2 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios
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- Hugo Cortés Fuentes
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2 2 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios de esta edición: Asociación Española de Alérgicos al Látex Dirección y coordinación Asociación Española de Alérgicos al Látex Carlos Albarrán Collado Adoración Carpintero Montoro Pilar Vicente García Asesoría científica Antonio Nieto García Ángel Mazón Ramos La detección y cuantificación ha sido realizada por: Autores: Cristina Rodríguez Rivero Esther García Iglesias Unidad de Análisis y Cuantificación de Interacciones Moleculares Dirección: Javier Benito Andrés ISBN: Depósito Legal: GU-49/2009 Diseño cubierta y maquetación: J.J.Gràfics - c/ Espígol, Alella (Barcelona) Impresión: Grafi-6, s.l.l. - Polig. nº2 de Cabanillas Cabanillas del C. (Guadalajara) Financiado por el Ministerio de Sanidad y Consumo El copyright y otros derechos de propiedad intelectual de este documento pertenecen a la Asociación Española de Alérgicos al Látex. Se autoriza a las organizaciones de atención sanitaria a reproducirlo total o parcialmente para uso no comercial, siempre que se cite el nombre completo del documento, año, institución y financiación.
3 Índice de contenidos - 3 Índice de contenidos Agradecimientos... 5 Prólogo Antecedentes Objetivo del informe Introducción Tecnología utilizada Metodología de extracción y análisis Muestras Resultados Criterios de referencia Resumen de resultados Resultados experimentales Consideraciones para el análisis Análisis de los resultados... 34
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5 Agradecimientos - 5 Agradecimientos Ante la multitud de dudas y preguntas que están llegando a la Asociación Española de Alérgicos al Látex, procedentes de personas que padecen esta enfermedad y en las que nos describen reacciones y síntomas alérgicos, en situaciones aparentemente libres de látex, y una vez evaluados los Métodos Analíticos Actuales para Alérgenos del Látex, vimos la necesidad de realizar el estudio Detección y Cuantificación de Alérgenos del Látex en distintos Productos Sanitarios. La realización de dicho estudio ha sido posible gracias a la colaboración de diferentes personas de la Asociación Española de Alérgicos al Látex, de técnicos del Parque Científico de Madrid, así como de asesores científicos en este campo como el Dr. Antonio Nieto y el Dr. Ángel Mazón del Servicio de Alergia Infantil del Hospital Universitario La fe de Valencia. También nuestro agradecimiento al Dr. Carlos Blanco del Servicio de Alergia del Hospital Universitario La princesa de Madrid. Nuestro más sincero y profundo agradecimiento a todas las personas que han participado y especialmente al Ministerio de Sanidad y Consumo que ha hecho posible la realización de este estudio.
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7 Prólogo - 7 Prólogo Cuando se tiene la oportunidad de hacer el prologo a un trabajo que representa la tarea bien hecha, la tarea oportuna y necesaria, el compromiso aunque, no fácil si resulta estimulante. El comprobar de una manera efectiva que las líneas de actuación que formula el Plan de Calidad del Sistema Nacional de Salud, para la Seguridad del Paciente, son refrendadas con estudios como este, no puede por menos que llenarnos de satisfacción. El papel de las Asociaciones de Pacientes y de forma especial el de la Asociación Española de Alérgicos al Látex, con su compromiso en el despliegue de las Políticas de Seguridad y su capacidad para actuar como catalizador, dinamizador, representa la evidencia de que resulta posible el ejercicio de colaboración con los profesionales, la ciencia y la propia administración sanitaria. Fruto de este espíritu de colaboración es el estudio Detección y cuantificación de alérgenos del Látex en productos sanitarios. Este estudio supone un esfuerzo por aportar información rigurosa, valida y