo biocombustible, no contaminante. Brasil es el principal productor y consumidor de etanol (45% de la producción mundial), Estados Unidos representa el 44%, China el 6%, La Unión Europea el 3%, India el 1% y otros países el restante 1% (incluyendo Colombia y Venezuela). Reproducción La tilapia pertenece a la familia de los cíclicos, constituye un grupo amplio de peces endémicos de África, donde su origen se remonta a varios millones de años. Se considera además una especie ovípara, que se reproduce naturalmente, pone pocos huevos (de 1000 a 2000 por hembra como promedio por puesta) es muy prolifera se reproducirse en plena adultez una vez cada 45 días, por ser una desovadora parcial. En lo referente a su hábito alimenticio se considera omnívora, con preferencia por el fitoplancton. Consideraciones y perspectivas del cultivo intensivo de la Tilapia Roja Dentro del género Oreochromis, como una mutación albina se reporta el primer ancestro de tilápia roja en el cultivo artesanal de tilápia Oreochromis mossambicus introducida desde Singapur en 1946, de coloración normal (negra), cerca de la población de Tainan (Taiwán) en 1968 (Castillo, 1994). Ho Kuo (Taiwán Fisheries Research Institute) en 1969 realiza el cruce entre el macho mutante de color rojizo anaranjado O. mossambicus y la hembra de coloración normal O. nilóticus, obteniendo una generación F1 con un 25 % de alevines de coloración rojiza anaranjada, luego de 9 años de cruces selectivos se logró fijar la coloración roja en 70 a 80 % de la población de dicha línea genética (Castillo, 2003). La tilapia roja es un tetrahibrido, es decir un cruce híbrido entre cuatro especies representativas del género Oreochromis: O. mossambicus, O. nilóticus, O. hornorum y O. aurea. Cada una de estas especies aporta al híbrido sus mejores características, resultando uno de los peces con mayor potencial para la acuicultura comercial en el mundo (Paz, 2004). Castillo (2003) señala que aunque en muchas publicaciones aparece la tilapia roja como un tetrahibrido, no es recomendable enmarcar a todas las especies de este género bajo la misma condición ya que son muy raras en el mundo las líneas de tilapia roja que realmente pueden ser consideradas verdaderos tetrahibridos. En cada línea se busca adicionar a ella la mejor característica de cada una de las especies del género Oreochromis empleadas en el mejoramiento de los híbridos rojos, entre estas especies se consideran: - O. nilóticus: para mejorar el crecimiento y la forma corporal (fenotipo). - O. urolepis hornorum: para la obtención de híbridos sólo machos y alta resistencia a la salinidad. - Oreochromis spp. y O. mossambicus: para la coloración roja y resistencia a todo tipo de medios. - O. aureus: para aumentar la tolerancia en aguas frías. Desde hace algunos años, en E.U.A las tilapias rojas constituyen el tercer producto acuático (SEAFOOD) más importado después del camarón marino y el salmón del Atlántico. De los 5 países más poblados del mundo, 4 se encuentran entre los mayores productores y

7 consumidores de tilapia roja en el mundo: China, Estados Unidos, Indonesia y Brasil. (Castillo, 2003). Alamilla (2004) señaló que la coloración roja lograda tras un intensivo trabajo de selección genética estimuló a los productores e investigadores en todo el mundo a iniciar un acelerado programa de hibridación que permitió la obtención de nuevas líneas de tilapia roja, las cuales han sido introducidas paulatinamente en Latinoamérica, siendo las más populares: - Red Florida: O. mossambicus albina x O. urolepis hornorum - Red Aurea: O. aureus Roja. - Red Taiwanesa: O. mossambicus Albina - Red Singapur: O. mossambicus mutante - Yumbo No.1: Red florida x O. niloticus. - Yumbo No.2: Red Florida USA x Red Florida Israel La línea genética Red Florida (O. mossambicus x O. urolepis hornorum) es una variedad excelente para la obtención de talla y carne especialmente cuando los proyectos tienen como finalidad directa la comercialización de filetes, siendo el híbrido ideal para el cultivo en aguas salobres y saladas con niveles que llegan hasta 36 ppm (Pruginin et al., 2000). Un exitoso programa de producción de tilapia roja a nivel comercial debe de estar fundamentado en una rigurosa selección genética lo que permite optimizar los siguientes rasgos: resistencia a enfermedades, rendimiento en carne, calidad del filete, color, tolerancia a la temperatura y salinidad, permite además mejorar el índice de la conversión alimenticia, así como la pigmentación de la piel. Según Pandian (2001) la tilapia roja es una especie óptima para el cultivo en agua dulce o salada, pues tiene una alta resistencia a enfermedades y una gran capacidad para adaptarse a condiciones adversas del medio. Además presenta dentro de sus características anatómicas y organolépticas: pocas espinas y exquisito sabor de su carne por lo que también se le conoce en algunos sectores comerciales como: la gallina del agua. La tilapia roja es un híbrido que en el mercado mundial compite con el pargo rojo, especie de mar muy cotizada también, semejantes ambas, por su forma externa y colores. Sin embargo en cuanto a la calidad del filete, ambas especies se consideran similares (Nelson, 2000). El mayor productor de esta especie en la esfera internacional es Taiwán (FAO, 2003), que exporta prácticamente casi todo su producto hacia Estados Unidos en forma congelada, en tanto los países de América Latina, han aumentado gradualmente sus producciones, siendo las mismas para 1997 cercanas a las toneladas, comercializadas principalmente en forma fresca y fileteada, con alta calidad, y transportada por avión a ese país, incluyendo mas recientemente a Canadá. Como se puede apreciar la tilapia roja ha sido objeto de una gran variedad de estudios genéticos con el objetivo de obtener líneas cada vez más resistentes a las condiciones climáticas de cada región, con excelentes características de su carne. Destacándose entre las mas populares la Red Florida: O. mossambicus X O. urolepis hornorum, introducida en Latinoamérica a principios de los años 80.