científicamente objetiva, con el claro propósito de reducir el riesgo de sensibilización y posterior desarrollo de cuadros clínicos vinculados a la alergia al látex, tanto para la población general como de forma más especifica a los grupos de riesgo (trabajadores sanitarios y pacientes con múltiples intervenciones). Este estudio es en sí mismo un instrumento que debe ser utilizado para aminorar el riesgo de producir efectos adversos en la atención sanitaria, y en definitiva un instrumento al servicio de la mejora de la Calidad asistencial desde la mejora de la seguridad. Es evidente que el disponer de instrumentos como este, no garantiza la inmediata reducción de los efectos adversos relacionados con el látex, por lo que resulta necesario que tanto los gestores sanitarios como los profesionales implicados introduzcan las medidas oportunas, teniendo en cuenta las recomendaciones aquí realizadas para garantizar una atención sanitaria más segura y de mayor calidad. Por todo ello me complace poder mostrar mi agradecimiento a todas y todos los que forman la Asociación Española de Alérgicos al Látex, por su tenacidad, su empeño, su capacidad de gestión y sobre todo su compromiso, por hacer de nuestro Sistema Nacional de Salud, un referente del compromiso por mejorar la Seguridad de los pacientes. Pablo Rivero Corte Director General de la Agencia de Calidad Madrid, 20 de enero de 2009
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9 Antecedentes Antecedentes La Asociación Española de Alérgicos al Látex pretende ofrecer apoyo y aportar soluciones a personas que padecen alergia al látex. Para ello colabora con autoridades nacionales, regionales, sanitarias, centros educativos y empresas con el objetivo de conseguir que establezcan las medidas oportunas para asegurar la ausencia de látex en aquellos productos destinados a los afectados, asesorar a las organizaciones empresariales en la obtención de certificaciones para la fabricación de productos sin látex y procurar mejorar la calidad de vida de los afectados. La Asociación Española de Alérgicos al Látex contacta con el Parque Científico de Madrid (PCM) y solicita su colaboración para elaborar un informe bajo el título Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios cuyo objetivo es detectar y cuantificar el contenido en látex de diversos productos de uso común en el ámbito sanitario. El Parque Científico de Madrid se compromete a la realización de un análisis completo del contenido en látex de las muestras de interés remitidas por la Asociación Española de Alérgicos al látex y un informe que recoja y analice la información obtenida en el estudio.
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11 Objetivo del informe Objetivo del informe La Asociación Española de Alérgicos al Látex desea analizar el contenido en látex de muestras obtenidas a partir de los productos más comunes utilizados en el ámbito sanitario que pudieran estar en contacto directo con el paciente o ser ingeridos por estos o contaminar el ambiente de los centros sanitarios. También se pretende detectar la posible presencia de látex en productos de referencia etiquetados como libres de látex o aquellos que puedan producir una contaminación involuntaria de superficies, equipos o alimentos que vayan a ser utilizados o administrados a pacientes alérgicos. Para ello se lleva a cabo: Análisis del contenido en Hev b1, Hev b3, Hev b5 y Hev b6.02, principales proteínas del látex con capacidad antigénica, caracterizadas todas ellas por conservar las propiedades de alergenicidad tras el proceso de manufacturación. El análisis se realizará en muestras seleccionadas por la Asociación Española de Alérgicos al Látex. Además del análisis experimental se ha realizado: El análisis e interpretación de los resultados experimentales. Un informe en el que se detalla toda la información relevante acerca de las muestras. Un informe a modo de catálogo que incluye las conclusiones relativas al proyecto.
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13 Íntroducción Introducción El látex natural o caucho natural es un producto que se obtiene de la savia del árbol del caucho Hevea brasiliensis. El látex presenta un gran interés para la industria por sus propiedades físico-químicas y mecánicas. De hecho, es un material ubicuo que se utiliza para la fabricación de más de productos de uso cotidiano y médico. La aparición de la alergia al látex se encuentra fuertemente condicionada por dos factores de riesgo principales: el tiempo y la frecuencia de exposición al látex natural. Por ello, la medida básica para la prevención de esta patología es evitar el contacto con los productos de látex en cualquier ambiente (doméstico, escolar, laboral) lo que resulta muy complicado dada la amplia distribución de los mismos. En las últimas décadas la alergia al látex ha supuesto un problema socioeconómico y sanitario importante. A finales de los años ochenta se produjo un incremento considerable del número de casos debido a la generalización del uso de guantes y preservativos de látex como parte de las medidas recomendadas para evitar el contagio del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). A pesar de las medidas preventivas y de los avances realizados en el diagnóstico y tratamiento de este tipo de alergia, hoy en día esta enfermedad puede considerarse un riesgo potencial, sobre todo, para determinados grupos poblacionales como los trabajadores sanitarios y algunos pacientes que han sufrido repetidas intervenciones quirúrgicas. La prevalencia de sensibilización de la alergia al látex se establece en torno al 0,3-1% para la población general. Considerando los dos factores de riesgo expuestos anteriormente, los datos de prevalencia son mayores entre profesionales con una exposición alta al látex en su puesto de trabajo (personal sanitario en general, 3-17%; cirujanos, 7,2%; personal de quirófano, 6%; personal de enfermería, 5,6%) y entre personas que han sufrido múltiples operaciones quirúrgicas (afectados de espina bífida, 50%; personas con varias cirugías, 6,5%). Además, la alergia al látex se relaciona estrechamente con otros problemas de salud como la dermatitis irritativa y el asma ocupacional debidos al empleo masivo de guantes de látex natural. Las partículas de látex se dispersan con gran facilidad en el ambiente, siendo esta vía de exposición muy difícil de controlar, y son las responsables de los cuadros de asma, sensibilización y de otros síntomas no bien definidos. También se asocia con la alergia a ciertos alimentos, lo que se conoce como síndrome látex-frutas, cuya causa está en la enorme similitud existente entre las proteínas de ciertos alimentos (plátano, aguacate, kiwi, castaña, etc.) y los alérgenos del látex.
14 14 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios La determinación de los alérgenos del látex en los distintos productos manufacturados permitiría: Reducir el riesgo de sensibilización y el desarrollo posterior de un cuadro clínico de alergia al látex para la población en general y, especialmente, en el caso de las personas que pertenecen a los grupos de riesgo (trabajadores sanitarios y pacientes de múltiples operaciones). Reducir el riesgo de sufrir efectos adversos en los centros sanitarios. Proporcionar una atención sanitaria de calidad y con seguridad a los pacientes alérgicos al látex. Acceso a una información clara y veraz sobre la composición real de muchos objetos y materiales y sobre la presencia/ausencia de los alérgenos mayoritarios del látex en ellos para las personas con un diagnóstico previo de alergia al látex.
15 Tecnología utilizada Tecnología utilizada El látex contiene más de 200 proteínas diferentes de las que únicamente 13 han sido identificadas como alérgenos. De esas 13 sólo algunas son capaces de retener capacidad antigénica tras los procedimientos industriales a los que se somete al látex durante su manufactura. Por ello es importante determinar los componentes antigénicos estables presentes en el producto final de cualquier material en contacto con látex. Las referencias bibliográficas indican que son 4 los principales antígenos responsables de la alergia al látex. En este proyecto se detectan y cuantifican (con los límites marcados por la propia técnica 1 ) los siguientes compuestos antigénicos: Hev b 1. Hev b 3. Hev b 5. Hev b Las muestras proporcionadas por la Asociación Española de Alérgicos al Látex y procedentes de diferentes productos sanitarios, ya sean de uso profesional o de este ámbito (por ejemplo: guantes de látex, tetinas de biberones, medicamentos ) Para la detección se utiliza tecnología inmunoenzimática tipo ELISA, en concreto el denominado ELISA tipo sandwich (IEMA). La técnica de inmunoabsorción ligada a enzima o ELISA (del inglés Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) está basada en el principio inmunológico del reconocimiento y unión de los anticuerpos a las moléculas que perciben como extrañas (antígenos). Los ensayos de ELISA se realizan sobre un soporte sólido, como el fondo de un tubo de ensayo o una placa multipocillo, en el que se encuentra inmovilizado el anticuerpo de interés. Cuando se añade la muestra, las proteínas que se quieren detectar se unen al anticuerpo de manera específica. A continuación, se añade un segundo anticuerpo que lleva unida una enzima que cataliza una reacción cuyo producto final es coloreado y nos permite cuantificar la proteína de interés. 1. Kominami G. Sensitivity of immunoenzymometric assay and detection method of enzyme. J Inmunoassay.1994 Feb;15(1):79-92.