8 González (2003) refiere que expertos cubanos trabajan en la obtención del primer cultivo intensivo del pez tilapia monosexo que será destinado inicialmente a la exportación. Este proyecto se basa en el principio de que los machos crecen el doble de las hembras. El novedoso programa se aplica a la tilapia aurea que es una de las más adaptables al clima cubano. Con este procedimiento genético se eleva la eficiencia de la acuicultura, y se incrementa el tamaño de esos animales en menor tiempo. Proceso Energético Antes sólo se dedicaba a procesar y exportar filetes de tilapia, pero ahora, la Aquafinca Saint Peter Fish produce galones de biodiésel al año con el aceite de este pescado, una alternativa real y más barata que el petróleo. Situada en la aldea El Borbotón, a 200 Km. al norte de Tegucigalpa, en un paraíso de lagunas artificiales infestadas de peces rojos y negros, la empresa comenzó hace cinco años como procesadora y exportadora de filetes de tilapia y ahora se ha convertido líder mundial de generación de biodiésel de origen animal. "Somos líderes a nivel mundial en la generación y uso de biodiésel de origen animal, es energía limpia", asegura con orgullo a la AFP la jefa del departamento Socio ambiental de la finca, la griega Vilma Andreakis, mientras hace una presentación en una pantalla con una computadora. Los peces son criados en jaulas flotantes en la represa hidroeléctrica de El Cajón en 9 de las hectáreas del embalse y en 1,7 hectáreas de las del lago de Yojoa, en la misma zona. (Ver anexo # 4) Materiales equipos " Vestido con bata, cobertor en la cabeza y una mascarilla, todo de blanco, excepto las botas negras de hule, Wilfredo Guifarro, de 23 años, trabaja diez horas desde la 4.30 de la mañana sacando dos filetes de cada pescado con un cuchillo filoso. La interminable rutina de Guifarro y otros compañeros y compañeras se lleva a cabo en un salón amplio, bien encerrado con vidrieras y aire acondicionado. Millares de pescados, aún saltando, bajan por una banda desde un estanque adonde llegan por una cargadora mecánica desde los camiones que los transportan de las lagunas. Los trabajadores cortan los filetes y los preparan en cajas de esponja blanca para transportarlos en camiones hacia los aviones que despegan del aeropuerto de San Pedro Sula, 260 km al norte de Tegucigalpa. Lo que queda del pescado: el espinazo con el estómago, la cola y la cabeza pasan a una cocina donde pasan por una prensa para extraerles el aceite. Los demás restos son convertidos en harina para alimentar pollos y camarones. El aceite cae en unos estanques donde un grupo de trabajadores encabezados por Juan Muñoz lo convierten en biodiésel. "El aceite viene con agua y tiene que separarse para después levantarlo a una temperatura de 90 grados centígrados en un tanque en el que se aplica metanol, glicerina para que ya quede el biodiésel".