16 16 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Figura 1. Esquema del ELISA para la detección de alérgenos del látex. Sus principales ventajas frente a los demás tipos de ensayos son: La posibilidad de estandarizar las muestras. Realizar ensayos cuantitativos de cada uno de los antígenos. Son de alta especificidad. Se eliminarán las interferencias. Esta tecnología ha demostrado su eficacia, sensibilidad y especificidad para la detección de alérgenos en distintos productos sanitarios así como alimentos 2, como ha determinado la FSA (Agencia de Estándares Alimentarios del Reino Unido), estando caracterizado por su baja reactividad cruzada y su reproducibilidad. Tabla 1. Reproducibilidad del sistema ELISA.μg=microgramo l= litro, SD= del inglés Standard Deviation, Desviación Estándar. CV=Variación media concentración/ volumen entre ensayos. 2. Topping J.R., Haines J., Kneller S., Patel P., A preliminary investigation into the possible transfer of latex allergens from latex protein containing materials in contact with food, J. Sci. Food Agric., 2006, 86,
17 Metodología de extracción y análisis - 17 Para elegir esta como la técnica más adecuada, nos hemos basado en la información recogida en el informe Detección y cuantificación de los alérgenos del látex, elaborado por el Círculo de Innovación en Biotecnología madri+d (CIBT) para la Asociación Española de Alérgicos al Látex. En dicho informe se establece claramente que esta es la técnica más adecuada para este tipo de ensayos, además de ofrecer una comparativa de los principales métodos de detección de alérgenos del látex. Tabla 2. Resumen de las principales características de los métodos analíticos tipo ELISA Tal y como se reproduce de dicho informe en la tabla 2, la tecnología IEMA es la que presenta las mejores características de especificidad, sensibilidad, reproducibilidad y correlación con la respuesta alérgica, de entre los ensayos de ELISA siendo estos los más específicos dentro de los métodos de detección de alérgenos del látex, permitiendo esta prueba descartar la existencia de falsos positivos a través de los límites marcados por la propia técnica 2 3. Es importante destacar que la técnica de ELISA es cuantitativa comparativa, permitiendo conocer la concentración de una muestra problema mediante de la comparación de la absorbancia de ésta con la obtenida en una curva patrón de referencia (realizada a partir de muestras de concentraciones conocidas). De esta manera dicha curva actúan como control positivo del ensayo 3. Con el fin de determinar la fiabilidad de los resultados en cada ensayo se incluyó otro control positivo adicional (en este caso un guante de látex) y un control negativo (que se corresponde con una muestra que sólo contiene el tampón en el que se realiza la extracción), y en la que reflejaría la existencia de contaminación, en el caso de que la hubiera. 3. Voller A, Bartlett A y Bidwell A Enzyme immunoassays with special reference to ELISA techniques. J od Clinical Pathology,1978, 31,
18 18 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Además, con el fin de evitar al máximo la posibilidad de contaminación y teniendo en cuenta la posible propagación aérea de los alérgenos del látex los ensayos se realizan en un ambiente libre de látex, prestando especial atención al tipo de guantes utilizados y la limpieza de superficies y equipos. Igualmente se presta especial atención a los valores obtenidos para las muestras adyacentes al control positivo con el fin de monitorizar la posible existencia de contaminación involuntaria del ensayo. Queda patente la ausencia de contaminación a través de los controles negativos y positivos del propio ensayo como se ha expuesto más arriba.
19 Metodología de extracción y análisis Metodología de extracción y análisis 5.1. Recepción de las muestras La Asociación Española de Alérgicos al Látex envía las muestras de distintos materiales y productos a las instalaciones del PCM. Los productos enviados son clasificados y catalogados, recogiéndose de cada uno de ellos toda la información relativa a su recepción y partes a analizar. A cada producto se le asigna un código de identificación y se establecen los criterios y orden de análisis en función de la durabilidad del producto, proceso de extracción 5.2. Extracción y ensayo de detección de los antígenos La extracción de los antígenos del látex de cada una de las muestras se realizará incubando durante 15 minutos en 5 ml tampón fosfato salino (PBS) 1g del producto a analizar en agitación orbital durante 2h, tras eliminar los restos del goma mediante centrifugación, 1 ml del extracto es analizado mediante la técnica de ELISA. Durante el análisis de los productos y con el fin de evitar errores experimentales se presta especial atención a los siguientes aspectos: La superficie y equipos de trabajo están completamente limpios y libres de partículas de látex. Los guantes utilizados durante el ensayo son exclusivamente de vinilo, prestándose especial atención a los controles negativos de los experimentos con el fin de asegurar la ausencia de toda fuente de contaminación. Se establecen controles internos con el fin de detectar cualquier otro tipo de contaminación involuntaria del ensayo Cuantificación de los antígenos presentes en la muestra Las muestras son analizadas para cada uno de los 4 antígenos propuestos al menos por duplicado para asegurar la fiabilidad del resultado. La cantidad mínima de antígeno que puede ser detectada varía según el antígeno determinado, variando entre los 0.1 μg/l y los 2,3 μg/l. Una vez analizadas, se comparan los resultados con el estándar de referencia siempre que se encuentren dentro de los límites de detección, de modo que si es necesario se efectúan diluciones de la muestra para asegurar la fiabilidad de los resultados.
20 20 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios 5.4. Emisión del informe para cada muestra indicando su contenido antigénico Los datos obtenidos una vez detectados y cuantificados los antígenos se recogen en un informe detallado que contiene los datos más relevantes de cada muestra, del contenido de cada uno de los antígenos de referencia Informe final Una vez cuantificadas las muestras se elabora un informe, a modo de catálogo en el que se analizan y detallan los resultados de cada muestra.
21 Muestras Muestras Debido a la heterogenicidad de las muestras a analizar se hace indispensable establecer una metodología común que permita obtener resultados comparables y reproducibles. En la mayoría de casos, las muestras están constituidas por dispositivos sanitarios o envases de medicamentos o similares que constan de varias partes diferenciadas, en cuyo caso se procederá al análisis de cada uno de los elementos que pudieran estar en contacto directo con el paciente, o que pudieran producir una contaminación del producto que se aloja en su interior. Si el resultado del análisis del envase resultara positivo se analizará el contenido con el fin de determinar la posible contaminación del producto alojado en su interior. Se analizaron un total de 50 muestras que incluyen dispositivos médicos, medicamentos, alimentos, materiales y productos utilizados en el ámbito sanitario. Para su análisis se agruparon las muestras en tres categorías: Productos Sanitarios (PS): Incluye dispositivos médicos, apósitos, vendajes, guantes y en definitiva todo material que pueda ser utilizado durante la exploración, hospitalización o asistencia de un paciente. Medicamentos (MED): Incluye medicamentos, así como sus envases y otras soluciones utilizadas comúnmente en el tratamiento de los pacientes. Productos del Ámbito sanitario (AS): Engloba a todos aquellos productos que sin ser utilizados para la asistencia o tratamiento del paciente, están en contacto directo con el mismo. Se incluirán en esta categoría los alimentos, utensilios, materiales o superficies que puedan hallarse en el ámbito sanitario. Según esta clasificación las muestras se agrupan de acuerdo a esta tabla: Tabla 3: Clasificación de las muestras analizadas.
22 22 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios A continuación ofrecemos una relación de las muestras analizadas, esta relación incluye información acerca del modelo y fabricante. A cada muestra le ha sido asignado un código que servirá como identificación de la muestra durante el proceso de análisis. Tabla 4: Relación de las muestras analizadas. (NP: No procede; DES: Desconocido.)
23 Resultados Resultados Se analizó la presencia de antígenos del látex en un total de 65 elementos entre los que se incluyen dispositivos médicos, medicamentos, alimentos, materiales y productos utilizados en el ámbito sanitario Criterios de referencia Para la correcta interpretación de los resultados del análisis se ha establecido una serie de criterios de referencia. Las muestras analizadas son comparadas con las concentraciones del análisis del contenido en Hev b1, Hev b3, Hev b5 y Hev b6.02 de un guante de látex empolvado (guante 1) elegido de un total de 4 analizados procedentes de distintas casas comerciales, tanto empolvados como sin empolvar. Al observar los datos de las concentraciones de los 4 antígenos analizados obtenidos para los guantes de látex ensayados podemos observar que existe una variación considerable en el contenido de Hev b1, Hevb3, Hev b5 y Hev b6.02 para cada guante: Tabla 5: Concentraciones de los antígenos Hev b1, Hevb3, Hev b5 y Hevb6.02 obtenidas del análisis de diversos guantes de látex. La elección del guante que sirve de referencia se realiza atendiendo las siguientes consideraciones: Preferentemente se elige un guante de látex empolvado puesto que este tipo de guantes permiten la liberación al medio aéreo de partículas del látex y aumenta el riesgo de que se produzca una sensibización por inhalación.