9 "Estamos produciendo galones 3,78 litros el galón de biodiesel al año, que vale 18 lempiras menos cerca de un dólar que el combustible de fósiles", cuenta Snir. Con el combustible se genera la electricidad que se consume en toda la planta y se mueven todos los vehículos, incluso diez camiones y ocho autobuses que transportan a los empleados que laboran en la empresa y que proceden de comunidades vecinas. "Según el Banco Mundial, en Honduras el 70% de la población 7 millones vive con menos de dos dólares al día. Es una vergüenza en Latinoamérica y en medio de esta vergüenza estamos en este proyecto de desarrollo sostenible", destaca Snir. Lamenta el desastre ecológico que se está dando en el país, especialmente en la zona donde opera su compañía, por la destrucción de los bosques por madereros y los incendios forestales, todos los años, que deterioran las fuentes de agua. El biodiésel es un sustituto del petro-diesel. Se puede obtener a partir de recursos naturales renovables como aceites vegetales y/o grasas animales. Al igual que el diesel del petróleo, el biodiésel funciona en los motores de combustión interna. Se puede usar mezclado en diferentes proporciones con el diesel o al 100%, es compatible con casi todos los motores que actualmente operan con diesel y los vehículos no requieren de ninguna modificación en el motor y tiene la misma eficiencia que el diesel común (Deparment of Energy U.S., 2006) son las siguientes: Las principales ventajas que aporta este nuevo tipo de combustible Compatibilidad con la mayoría de motores diesel actualmente comercializados. No contiene azufre (reducción de las emisiones de óxido de azufre) Bajo contenido en hidrocarburos aromáticos (componentes cancerígenos) Combustible biodegradable y menos tóxico que el petróleo. Condiciones de almacenamiento más seguras (punto de inflamación 100 C más elevado que el combustible diesel) Producción a partir de una fuente renovable. Aunque su utilización es compatible con la mayoría de motores diesel, los inconvenientes de su uso son, actualmente, superiores a las ventajas. Las principales desventajas, vistas solo desde el punto de vista de su uso como combustible, son las siguientes: Debido a que el biodiesel libera una menor cantidad de energía en la combustión (aproximadamente 10%), el consumo de carburante se ve incrementado y la potencia del vehículo reducida. La calidad del arranque en frío se degrada, puesto que la densidad y la viscosidad del biodiesel es mayor. La cantidad de óxidos de nitrógeno emitida es superior y por tanto se necesita un sistema de postratamiento especial para respetar las normas europeas de polución. Actualmente, este combustible no es reconocido como una alternativa por los constructores y por tanto los motores no han sido optimizados par su uso.

10 El coste de la producción del litro de biodiesel (0,5 ) es más elevado que del litro de diesel (0,2-0,25 ), lo que constituye un handicap muy importante. Esta tabla presenta una comparación entre les emisiones contaminantes de un motor diesel funcionando con carburante tradicional, con 20% de biodiesel y con 100% de biodiesel. Planificación para producción de tilapia en tres fases

11 BIBLIOGRAFIA Baroiller, J.F.; Desprez, D.; Carteret, Y.; Tacon, P.; Borel, F.; Hoareau, M.C.; Mélard, C. y Jalabert, B Influence of environmental and social factors on the reproductive efficiency in three tilapia species, Oreochromis niloticus, O. aureus, and the red tilapia (red Florida strain). In: K. Fitzsimmons (Editor), Tilapia Aquaculture: Proceedings from the Fourth International Symposium on Tilapia in Aquaculture. Northeast Regional Agricultural Engineering Service, Ithaca, NY. p Behrends, L.L.; Kingsley, J.B. y Price III, A.H Hatchery production of blue tilapia, Oreochromis aureus (Steindachner), in small suspended hapa nets. Aquaculture and Fisheries Management 24: Coward, K. y Bromage, N.R Spawning periodicity, fecundity and egg size in laboratory-held stocks of a substrate-spawning tilapiine, Tilapia zilli (Gervais). Aquaculture 171: Costa-Pierce, B.A. y Hadikusumah, H Production management of double-net tilapia Oreochromis spp. hatcheries in a eutrophic tropical reservoir. Journal of the World Aquaculture Society 26: de Graaf, G.J.; Galemoni, F. y Huisman, E.A Reproductive biology of pond reared Nile tilapia, Oreochromis niloticus L. Aquaculture Research 30: Ernst, D.H.; Watanabe, W.O.; Ellington, L.J.; Wicklund, R.I. y Olla, B.L Commercial-scale production of Tilapia roja de Florida seed in low- and brackish-salinity Tanques. Journal of the World Aquaculture Society 22: Gunasekara, R.M.; Shim, K.F. y Lam, T.J Effect of dietary protein level on puberty, oocyte growth and egg chemical composition in the tilapia Oreochromis niloticus (L.). Aquaculture 134: Gunasekara, R.M.; Shim, K.F. y Lam, T.J Effect of dietary protein level on spawning performance and amino acid composition of eggs of Nile tilapia Oreochromis niloticus. Aquaculture 146: Gunasekara, R.M.; Shim, K.F. y Lam, T.J Influence of dietary protein level on the distribution of amino acids in oocytes, serum and muscle of Nile tilapia Oreochromis niloticus. Aquaculture 152: Gunasekara, R.M. y Lam, T.J Influence of dietary protein level on ovarian recrudescence in Nile tilapia Oreochromis niloticus (L.). Aquaculture 149: Hulata, G Large-scale tilapia Alevines production in Israel. The Israeli Journal of Aquaculture-Bamidgeh 49: Little, D.C An evaluation of strategies for production of Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.) Alevines suitable for hormonal treatment. Ph.D. thesis, Institute of Aquaculture, University of Stirling, Scotland. Little, D.C.; Macintosh, D.J. y Edwards, P Improving spawning synchrony in the Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.). Aquaculture and Fisheries Management 24:

12 Anexo # 2 Anexo # 3

13 Anexo # 4 Anexo # 5

14 Anexo # 6

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