24 24 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios El guante seleccionado debe contener una concentración detectable de cada uno de los cuatro antígenos analizados (ya que se utiliza como control positivo del ensayo). Se selecciona el guante empolvado número uno por ser el único que cumple los requisitos. Los Valores de referencia (Vr) correspondientes al guante 1 para cada uno de los 4 antígenos del látex son: Tabla 6: Concentraciones de los antígenos Hev b1, Hevb3, Hev b5 y Hevb6.02 obtenidas del análisis de un guante de látex empolvado. Para cada muestra se calcula un Valor L (de contenido en látex) que es el resultado de dividir la concentración obtenida de cada antígeno (Hev b1, Hev b3, Hev b5 o Hev b6.02) entre su correspondiente Valor de referencia según la fórmula: Según este criterio las muestras analizadas se pueden clasificar en: Tabla 7: Criterios de referencia para la interpretación de resultados.
25 Resultados Resumen de resultados Los resultados obtenidos se recogen en el correspondiente informe del que a continuación se ofrece una tabla resumen que indica la presencia o ausencia (cuadro en blanco) de cada uno de los cuatro antígenos del látex y la zona de la muestra analizada.
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28 28 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Tabla 8: Tabla resumen de la interpretación de los resultados. * La muestra 14 no pudo ser analizada mediante el proceso estándar de extracción, las muestras 35 y 43C absorben el tampón de disolución impidiendo el análisis. Este cuadro resumen recoge los datos obtenidos y los clasifica de acuerdo a su contenido en látex de forma gráfica e intuitiva para que resulte más sencilla su interpretación.
29 Resultados Resultados experimentales Las concentraciones obtenidas para cada muestra, que se corresponden con los valores del cuadro resumen se incluyen en la siguiente tabla:
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32 32 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Tabla 9: Tabla resumen de la interpretación de los resultados. * La muestra 14 no pudo ser analizada mediante el proceso estándar de extracción, las muestras 35 y 43C absorben el tampón de disolución impidiendo el análisis.
33 Consideraciones para el análisis Consideraciones para el análisis Se analizó la presencia de antígenos del látex en un total de 65 elementos entre los incluyen dispositivos médicos, medicamentos, alimentos, materiales y productos utilizados en el ámbito sanitario. El análisis de los resultados obtenidos debe realizarse de acuerdo a las siguientes consideraciones: En aquellas muestras en las que se identifique la presencia de antígenos del látex, se considera que el resultado positivo sólo es aplicable a ese determinado producto en el formato concreto en el que fue analizado y dentro del lote al que pertenece. No se podrán establecer conclusiones relevantes sobre otros productos de la misma marca, en otros formatos o de diferentes lotes, sin haber realizado un análisis previo de los productos. La ausencia de látex dentro de un producto con determinado formato o lote, no garantiza la ausencia de látex en todas las líneas de producto de la marca. Existe la posibilidad de que se produzca una contaminación ambiental con partículas de látex en aquellos productos que no se encuentran envasados, por lo que hay que tener en cuenta los resultados falsos positivos. Se considera positivo cualquier valor que supere el límite de detección para cada antígeno (10 μg/l para los antígenos Hev b1 y Hev b3 y 5 μg/l para los antígenos Hev b5 y Hev b6.02). No existe un valor estándar por encima del cual se produzca la reacción alérgica o por debajo del cual sea imposible que se desencadene, por lo que los valores absolutos obtenidos no tienen un significado concreto a menos que se comparen con un valor de referencia (en este caso las concentraciones obtenidas para un guante de látex empolvado). Los valores obtenidos se expresan en microgramos (mg) de proteína por litro de extracto (cada extracto se obtiene a partir de 1 gramo de producto diluido en 5ml de tampón de extracción).
34 34 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios 9. Análisis de los resultados El informe Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios recoge los resultados del análisis del contenido en antígenos del látex de más de 50 muestras de productos sanitarios. Los antígenos seleccionados para el análisis, Hev b1, Hev b3, Hev b5 y Hev b6.02, son considerados los de mayor alergenicidad dentro de las proteínas presentes en el látex. Así, un 54-80% de los pacientes con espina bífida y un 13-32% de los trabajadores sanitarios están sensibilizados frente a Hev b1 y/o Hev b3 mientras que los antígenos Hev b5 y Hevb 6.02 ocasionan una reacción inmunológica a más del 90% de los pacientes alérgicos. De acuerdo con lo establecido en el estándar del Instituto Nacional para la Seguridad y Salud Ocupacional (NIOSH) debe considerarse que un producto con una concentración en antígenos de látex por debajo de los 30 μg/l es poco probable que induzca reacción de sensibilización al látex. Por su parte, el Comité Europeo de Normalización (CEN) recomienda reducir los niveles en proteínas del látex por debajo de los 50μg/g (el contenido de un guante de látex ronda entre los 300/600 μg/g) para evitar reacciones alérgicas. En cualquier caso, la aparición de una reacción alérgica ante la exposición a una determinada concentración de antígeno depende exclusivamente del grado de sensibilización del paciente. Si prestamos atención a las concentraciones obtenidas para las más de 50 muestras podemos observar que, en la gran mayoría de ellas, se detectan niveles variables del antígeno Hev b1, mientras que para el resto de los antígenos analizados las concentraciones son prácticamente indetectables (hay que tener en cuenta que para un guante de látex la concentración de Hev b1 es entre veces menor que las detectadas para el resto de los antígenos). Además, en once de las muestras aparecen al menos tres de los antígenos analizados en concentraciones variables y, concretamente, en tres de ellas se detectan los 4 antígenos analizados. Entre las muestras analizadas se ha observado que alrededor de unas 25 poseen concentraciones en Hev b1 significativamente superiores a los 30 μg/l (más del doble de la cantidad establecida por el NIOSH). A modo de ejemplo se indican aquellas que muestran un mayor contenido antigénico: Tetina de triple perforación de silicona (M36). Zumo de manzana envasado en brick (M40). Leche desnatada envasada en brick (M42). Pañal (M43). Acetilcolina (M45).
35 Análisis de los resultados - 35 Pasta dentífrica (M48). Solución desinfectante para lentes de contacto (M49). Aparte de estas siete muestras, cabe destacar otras ocho muestras que presentan una cantidad elevada del antígeno Hev b1 que corresponden mayoritariamente a diversos tipos de vendajes. Asimismo, se ha comprobado que en determinadas muestras (por lo general, alimentos envasados) la concentración de antígenos del látex es superior en el contenido si la comparamos con las existentes en el sellado o el interior del envase. Teniendo en cuenta que el antígeno Hev b1 es el único que se detecta para casi todas las muestras en cantidades significativas, se puede realizar una clasificación de las muestras en función de su concentración en Hev b1. Para ello se toma como referencia el valor estándar establecido por el NIOSH (Instituto Nacional para la Seguridad y Salud Ocupacional) de 30 μg/l estableciéndose 3 categorías diferenciadas: Muestras con alto contenido en Hev b1. Cuando la concentración del antígeno supera los 90 μg/l. Muestras con un contenido medio en Hev b1. Cuando la concentración del antígeno se sitúa entre los 30 y los 90 μg/l. Muestras con bajo contenido en Hev b1. Cuando la concentración del antígeno es igual o inferior a los 30 μg/l. La información relativa a la clasificación de las muestras se recoge en las siguientes tablas:
36 36 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Tabla 10: Muestras con un contenido alto en Hev b1.
37 Tabla 11: Muestras con un contenido medio en Hev b1. Análisis de los resultados - 37
38 38 - Detección y cuantificación de alérgenos del látex en distintos productos sanitarios Tabla 12: Muestras con un contenido bajo en Hev b1.
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